中国水产科学研究院珠江水产研究所广东省水产动物免疫技术重点实验室
- 作品数：59 被引量：350H指数：11
- 相关作者：张小江王颖更多>>
- 相关机构：上海海洋大学水产与生命学院天津农学院水产学院广东海洋大学水产学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家高技术研究发展计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 嗜水气单胞菌J-1株灭活疫苗生产工艺的改进被引量：1
- 2011年
- 目的改进嗜水气单胞菌J-1株灭活疫苗的生产工艺,提高培养效率。方法采用改良培养基和产毒素培养基,利用机械式通风搅拌培养J-1菌株,确定发酵培养时间,并比较两种培养基的培养效果;用摇瓶灭活和罐灭活J-1菌株培养液,比较不同浓度甲醛的灭活效果。结果用机械搅拌发酵罐培养J-1菌株,菌体生长12～14 h达峰值,产毒素培养基菌液活菌数平均为102×108 CFU/ml,改良培养基活菌数平均为216×108 CFU/ml,较产毒素培养基提高了111.7%,活菌数最大可达300×108 CFU/ml;改良培养基培养J-1菌株,培养液毒力略高于产毒素培养基;0.3%的福尔马林于37℃灭活24 h,可完全灭活J-1菌株培养液,且制备的灭活疫苗福尔马林残留量符合质量标准。结论改良培养基培养J-1菌株的效果明显优于产毒素培养基,机械式搅拌发酵罐培养嗜水气单胞菌,可比原工艺缩短培养时间一半。
- 陶家发赖迎迢任燕江小燕康光辉张悠石存斌吴淑勤
- 关键词：嗜水气单胞菌生产工艺
- 嗜水气单胞菌GYK1株培养基的优化被引量：4
- 2006年
- 在营养肉汤培养基的基础上,经过一系列嗜水气单胞菌GYK1株培养试验,结果证明,成本价格较低的蔗糖、酵母膏可以代替葡萄糖、牛肉膏,从而降低培养基原料成本;添加少量的K2HPO4和微量元素溶液(Mg2+、Fe2+、Zn2+、Mn2+)可明显提高培养液的活菌数;通过正交试验得到低成本、高得率的适合嗜水气单胞菌GYK1菌株生长的培养基配方,该培养基组成(g/L):蛋白胨10.0、酵母膏10.0、蔗糖15.0、K2HPO42.28;NaCl 5.0微量元素(硫酸镁0.1,硫酸亚铁0.04,硫酸锌0.00375,二氯化锰0.0021)。24 h摇瓶培养,菌液中的最高活菌数可达316×108cfu/mL,比营养肉汤培养基活菌数(151×108cfu/mL)提高100%以上。
- 陶家发吴淑勤潘厚军石存斌
- 关键词：嗜水气单胞菌培养基
- 近海水域病原菌多样性研究进展
- 2008年
- 水产动物病原菌广泛分布于近海,不但影响海水养殖业的发展、海产品的质量安全,甚至还威胁到人类公众健康,因此,开展近海水域病原菌多样性的研究,对于海水养殖业的可持续发展及人类健康都具有重要意义。文章综述了近海水域水产动物病原菌多样性研究主要方法的原理、特点以及局限性,介绍了16S rRNA序列分析、分子杂交、指纹图谱等分子生物学技术,阐述了实时荧光定量PCR、竞争定量PCR等定量研究技术的应用,展望了病原菌多样性研究的发展趋势是原位、快速、高通量、灵敏、多技术联合和准确定量。
- 赖迎迢王颖石存斌吴淑勤
- 关键词：多样性分子杂交指纹图谱定量PCR
