贵州医科大学贵州省医学分子生物学重点实验室
- 作品数：53 被引量：126H指数：6
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- 洛伐他汀对大鼠海马神经元毒蕈碱样型乙酰胆碱受体的影响及与ERK信号通路的关系被引量：1
- 2017年
- 目的:观察洛伐他汀对大鼠原代海马神经元毒蕈碱样型乙酰胆碱受体(mAChRs)及细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的作用。方法:选择大鼠原代培养海马神经细胞,(1)将细胞分为对照组、Atropine处理组及U0126处理组,观察mAChRs拮抗剂Atropine及ERK1/2通路抑制剂U0126对M1 mAChR和ERK1/2信号通路的影响;(2)将细胞分为对照组、Atropine及洛伐他汀处理组、洛伐他汀组、U0126及洛伐他汀处理组,观察洛伐他汀联合Atropine或U0126对M1 mAChR和ERK1/2信号通路的影响;采用蛋白印迹法(Western blotting)检测M1 mAChR、总ERK1/2(p-ERK1/2)及磷酸化ERK(phospho-ERK1/2)蛋白表达水平。结果:(1)与对照组相比,Atropine和U0126分别处理细胞后,phospho-ERK1/2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),M1 mAChR和pERK1/2表达水平未见明显改变;(2)与对照组相比,0.1μmol/L洛伐他汀处理神经细胞,M1 mAChR及phosphoERK1/2蛋白表达水平明显增高(P<0.05);与洛伐他汀处理组相比,联合应用洛伐他汀与Atropine处理细胞,M1 mAChR及phospho-ERK1/2蛋白表达水平的升高未受到明显影响,但联合应用洛伐他汀与U0126处理细胞,phospho-ERK1/2蛋白表达水平明显下降(P<0.01),M1 mAChR的升高未受到明显影响。结论 :洛伐他汀能够活化ERK1/2信号通路,并上调mAChRs表达水平,但洛伐他汀上调mAChRs表达水平的作用与ERK1/2信号通路无关。
- 谭龙春赵亮邓成敏刘仙红官志忠
- 关键词：洛伐他汀ERK1/2信号通路海马
- 一氧化氮合酶在氟致大鼠原代海马神经细胞氧化损伤及细胞凋亡中的作用被引量：5
- 2018年
- 目的采用一氧化氮合酶(e NOS)抑制剂L-亚氨基乙基鸟氨酸(L-NIO)探讨一氧化氮合酶在氟致大鼠原代海马神经细胞氧化损伤及细胞凋亡中的作用。方法将体外培养的大鼠海马神经细胞分为对照(空白培养基)组和Na F(0.05、0.1、0.2、0.4、0.5、1、2、4 mmol/L)单独染毒组及L-NIO(1、2、3、4、5、10μmol/L)单独染毒组,染毒48 h后,采用CCK-8法测定细胞活性。将大鼠海马神经细胞分为对照(空白培养基)组、Na F(0.2、1 mmol/L)单独染毒组、Na F和L-NIO联合染毒组(0.2 mmol/L Na F+3μmol/L L-NIO和1 mmol/L Na F+3μmol/L L-NIO),染毒48 h后,检测细胞中e NOS蛋白和m RNA的表达水平及细胞凋亡情况以及细胞培养液中一氧化氮(NO)含量和NOS活力。结果与对照组相比,0.02~4 mmol/L Na F染毒组及4~10 mmol/L L-NIO染毒组大鼠海马神经细胞的存活率均较低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,仅0.2、1 mmol/L Na F染毒组大鼠海马神经细胞中e NOS蛋白和m RNA的表达水平升高,除0.2 mmol/L Na F染毒组e NOS蛋白的表达水平外,差异均有统计学意义(P<0.05)。与相同浓度Na F染毒组相比,0.2、1 mmol/L Na F+3μmol/L L-NIO染毒组大鼠海马神经细胞中e NOS蛋白和m RNA的表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,仅1 mmol/L Na F染毒组大鼠海马神经细胞的凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与相同浓度Na F染毒组相比,0.2、1 mmol/L Na F+3μmol/L L-NIO染毒组大鼠海马神经细胞的凋亡率较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,0.2、1 mmol/L Na F染毒组大鼠海马神经细胞培养液中NO含量和NOS活力较高。与相同浓度Na F染毒组相比,0.2、1 mmol/L Na F+3μmol/L L-NIO组大鼠海马神经细胞培养液中NO含量和NOS活力较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论过量氟可致大鼠原代海马神经细胞NOS活力上升,NO合成增强,导致氧化损伤及细胞凋亡;L-NIO可以拮抗过量氟引起
