浙江大学农生环测试中心
- 作品数：61 被引量：233H指数：8
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- 高效液相色谱法测定番茄果肉中4种天然类胡萝卜素含量
- 2024年
- 建立了一种高效液相色谱法测定番茄果肉中4种亲脂性天然类胡萝卜素的方法。该方法选择YMCC_(30)色谱柱,以甲醇、乙腈和异丙醇为流动相,对番茄果肉中叶黄素、玉米黄素、α-胡萝卜素和β-胡萝卜素4种色素的含量测定进行了方法验证。在优化的色谱条件下,4种亲脂性天然类胡萝卜素线性相关性良好,相关系数(R^(2))均高于0.9980;检出限(LOD)在0.05~0.10μg/mL之间,定量限(LOQ)在0.10~0.30μg/mL之间;回收率在85.5%~112.4%之间。该方法操作简单、准确、可靠,适合蔬菜水果中天然类胡萝卜素含量分析。
- 王楠周宝成葛志伟吴筱丹张志军
- 关键词：高效液相色谱类胡萝卜素
- 番茄斑萎病毒运动蛋白NSm的原核表达及抗体制备被引量：2
- 2015年
- 将番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)运动蛋白NSm基因克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,利用大肠杆菌系统表达NSm蛋白,以Ni^(2+)-NTA agarose亲和柱纯化该蛋白与His组氨酸的融合蛋白,免疫家兔制备融合蛋白多克隆抗体。Western blot检测显示,该抗体与NSm重组蛋白以及普通烟病叶中的NSm蛋白具有特异性反应。采用该抗体对TSWV感染的普通烟叶片低温超薄切片进行免疫胶体金标记,透射电镜观察发现特异性金颗粒主要定位在病叶细胞的胞间连丝中,而健康烟草叶片组织中没有金颗粒特异性标记。结果表明,该抗体可用于研究NSm在细胞中的定位。
- 尚卫娜郑宽瑜董家红张仲凯洪健周雪平
- 关键词：番茄斑萎病毒
- 电感耦合等离子体质谱法测定盐酸坦洛新缓释胶囊中9种杂质元素含量被引量：4
- 2021年
- 建立电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)同时测定盐酸坦洛新缓释胶囊中As、Pb、Cd、Hg、Co、V、Ni、Pd和Cr 9种杂质元素含量。采用整颗胶囊微波消解,无需研磨或其它处理。以^(74)Ge、^(115)In、^(209)Bi为内标,采用ICP-MS法进行测定。结果表明:9种杂质元素标准曲线的相关系数均大于0.999;加标回收率在85.54%~119.01%之间;定量限远小于ICH Q3D规定限量值。该方法重复性和精密度良好,且简单、便捷、准确。
- 王娇娇杏朝刚齐东梅陈文波毛翎姿袁京群
- 关键词：盐酸坦洛新缓释胶囊电感耦合等离子体质谱法
- 番茄斑萎病毒运动蛋白NSm在植物细胞和昆虫细胞内的定位被引量：4
- 2012年
- 【目的】研究番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)运动蛋白NSm的细胞定位。【方法】将NSm基因融合GFP后构建到植物双元表达载体pCHF3中,农杆菌介导浸润本氏烟叶片,同时将融合GFP的NSm基因利用Bac-to-Bac杆状病毒表达体系转染昆虫Tn细胞。在激光共聚焦显微镜下观察NSm-GFP在烟草表皮细胞和昆虫Tn细胞中的定位情况。【结果】观察发现与单独表达GFP在细胞壁周围和细胞核处均匀分布不同,NSm-GFP融合蛋白会在植物细胞内扩散,能够在细胞壁边缘定位,并且在胞间连丝处呈不连续的绿色荧光小点,偶尔成对出现在相邻的两个细胞之间;NSm蛋白在昆虫Tn细胞表面产生数量众多的管状结构并向外延伸。【结论】研究结果表明NSm能够特异性定位在植物细胞的胞间连丝处,并能在昆虫Tn细胞内表达,在细胞表面产生运动蛋白小管。
