贵州医科大学基础医学院
- 作品数：909 被引量：1,957H指数：16
- 相关作者：陈汉彬王菲孟立科张姝彭传林更多>>
- 相关机构：中国中医科学院中医药信息研究所武汉大学人民医院中山大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科技计划项目贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 基于Met/PI3K/Akt信号通路研究五味子甲素对人鼻咽癌细胞HONE-1增殖、迁移和侵袭的影响被引量：5
- 2020年
- 目的:研究五味子甲素对人鼻咽癌细胞HONE-1增殖、迁移和侵袭的影响及其可能机制。方法:以HONE-1细胞为研究模型,使用不同浓度[0(空白对照)、10、20、40μmol/L]的五味子甲素处理后,分别采用CCK-8试验、划痕试验和Transwell小室试验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力变化;通过计算机分子对接分析五味子甲素与酪氨酸蛋白激酶(Met)蛋白的结合能力;采用Western blotting法检测细胞中磷酸化酪氨酸蛋白激酶(p-Met)、磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)的相对表达量。结果:与空白对照比较,10、20、40μmol/L五味子甲素处理后细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著减弱(P<0.05);分子对接结果显示,五味子甲素能与Met蛋白的活性口袋稳定结合;Western blotting试验结果显示,与空白对照比较,10、20、40μmol/L五味子甲素处理后细胞中p-Met、p-PI3K、p-Akt、Bcl-2和N-cadherin蛋白的相对表达量均显著降低(P<0.05)。结论:五味子甲素可通过抑制Met/PI3K/Akt信号通路的活化来抑制HONE-1细胞的增殖、迁移和侵袭。
- 陈腾祥梁黎曾智锐雷珊王婧雅孙远梅兰金芝薛燕
- 关键词：五味子甲素增殖酪氨酸蛋白激酶
- 幽门螺杆菌临床标本的最佳运送条件及最适培养基的实验研究
- 目的:探索幽门螺杆菌临床标本的最佳运送条件和最适培养基.方法:将实验菌株加入小牛血清、牛奶运送液,分别置不同温度及气体环境6h后接种于哥伦比亚血琼脂微需氧培养;将20例临床标本分别接种于MH和哥伦比亚血琼脂微需氧培养5天...
- 王琼杨杰潘科黄亚琴陈峥宏王菲綦廷娜
- 白纹伊蚊雌蚊唾液腺匀浆血小板聚集抑制与抗凝血活性的探讨被引量：1
- 2018年
- 本文旨在探讨白纹伊蚊Aedes albopictus唾液腺匀浆粗蛋白(salivary gland extract,SGE)血小板聚集抑制和抗凝血活性,为后续单个唾液蛋白在蚊虫吸血中的功能研究奠定基础。采用比浊法检测低、中、高浓度SGE在不同血小板聚集激活剂作用下对人血小板聚集活性的影响,手工法检测不同浓度SGE对人全血部分凝血活酶时间,凝血酶原时间,凝血酶时间的影响。结果显示,低浓度SGE对Ⅰ型胶原诱导的血小板聚集有显著抑制作用,随着浓度升高具有明显的量效关系,最高抑制率可达90. 36%;高浓度SGE对凝血酶诱导的血小板聚集具有显著抑制作用。SGE对ADP诱导的血小板聚集无明显抑制作用。SGE对人血浆APTT、PT、TT均有延迟效应,1. 25 ng/m L SGE即对TT有显著延迟效应。研究结果表明,白纹伊蚊SGE不仅对胶原诱导的血小板聚集有明显的抑制作用,而且可作用于血液级联凝集全过程。
- 李世琪闫妍翟慧王政艳程金芝吴家红
- 关键词：白纹伊蚊血小板聚集抗凝血
- 贵州2起麻疹暴发疫情病毒分离株基因特征分析被引量：2
- 2016年