- 云斑尖塘鳢肿大细胞病毒属虹彩病毒的分离与鉴定被引量：14
- 2010年
- 2009年10月,广东顺德地区一云斑尖塘鳢养殖场暴发不明病因疾病,发病尖塘鳢体长15—18 cm不等,死亡率约85%,濒死尖塘鳢从池塘底层游至水面,呈现游动失衡状态直至死亡。死亡尖塘鳢腹部膨大,剖检可见肝脏、脾脏、肾脏肿大,有出血斑点,从内脏器官肝脏、脾脏和肾脏未分离到致病菌。病鱼内脏组织研磨过滤除菌后,腹腔注射20尾尖塘鳢,7d后开始出现死亡,10d后全部死亡,对照组无死亡。自然发病鱼和人工感染鱼的病理切片显示肝脏、脾脏和肾脏出现大量肿大细胞,超薄切片经电子显微镜观察,肝脏、脾脏和肾脏观察到大量病毒颗粒。电镜下病毒呈六边形,直径约135 nm,形态与虹彩病毒相似。针对虹彩病毒主衣壳蛋白(Major capsid protein,MCP)序列设计引物,提取自然发病鱼和人工感染鱼的DNA作为模板,均能扩增出预期大小的特异性产物。利用NCBI的Blast搜索,结果显示扩增序列与肿大细胞病毒属的传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)、闪电丽鱼虹彩病毒(DGIV)和条石鲷虹彩病毒(RBIV)MCP核苷酸序列同源性分别为98.8%、98.1%和94.7%。利用MCP序列构建的系统发育树显示,导致云斑尖塘鳢发病死亡的病毒为肿大细胞病毒属虹彩病毒,暂命名云斑尖塘鳢虹彩病毒(MSGIV)。
- 王庆曾伟伟刘春李凯彬常藕琴潘加雄石存斌吴淑勤
- 关键词：云斑尖塘鳢虹彩病毒MCP
- 罗非鱼源拮抗益生菌的筛选、生物学特性及其初步应用研究
- 我国罗非鱼常见的病原菌主要有无乳链球菌、海豚链球菌、嗜水气单胞菌、迟缓爱德华氏菌等，其中无乳链球菌的流行范围最广，危害最为严重。本研究以期从罗非鱼肠道中分离并筛选一株对常见病原菌具有拮抗功能的益生菌，用于罗非鱼细菌性疾病...
- 张德锋高艳侠可小丽刘志刚卢迈新石存斌
- 关键词：罗非鱼病原菌生物安全免疫保护
- 基因Ⅰ型草鱼呼肠孤病毒TaqMan Real-Time PCR检测方法的建立及应用
- 目前国内已发现至少三种基因型的草鱼呼肠孤病毒(Grass Carp Reovirus,GCRV)存在,不同基因型之间GCRV编码蛋白存在较大差异。GCRV S6片段推测编码病毒主要外衣壳蛋白,在目前已发现的GCRV中普遍...
- 殷亮王庆曾伟伟李永刚王英英刘春梁红茹石存斌吴淑勤
- 关键词：草鱼呼肠孤病毒细胞增殖
- 文献传递
- 华南地区大刺鳅的遗传结构与群体动态历史研究被引量：1
- 2023年
- 为掌握华南地区大刺鳅(Mastacembelus armatus)的遗传种质资源现状,并为其管理和保护提供科学依据,采集了华南地区7个独立水系的16个地理群体共计140尾大刺鳅样本,基于Sanger测序获得了2个线粒体基因(COI和Cytb),综合多种分析方法对其遗传结构和群体动态史展开研究。结果表明,华南地区大刺鳅群体形成了3个谱系(I、II和III),分化时间介于0.596~0.676 Ma(百万年前)。此外,单倍型网状图发现不同谱系群体存在共域分布的现象,并提示海南岛群体与大陆群体之间可能存在两条扩散路线。群体遗传分析发现大刺鳅群体间存在显著的遗传分化(F_(ST)=0.676,P<0.001),并且符合距离隔离模式(R=0.463,P=0.001),暗示空间距离是造成大刺鳅遗传分化的一个重要因素。种群动态历史分析表明,大刺鳅群体可能在0.025 Ma经历了种群扩张事件。