- 尚卫娜孟春梅郑宽瑜丁铭张仲凯洪健周雪平
- 关键词：番茄斑萎病毒NSM细胞定位
- 食品中植物甾醇的色谱分析方法研究进展被引量：9
- 2017年
- 植物甾醇广泛分布于各种食用植物中,主要以游离态甾醇、甾醇酯、甾醇糖苷和脂酰基甾醇糖苷形式存在,具有抗炎、抗菌、抗真菌、降低胆固醇、抗肿瘤等功效。本文综述了近些年关于植物甾醇色谱检测方法的研究进展。植物甾醇常用样品前处理手段有液液萃取、薄层色谱、高速逆流色谱和超临界萃取等,而植物甾醇检测方法主要采用气相色谱法和液相色谱法,其中气相色谱法检测甾醇的灵敏度较高,但液相色谱法具有柱温温和、不破坏样品的特性,适合检测热不稳定植物甾醇。气相色谱法或液相色谱法与质谱检测器联用技术在多组分植物甾醇的同时定量方面取得了一定进展。
- 葛志伟罗自生
- 关键词：植物甾醇色谱分析气相色谱-质谱联用法液相色谱-质谱联用法
- 基于原子对分布函数的纳米Ni_(2)(OH)_(3)NO_(3)原子结构解析
- 2023年
- 近年来,层状羟基硝酸盐[M_(2)(OH)_(3)NO_(3),M=Ni/Cu/Zn/Mg]作为制备特定氧化物的高效前驱体受到了广泛关注。羟基硝酸镍[Ni_(2)(OH)_(3)NO_(3)]作为其中的重要组成部分,其结构至今未有报道。本文利用透射电镜、原子对分布函数、红外光谱和热重分析技术对纳米Ni_(2)(OH)_(3)NO_(3)的微观形貌、原子结构和样品组成等进行表征。研究表明,Ni_(2)(OH)_(3)NO_(3)属单斜晶系,P21空间群,晶胞参数a=5.599?,b=6.055?,c=6.710?,β=90.60°,晶胞体积237.656?~3,每个晶胞中含2个羟基硝酸镍分子。
- 齐东梅展思博黄德军董洪亮吕喜蕾杏朝刚吕光烈袁京群
- 关键词：原子结构
- 茶树2种酰基化黄酮苷的分布规律及加工变化特性研究
- 2022年
- 本研究从茶叶中分离纯化出2种酰基化黄酮四糖苷{quercetin-3-O-[(E)-p-coumaroyl-(1→2)][α-Larabinopyranosyl-(1→3)]-[β-D-glucopyranosyl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)]-β-D-glucopyranoside,F_(1);kaempferol-3-O-[(E)-p-coumaroyl-(1→2)]-[α-L-arabinopyranosyl-(1→3)]-[β-D-glucopyranosyl-(1→3)-α-Lrhamnopyranosyl-(1→6)]-β-D-glucopyranoside,F_(2)},通过自主建立的高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)定量检测方法,系统研究了F_(1)与F_(2)在茶树不同组织、叶位、品种中的分布特点,探究光照对F_(1)和F_(2)含量的影响,以及两者在乌龙茶加工过程中的动态变化。结果表明:F_(1)主要在叶和茎中分布,F_(2)仅存在于叶中;根中未检测到F_(1)与F_(2)。随着叶片成熟度的增加,F_(1)与F_(2)的含量呈先升高后降低的趋势。在42个茶树品种中,F_(1)和F_(2)含量范围分别为0~2.31、0~1.56mg/g;F_(1)在‘黄金菊’中含量最高,在‘本山’和‘绿芽佛手’中未检测到;F_(2)在‘黄金菊’中含量最高,在‘绿芽佛手’‘金面奇兰’‘中黄2号’和‘本山’中未检测到。对3个茶树品种进行遮阴实验,发现遮阴处理组F_(1)含量显著降低,说明光照对其形成具有重要作用。选取‘福建水仙’鲜叶进行乌龙茶加工,F_(1)和F_(2)含量在整个加工过程中呈降低趋势,且在杀青工序中降幅最大,做青工序中降幅最小,表明不同加工工序对两者的含量存在不同程度的影响。