- 目的对2014年11月—2015年3月贵州发生的2起麻疹暴发疫情病毒分离株进行基因特征分析。方法采集暴发麻疹病例咽拭子标本，经Vero/SLAM细胞分离培养，从阳性培养物中提取病毒RNA，用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增麻疹病毒核蛋白（N）基因，对扩增产物进行测序与分析。结果2起麻疹暴发共分离到11株麻疹病毒野毒株，均为H1基因型中的H1a基因亚型；进化树分析有2个明显的分支。11株暴发麻疹病毒与H1a基因亚型参考株Chin9322的核苷酸和氨基酸遗传距离差异分别为1.1%～1.6%和0.7%～3.4%。推导出氨基酸序列与参考株Chin9322及近年来贵州流行株比较，结果显示有6株在主要位点[47（G-S）、82（S-G）、122（R-K）]发生变异；2株在位点98（P-L）发生变异。结论H1a基因亚型麻疹病毒是引起2014—2015年贵州省2起麻疹疫情的主要病原，也是贵州省以及全国本土流行的优势基因亚型；且多个不同的H1a基因亚型病毒传播链在贵州省持续流行。本研究为贵州省麻疹的控制和消除提供了一定的基础资料。
- 唐小敏张丽叶绪芳任刚左丽
- 关键词：麻疹病毒基因型
- 埃及伊蚊丝氨酸蛋白酶抑制剂23的基因克隆表达与多克隆抗体制备
- 2017年
- 埃及伊蚊serpin23(丝氨酸蛋白抑制剂23)在雌蚊唾液腺特异高表达,是蚊虫唾液组分的主要蛋白之一。本文设计特异性引物序列,采用RT-PCR技术扩增获得埃及伊蚊广东电白株serpin23成熟肽序列,构建重组表达质粒pET-28a(+)-serpin23并测序验证。经IPTG诱导表达、KCl染色、切胶纯化获取了目的蛋白;制备了小鼠特异性抗serpin23蛋白多克隆抗体。结果显示:获得serpin23成熟肽序列,全长1 197bp,编码399个氨基酸。等电点pI为6.13,具有serpin结构域和一个功能未知的FAINT结构域。pET-28a(+)-serpin23重组质粒可表达了大小约为47 kDa、以包涵体表达为主的融合蛋白。Western Blot结果证明serpin23重组蛋白可以与抗-His标签和抗-serpin23抗体发生免疫反应,约47 kDa处产生特异性条带。本研究成功获得了埃及伊蚊广东电白株serpin23重组表达蛋白和抗serpin23多克隆抗体,为后续功能研究奠定基础。
- 翟慧王政艳吕清巧程金芝李世琪杨茜商正玲吴家红
- 关键词：埃及伊蚊克隆表达WESTERNBLOT
- 巨噬细胞与单核细胞的细胞骨架调控相关的差异基因表达被引量：2
- 2019年
- 目的:分析单核细胞(Mo)向巨噬细胞(Mφ)分化的过程中,细胞骨架的调控相关基因及信号通路的表达变化。方法:CEO数据库获得Mo和Mφ的芯片数据,经RStudio软件分析获得差异表达基因(DEGenes),利用STRING在线工具对DEGenes构建蛋白质相互作用网络(PPI),Cytoscap软件筛选出DEGenes的核心模块;对筛选出的DEGenes的核心模块进行GO和KEGG分析。结果:Mφ相对于Mo的差异表达基因共476个,主要涉及的信号通路包括NOD样受体信号通路和吞噬体信号通路,这些通路中CCL18、CXCL8和C3等相关基因与细胞骨架的调控密切相关。结论:Mo向Mφ分化过程中细胞骨架调控相关基因的表达发生了显著改变。
- 宋咏刚胡文慧余鹏石玉玲石玉玲胡祖权赵雪胡祖权
- 关键词：巨噬细胞单核细胞细胞骨架生物信息学基因芯片
- 川芎嗪防治大鼠脑缺血/再灌注损伤后炎症反应与细胞凋亡的作用被引量：4
- 2021年
- 目的探讨川芎嗪(TMP)防治大鼠炎症反应与细胞凋亡的作用机制。方法选取180只健康雄性SD大鼠,将其随机分为假手术组(sham)、脑缺血/再灌注损伤组(CIRI)、尼莫地平组(N)和TMP组,TMP再分为低剂量组(L)、中剂量组(M)和高剂量组(H) 3个亚组,CIRI组采用改良线栓法制备CIRI模型;TMP各组于术前30 min分别尾静脉注射5 mg/kg、10 mg/kg和30 mg/kg TMP进行干预,N组尾静脉注射尼莫地平(1 mg/kg),sham组和CIRI组给予等剂量的生理盐水。