- 高尚李跃飞李捷陈蔚涛
- 关键词：遗传分化
- 维氏气单胞菌灭活疫苗对草鱼免疫相关基因表达的影响及其保护效果被引量：5
- 2019年
- 目的探讨维氏气单胞菌(Aeromonas veronii,Av)灭活疫苗对草鱼免疫相关基因表达的影响及保护效果。方法采用GZ09007菌株制备Av灭活疫苗,分别通过浸泡和注射两种途径免疫草鱼,同时设对照组(未免疫),于免疫后2、4、7、11、14和21d,经实时荧光定量PCR法检测草鱼脾脏、头肾、鳃组织中IgM、IL-1β、C3、C-凝集素及溶菌酶的m RNA表达量;于免疫30 d后用同源菌株进行攻毒,连续观察14d,计算各免疫组的相对保护率(relative percent survival,RPS)。结果 2个免疫组的5个免疫相关基因mRNA表达量均显著高于对照组(P <0. 001),且注射组表达量普遍高于浸泡组,注射组IgM基因较浸泡组更早表达,C3、C-凝集素及溶菌酶基因表达量更高或表达持续时间更长。脾脏中IL-1β和溶菌酶基因表达量达最高值为免疫后14~21d,头肾和鳃组织中5个基因表达量达最高值均为免疫后2~4d,各基因表达量最高值为对照组的1.81~37. 52倍。腹腔注射攻毒14 d后,注射组及浸泡组的RPS分别为66.7%和36.7%。结论Av灭活疫苗免疫草鱼后,可增强脾脏、头肾和鳃组织中IgM、IL-1β、C3、C-凝集素及溶菌酶基因mRNA表达,提高草鱼抗Av感染的能力。
- 任燕时云朵曾伟伟王英英李莹莹常藕琴尹纪元石存斌
- 关键词：维氏气单胞菌灭活疫苗实时荧光定量PCR免疫相关基因免疫保护
- 海水鱼弧菌病二联灭活疫苗生产工艺研究
- 目的 确定海水鱼弧菌二联灭活疫苗原液生产工艺.方法 采用摇瓶培养和发酵培养弧菌,测定不同培养时间的菌液浊度和活菌数,添加不同浓度的甲醛进行灭活检验.结果 摇瓶培养时,培养液18h后进入生长稳定期,20-24h达到生长最大...
- 陶家发赖迎迢任燕康光辉张悠石存斌吴淑勤
- 关键词：弧菌灭活疫苗
- 3月龄草鱼种免疫器官组织学及其免疫后免疫基因的转录差异被引量：1
- 2016年
- 为研究处于同一时期但养殖条件不同的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)鱼体规格与发育状态间是否具有一致性,观察压塘3月龄草鱼与普通3月龄草鱼头肾、中肾、肠道和脾脏的显微结构,并对压塘3月龄草鱼与普通3月龄草鱼进行腹腔注射疫苗处理,实时荧光定量PCR检测免疫7 d后、14 d后各期草鱼头肾、中肾、肠道和脾脏中IgM与MHCⅠ的表达量。结果显示,压塘3月龄草鱼各组织发育较普通3月龄草鱼迟缓。压塘3月龄草鱼与普通3月龄草鱼在免疫后,头肾、中肾、肠道与脾脏中IgM和MHCⅠ的表达量均有上升,且IgM与MHCⅠ的相对表达量峰值均出现在普通3月龄草鱼免疫14 d后的中肾中(IgM为74.51倍;MHCⅠ为56.02倍。结果表明,草鱼出血病活疫苗可以增强草鱼头肾、中肾、肠道和脾脏中IgM和MHCⅠ的表达,且在3月龄时期进行注射免疫效果最佳。
- 张鹏英常藕琴石存斌吴淑勤