- 黄艳梅周菲菲罗立民黄海涛葛志伟杨江帆屠幼英吴媛媛
- 关键词：茶树品种叶位遮阴处理乌龙茶加工
- 结球甘蓝香叶基芳樟醇合酶基因的克隆及功能分析被引量：4
- 2022年
- 萜类化合物在植物防御病虫害等胁迫中具有重要的生物学和生态学功能,香叶基芳樟醇合酶(geranyllinalool synthase,GES)是萜类合成途径中的关键酶。为解析结球甘蓝中GES的功能,本研究采用聚合酶链反应方法克隆了该基因,检测其在生物胁迫诱导下的表达特性,并对其蛋白质的原核表达特性及生化功能进行了研究和测定。结果表明:BoGES蛋白质的氨基酸序列在十字花科植物中高度保守;小菜蛾、丁香假单胞菌(Pst DC3000)、水杨酸、茉莉酸甲酯诱导均能上调BoGES基因的表达,说明该基因参与生物胁迫诱导的反应;该蛋白质能够以香叶基香叶基焦磷酸为底物催化合成香叶基芳樟醇。此外,用“Y”型嗅觉仪测定玉米螟赤眼蜂对不同浓度香叶基芳樟醇的行为反应,发现香叶基芳樟醇能够吸引赤眼蜂。综上所述,本研究对结球甘蓝中的BoGES基因功能进行了系统研究,为进一步研究十字花科植物中萜类合酶及萜类化合物的生物学和生态学功能提供了科学依据。
- 汪一萍葛洋张译心Asim MUNAWAR张亚东毛黎娟祝增荣周文武
- 关键词：结球甘蓝生物胁迫
- 基于UPLC-Triple-TOF-MS液质联用技术分析薏苡仁中的脂肪酸及其酯类化学成分被引量：11
- 2020年
- 目的通过超高液相色谱串联三重四级杆飞行时间质谱法(UPLC-Triple-TOF-MS)建立一种对薏苡仁中的脂肪酸及其酯类化学成分进行快速定性分析的方法。方法采用Agilent ZORBAX-SB C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm),流动相为乙腈-异丙醇(1∶1),等度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,检测波长为210 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。采用电喷雾离子源正离子模式,扫描范围为m/z 100~1500,并采用全扫描模式对样品数据进行收集,根据高分辨质谱结合二级质谱所得的信息对薏苡仁中脂肪酸及其酯类化学成分进行快速的鉴定。结果检测出薏苡仁中29种脂肪酸及其酯类化学成分,并对化合物的裂解规律进行分析。通过分子离子峰和碎片离子的质荷比、Scifinder和Reaxy网络数据库以及文献得知,这些化合物在离子源的作用下通过失去油酸、亚油酸、棕榈酸、氧化油酸等结构,得到不同质荷比的碎片离子,从而推测出29种脂肪酸及其酯类化合物的名称及结构式。结论研究建立的薏苡仁脂肪酸及其酯类化学成分定性分析的方法准确、快速、灵敏,为提高薏苡仁的质量控制水平及后续阐明薏苡仁的药效物质基础提供了实验依据。
- 朱伟豪杜伟锋罗云云洪浩洪智慧葛志伟李昌煜李昌煜
- 关键词：薏苡仁油酸
- 感染番茄斑萎病毒和番茄环纹斑点病毒的植物叶片细胞病理变化观察被引量：5
- 2016年
- 应用透射电子显微镜观察比较了番茄斑萎病毒(TSWV)和番茄环纹斑点病毒(TZSV)感病植物叶片的细胞超微结构,发现两种病毒在病变细胞内的形态及细胞病理变化特征相似,但病毒含量及细胞受损程度存在明显差异。与TSWV相比,TZSV侵染细胞的病变程度更为严重,叶绿体产生大的囊泡,片层结构被破坏,线粒体也发生囊泡化,而TSWV侵染的细胞内线粒体保存相对完好。高压冷冻-冷冻置换制备的样品细胞病理结构与常规化学固定的相似,但对膜结构的保存更加良好。该结果从细胞病理学上证明了TZSV在田间对农作物造成的危害更加严重。
- 尚卫娜郑宽瑜董家红张仲凯洪健周雪平
- 关键词：番茄斑萎病毒细胞病理学高压冷冻透射电子显微镜