各组SD大鼠于构建CIRI模型苏醒后立即进行神经功能缺损评分,同时各组再灌注24 h进行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色、苏木精-伊红(HE)染色及尼氏(Nissl)染色检测顶叶皮质缺血半暗带形态变化;ELISA检测顶叶皮质白细胞介素(IL)-1β及IL-8的表达,TUNEL检测顶叶皮质中的神经细胞凋亡,免疫荧光染色法检测β-catenin的阳性细胞在顶叶皮质表达,Western blotting检测顶叶皮质Bax和Bcl-2的表达。结果与sham组相比,CIRI组神经功能缺损评分显著增高(P<0.01),HE与Nissl染色见神经细胞肿胀变性,部分呈空泡样改变,细胞核固缩深染,神经元数量减少(P<0.01),尼氏体数量显著减少(P<0.01);炎症因子IL-1β和IL-8的浓度显著上升(P<0.01),凋亡细胞与β-连环蛋白(β-catenin)阳性细胞及其平均吸光度值均显著增多、增高(P<0.01);Bcl-2蛋白表达下降,而Bax蛋白表达显著增加(P<0.01)。与CIRI组比较,N组及TMP干预组大鼠的神经功能缺损评分降低(P<0.01),HE及Nissl染色发现大神经元水肿减轻,少许神经元被破坏,神经元数量增多(P<0.01),尼氏体数增多(P<0.01);炎症因子IL-1β和IL-8浓度显著下降(P<0.01),凋亡细胞与β-catenin阳性细胞及平均吸光度值均显著减少(P<0.01);Bcl-2蛋白表达增加,而Bax蛋白表达显著下降(P<0.01);与N组比较,随着TMP浓度的递增,神经功能、炎症反应与神经元病理变化呈现量效关系(P<0.05)。结论 TMP干预处理后可以减轻�
- 谢明钟朕欧阳训彦郑延益朱俊德
- 关键词：川芎嗪脑缺血再灌注损伤Β-连环蛋白免疫印迹法
- Smad3促进肾小管上皮细胞转分化在高糖诱导肾脏纤维化中的作用被引量：3
- 2019年
- 目的:观察高糖条件下Smad3对肾小管上皮细胞转分化的影响,探讨Smad3在高糖诱导肾脏纤维化中的作用。方法:将体外培养的肾小管上皮细胞分为正常糖组(NG组)、高糖组(HG组),Western blot鉴定细胞表型(E-cadherin及Desmin蛋白)及对高糖刺激后表型蛋白的变化;Western blot和Real-time PCR验证敲低Smad3质粒(Smad3-sh)、过表达Smad3质粒(OE-Smad3)转染肾小管上皮细胞细胞后Smad3蛋白及mRNA表达水平;分别在NG和HG条件下敲低或过表达肾小管上皮细胞Smad3蛋白,采用Western blot检测Smad3、p-Smad3、E-cadherin及Desmin蛋白表达水平。结果:NG组E-cadherin蛋白高表达,而Desmin表达较少;与NG组比较,HG刺激后E-cadherin蛋白表达显著减少(P<0.05),Desmin蛋白表达显著增加(P<0.05);敲低肾小管上皮细胞中Smad3后,E-cadherin蛋白表达显著增加(P<0.05),Desmin蛋白表达显著减少(P<0.05);过表达肾小管上皮细胞中Smad3后,E-cadherin蛋白表达显著减少(P<0.05),Desmin蛋白表达显著增加(P<0.05)。结论:Smad3能促进HG诱导肾小管上皮细胞转分化过程,从而促进高糖介导的纤维化发生。
- 毛彦稳张小欢刘玲伶刘慧铭梁露群张会芳向珈谊王圆圆
- 关键词：高糖SMAD3肾小管上皮细胞上皮细胞转分化肾脏纤维化
- M1巨噬细胞培养液对ER阳性乳腺癌细胞上皮-间质转换的影响及Calpain的介导作用
- 2024年