- 朱丹刘宇平桂传枝官志忠
- 关键词：氟中毒海马神经细胞内皮型一氧化氮合酶一氧化氮
- PPARγ激动剂对抗经氟诱导的SH-SY5Y神经细胞氧化损伤被引量：1
- 2018年
- 目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂15d-PGJ2对氟诱导人神经母瘤SHSY5Y细胞氧化损伤的影响。方法:将体外培养的SH-SY5Y细胞,分为对照组、染氟组(Na F组)、单纯PPARγ激动剂组(R组)、干预组(R+Na F组,先加入15d-PGJ2 2 h后再加Na F),各组处理后培养48 h,用蛋白印记法检测SH-SY5Y细胞中PPARγ蛋白表达水平,微量酶标法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,分析PPARγ蛋白与SOD活性及MDA含量的相关关系。结果:与对照组相比,R组SH-SY5Y细胞中PPARγ蛋白水平、SOD活性及MDA含量无明显改变(P> 0. 05),Na F组SH-SY5Y细胞PPARγ蛋白水平和SOD活性明显降低,MDA含量明显增加(P <0. 05); R+Na F组SH-SY5Y细胞中PPARγ蛋白表达水平及SOD活性明显高于Na F组、MDA含量明显低于Na F组(P <0. 05); SH-SY5Y细胞中PPARγ蛋白表达水平与SOD活性呈正相关关系(r=0. 771,P <0. 05),与MDA含量呈负相关关系(r=-0. 762,P <0. 05)。结论:过量氟会导致体外培养的SH-SY5Y细胞发生氧化损伤,而PPARγ激动剂15d-PGJ2处理后可减轻氟诱导的细胞氧化损伤。
- 刘仙红陈丹曾晓晓董阳婷邓婕齐晓岚齐晓岚李毅吴昌学官志忠
- 关键词：氟过氧化物酶体增殖激活受体Γ激动剂氧化性应激
- 慢性氟中毒大鼠学习记忆能力与血清、海马及皮质脑组织中PGC-1α水平的相关性
- 2018年
- 目的:研究慢性氟中毒大鼠脑组织中过氧化物酶体增殖激活受体γ辅激活因子(PGC-1α)水平,探讨PGC-1α与学习记忆能力的关系。方法:SD大鼠60只,随机分为对照组(饮水含氟量<0. 5 mg/L)、低氟组(饮水含氟量为5. 0 mg/L)、高氟组(饮水含氟量为50. 0 mg/L),染氟时间分别为3个月及6个月;分别于染氟3月及6月时,用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力,采用氟离子选择电极法测定大鼠血清氟含量,用蛋白印记方法检测大鼠海马及皮质组织中PGC-1α蛋白表达水平,分析大鼠海马及皮质PGC-1α蛋白水平与血清氟含量及空间学习记忆能力的相关性。结果:染氟大鼠逃避潜伏期较对照组显著延长、穿越平台次数及逗留平台象限时间明显缩短,以染氟6月组大鼠更明显(P <0. 05);血清氟含量随着染氟浓度的增高及染氟时间的延长而升高,高氟组大鼠血氟含量显著高于对照组,以染氟6月组大鼠尤为明显(P <0. 05);染氟大鼠海马区和皮质区的PGC-1α蛋白表达水平随着染氟浓度的增加和染氟时间的延长而逐渐下降,染氟6月组大鼠海马及皮质PGC-1α蛋白与血氟含量呈负相关(r=-0. 574、-0. 516,P <0. 05)、与大鼠逗留平台象限时间呈正相关(r=0. 76、0. 60,P <0. 05)、与逃避潜伏期呈负相关(r=-0. 542、-0. 58,P <0. 05)。结论:慢性氟中毒大鼠大脑组织PGC-1α蛋白表达水平降低,可能是氟中毒大鼠空间学习记忆能力降低的机制之一。
- 刘仙红陈丹曾晓晓董阳婷邓婕齐晓岚齐晓岚李毅吴昌学官志忠
- 关键词：氟中毒学习记忆能力脑组织SPRAGUE-DAWLEY
- 天麻全药对APP/PS1小鼠痴呆模型的神经保护作用及机制
- 目的研究天麻全药是否可以改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力,减少其对大脑海马区域中β-淀粉样蛋白(Aβ)的聚集程度及老年斑的形成,以及这些作用是否与调控keap1-Nrf2/HO-1抗氧化应激通路方面有关,进一步...