- 目的 探讨M1巨噬细胞对乳腺癌细胞上皮细胞-间充质转换(EMT)的影响及钙蛋白酶(Calpain)在其中的介导作用。方法 以人乳腺癌细胞系雌激素受体阳性(ER+)细胞MCF-7、T47D及雌激素受体阴性(ER-)细胞MDA-MB-231为模型细胞,实验分为MCF-7细胞及T47D细胞的RPMI-1640组(RPMI-1640纯培养基培养)、M1巨噬细胞条件培养液培养组(M1-CM组)、M1-CM+Calp组[M1-CM联合Calpain抑制剂Calpeptin(50μmoL/L)处理]、M1-CM+CI-Ⅲ组[M1-CM联合Calpain抑制剂Calpain inhibitorⅢ(50μmoL/L)处理],MDA-MB-231细胞的RPMI-1640组、M1-CM组;采用划痕实验和侵袭实验检测各组中MCF-7细胞、T47D细胞、MDA-MB-231细胞的迁移能力及MCF-7细胞的侵袭能力,采用qRT-PCR检测M0巨噬细胞、M1巨噬细胞趋化因子受体7CCR7、趋化因子配体10(CXCL10)及白细胞介素-12(IL-12) mRNA表达水平,采用Western blot实验检测MCF-7细胞、T47D细胞及MDA-MB-231细胞中上皮-钙黏素(E-cad)、纤连蛋白(FN)、波形蛋白(Vim)蛋白水平表达。结果 与RPMI-1640组相比,M1-CM组ER+细胞MCF-7及T47D迁移能力增强(P<0.05),MCF-7细胞侵袭能力增强(P<0.05);ER+细胞MCF-7及T47D E-cad蛋白表达水平下调,而FN、Vim表达上调(P<0.05),而ER-细胞MDA-MB-231中只有E-cad表达上调(P<0.05);与M1-CM组相比,ER+细胞MCF-7及T47D的M1-CM+Calp组、M1-CM+CI-Ⅲ组中M1-CM诱导的ER+乳腺癌细胞EMT效应被逆转(P<0.05)。结论 M1巨噬细胞条件培养液可以促进ER+细胞人乳腺细胞的EMT,但对ER-细胞EMT无明显影响,其促进ER+乳腺癌细胞EMT信号机制可能与Calpain通路有关。
- 詹云惠金爱王旭东
- 关键词：细胞侵袭钙蛋白酶
- DENV-2对HUVECs自噬小体形成和自噬体-溶酶体融合及溶酶体降解途径的影响被引量：1
- 2022年
- 目的探讨登革2型病毒(DENV-2)对原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬小体形成、自噬体-溶酶体融合及溶酶体降解途径的影响。方法于DENV-2感染HUVECs 36 h时,采用透射电子显微镜观察HUVECs中自噬小体形成情况;于DENV-2感染HUVECs 12、24、36及48 h时,采用Western blot检测HUVECs中的微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)表达水平;于DENV-2感染2、4、6、8、10、12、18、24、30、36及48 h时,采用Western blot检测HUVECs中自噬选择性底物p62蛋白表达水平;于DENV-2感染后24、36及48 h,采用Western blot检测HUVECs中突触融合蛋白17(STX17)、突触体相关蛋白29(SNAP29)、囊泡相关膜蛋白8(VAMP8)的表达水平;采用溶酶体红色荧光探针(Lysotracker red)染色法观察DENV感染后HUVECs内溶酶体的pH变化;DENV-2感染HUVECs 24、36及48 h给予自噬抑制剂CQ处理或不处理的HUVECs中LC3-Ⅱ蛋白表达水平。结果透射电子显微镜结果显示,DENV-2感染可诱导自噬小体的形成;Western blot结果显示,DENV感染后12、24、36及48 h时LC3-Ⅱ表达显著增高(P<0.05);p62表达水平在感染早中期无明显变化,30 h后显著增高(P<0.05),36 h到达峰值;DENV-2感染后各时间点STX17蛋白表达水平均降低(P<0.05);感染24 h时,SNAP29、VAMP8蛋白水平增高(P<0.05),但随后36 h和48h蛋白表达均下降(P<0.05);Lysotracker red染色结果和Western blot结果显示DENV-2感染阻碍了溶酶体正常酸化。结论DENV-2感染可激活HUVEC自噬,诱导自噬小体的形成,但DENV-2阻碍了自噬-溶酶体融合,抑制溶酶体正常酸化。
- 胡盼苟小琴程瑶李志阳杨云巧何慧吴宁
- 关键词：登革病毒自噬溶酶体