- 高玉梅王晓玲任家谋官志忠沈祥春齐晓岚
- 关键词：天麻
- 文献传递
- 燃煤型氟中毒大鼠学习能力及脑组织B-raf活化的变化被引量：3
- 2017年
- 目的:研究燃煤型氟中毒大鼠学习记忆能力的变化以及氟中毒与B-raf活性等关系。方法:制作氟中毒大鼠模型,以氟斑牙的发生以及脑组织中氟离子浓度评价造模情况,Morris水迷宫空间探索实验检测大鼠学习能力,Western Blot方法检测大鼠脑组织匀浆中B-raf蛋白表达,Realtime PCR法检测大鼠脑组织B-raf活化情况。结果:氟中毒大鼠造模成功,染氟组大鼠逃避潜伏时间均比对照组长,且与染氟剂量相关,提示燃煤型氟中毒大鼠学习能力降低;染氟组大鼠脑组织磷酸化B-raf蛋白和B-raf mRNA水平均高于对照组(P<0.05),与染氟剂量正相关(r=0.993、0.996),提示染氟组大鼠脑组织B-raf信号通路活化。结论:燃煤染氟饲料可引起慢性氟中毒大鼠学习能力减退,其机制可能与氟中毒大鼠脑组织B-raf信号转导通路的激活、B-raf mRNA表达水平及该蛋白激活磷酸化水平升高有关。
- 冉龙艳桂传枝吴昌学何江黄昕官志忠
- 关键词：神经系统
- ALX1基因过表达促进非小细胞肺癌细胞系PC-9上皮间质转化被引量：2
- 2017年
- 目的:探讨ALX1(aristaless-like homeobox 1)基因过表达对非小细胞肺癌细胞系PC-9上皮间质转化(EMT)能力的影响。方法:构建pc DNA3.1-ALX1过表达重组载体,将pc DNA3.1-ALX1和pc DNA3.1分别转染PC-9细胞;采用细胞划痕实验和Transwell实验分析PC-9细胞迁移及侵袭能力的改变,用qRT-PCR和Western印迹法检测EMT过程相关标志物N-钙黏蛋白(N-cadherin)、紧密连接蛋白(ZO-1)以及转录因子slug和snail表达水平的改变。结果:与对照组相比,ALX1过表达组中PC-9细胞的迁移和侵袭能力明显增强(P<0.001),ZO-1表达量明显降低(P<0.05),N-cadherin、slug和snail表达量明显增高(P<0.001)。结论:ALX1基因过表达能够促进非小细胞肺癌细胞PC-9的EMT转化,其机制可能与ZO-1表达量下调和N-cadherin、slug和snail表达量上调有关。
- 王琴容宋科伟吴昌学赵艳谢渊周建奖
- 关键词：上皮间质转化迁移
- 贵州省西部燃煤型地氟病区8～14岁农村小学生营养不良和氟斑牙调查被引量：6
- 2020年
- 目的:了解和评价贵州省西部燃煤型地氟病区8~14岁农村小学生营养不良状况及氟斑牙发生情况及关系。方法:采用分层随机抽样方式,以贵州省西部燃煤型地氟病区毕节、水城、六枝的8~14岁农村小学学生481人为调查对象,按照学生健康检查技术规范GB/T 26343规定的器材和方法进行身高、体质量测量,采用《学龄儿童青少年营养不良筛查标准》(WS/T-456-2014)评价小学生营养不良状况,按照Dean氏分类法对小学生氟斑牙程度进行分类。结果:男学生营养不良总检出率高于女学生(P<0.05),11.0~岁年龄组内男女学生营养不良检出率差异有高度统计学意义(P<0.01),各年龄组学生的营养不良检出率差异有统计学意义(χ2=8.382,P<0.05),以12.5~14.0岁组学生营养不良检出率最高;男学生氟斑牙总检出率高于女学生(P>0.05),各年龄组内男女学生氟斑牙检出率差异均无统计学意义(P>0.05),各年龄组间学生的氟斑牙检出率差异有统计学意义(χ2=7.859,P<0.05);患氟斑牙学生的营养不良检出率高于正常学生(P<0.05),各年龄组患氟斑牙学生与正常学生间营养不良检出率的差异均无统计学意义(P>0.05);贵州省西部地氟病区学生营养不良检出率明显高于贵州省及全国水平(P<0.001)。结论:贵州省西部地氟病地区8~14岁农村小学生营养不良状况较严重,患氟斑牙学生更易发生营养不良。
- 喻艳琴张秀秀田薇李鸣李福成张婷官志忠官志忠吴昌学
- 关键词：营养不良地氟病氟斑牙
- 基于mRNA-miRNA相互作用网络研究阿尔茨海默病机理被引量：1
- 2018年
- 本研究基于表达谱数据系统分析了阿尔茨海默病中的差异表达基因;进一步的GO和KEGG富集分析研究了差异表达基因参与的生物学功能和生物学过程;最后通过mRNA-miRNA相互作用网络,挖掘了阿尔茨海默病中的关键基因和调控机理。研究表明,990个基因在阿尔茨海默病中差异表达（p-value≤0.01,｜log FC｜≥2）,其中332个基因（33.5%）上调,658个基因（66.5%）下调。功能富集（GO）表明,差异基因参与了Regulation of macrophage activation、Myelin sheath和structural constituent of cytoskeleton等功能。KEGG通路富集分析表明,差异基因参与了,Synaptic vesicle cycle、PI3K-Akt signaling pathway、Nicotine addiction、Dopaminergic synapse和Retrograde endocannabinoid signaling等重要的生物学通路。最后,mRNA-miRNA相互作用网络鉴定了在阿尔茨海默病中6个关键的基因,包括TP53INP1、MET、MBNL3、CEBPB、GNAS和SMARCA4,其中TP53INP1和MET在前人的研究中有报道与阿尔茨海默病密切相关,MBNL3、CEBPB、GNAS和SMARCA4是新发现的一些基因。这些基因可能参与了阿尔茨海默病的发生和发展,可以作为其调控位点和药物靶点。
- 臧贵勇潘开昌龙友国余跃生官志忠禹文峰
- 关键词：阿尔茨海默病生物芯片差异表达基因
- 腺病毒载体介导CagA基因表达对原代胃癌细胞糖酵解代谢酶表达的影响
- 2019年
- 目的研究过表达CagA对原代胃癌细胞糖酵解代谢酶表达的影响。方法构建CagA重组腺病毒载体pAdeno-MCMV-CagA-3Flag-IRES2-EGFP(pAdeno-CagA),转染HEK293细胞,包装腺病毒,以感染复数(Multiplicity of infection, MOI) 50感染原代胃癌细胞72 h,并用幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)东亚株GZ7(CagA^+)以MOI 50感染原代胃癌细胞24 h,通过Western blot检测CagA和已糖激酶2(HK2)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、烯醇化酶1(ENO1)、丙酮酸激酶1/2(PKM1/2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)糖酵解代谢酶的蛋白表达,采用流式细胞术检测胃癌细胞周期分布。结果成功构建了CagA重组腺病毒载体pAdeno-CagA,用pAdeno-CagA腺病毒和Hp GZ7感染原代胃癌细胞后糖酵解代谢酶HK2、ENO1、GLUT1的表达与空载组或Hp非感染组比较均显著下调(P<0.05)。与空载组比较,pAdeno-CagA感染胃癌SGC-7901细胞24、48、72 h,其G2/M期细胞百分比显著增加(P<0.05),感染72 h的空载组和CagA腺病毒组G2/M期的比值分别为16.90%和65.93%。结论 Hp通过CagA使原代胃癌细胞糖酵解代谢酶表达下调,可能与DNA损伤使细胞阻滞在G2/M期有关。
- 杨丽萍贾岑岑龙妮娅骆梅杨丹王珺谢渊赵艳赵艳周建奖
- 关键词：腺病毒CAGA胃癌糖酵解
