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福建中医药大学中西医结合研究院骨病研究所: 作品数：12 被引量：91H指数：6; 相关作者：罗文娟更多>>; 相关机构：北京大学化学与分子工程学院厦门大学附属福州第二医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金陈可冀中西医结合发展基金福建省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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青娥方含药血清对破骨细胞前体RAW 264.7细胞FAK/Src/p130Cas通路及上清液炎症因子的影响被引量：4: 2018年; 目的观察青娥方含药血清对破骨细胞前体RAW 264.7细胞FAK/Src/p130Cas通路相关基因蛋白表达及上清液炎症因子的影响。方法制备青娥方含药血清和生理盐水血清,分别干预体外培养的破骨细胞前体RAW 264.7细胞。干预12 h和24 h后,提取mRNA和蛋白,荧光定量PCR(q PCR)检测FAK/Src/p130Cas及下游信号关键因子CRK、C3G和RAS mRNA表达的变化,应用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测FAK/Src/p130Cas及下游信号关键因子CRK、C3G和RAS蛋白表达的变化;应用ELISA法检测细胞上清液IL-6、TNF-α、PGE2含量。结果与同期生理盐水血清组比较,青娥方含药血清组FAK、Src、p130Cas、CRK、C3G和RAS的RNA和蛋白表达均明显减少(P<0.05,P<0.01),以FAK、Src、p130Cas下降最为显著,而细胞上清液炎症因子IL-6,TNF-α和PGE2含量明显下降(P<0.05,P<0.01)。结论青娥方含药血清能够下调FAK/Src/p130Cas及其下游信号分子的表达,抑制RAW 264.7细胞分泌炎症因子,从而抑制RANKL+MCSF诱导的破骨细胞分化。; 郭世明郑亚明郑亚明陈盛黄美雅林燕萍; 关键词：含药血清 RAW 炎症因子

青娥方对去卵巢大鼠骨组织FAK表达及骨代谢的影响被引量：6: 2016年; 目的:研究青娥方对去卵巢大鼠骨组织FAK表达及骨代谢生化指标的影响。方法:96只3月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组、单纯去卵巢组、骨疏康组、青娥方组。前两组灌服0.9%氯化钠溶液,后两组分别灌服骨疏康及青娥方。分别于用药4、8、12周检测大鼠腰椎FAK m RNA及蛋白含量、胫骨骨密度(BMD)、血清骨碱性磷酸酶(BALP)、酸性磷酸酶(TRAP-5b)、尿脱氧吡啶吩(DPD)、尿肌酐(Cr)等的变化。结果:用药4、8、12周,与假手术组比较,单纯去卵巢组骨FAK m RNA及蛋白表达明显升高(P<0.01),随着时间推移逐渐越低。BMD及血TRAP-5b持续下降,血BALP呈先升高后下降态势,尿DPD/Cr持续升高。青娥方干预4、8、12周,骨FAK m RNA及蛋白表达持续下降,明显低于单纯去卵巢组(P<0.05,P<0.01)。用药8、12周,与单纯去卵巢组比较,青娥方组血BALP、血TRAP-5b水平较之前明显改善(P<0.05,P<0.01);用药12周后,BMD及尿DPD/Cr明显高于单纯去卵巢组(P<0.01),与假手术组相比无明显差异。结论:青娥方能抑制骨组织FAK的表达,提高BMD及血BALP水平,降低血TRAP-5b及尿DPD/Cr含量,降低去卵巢大鼠的骨吸收速度。; 郭世明张文明罗文娟张媛媛林燕萍; 关键词：FAK 骨碱性磷酸酶酸性磷酸酶

鹿衔草不同极性部位对成骨细胞增殖的影响被引量：10: 2010年; 目的:筛选鹿衔草促进成骨细胞增殖的有效部位。方法:用鹿衔草不同极性部位干预人成骨肉瘤MG63细胞,采用MTT法检测筛选鹿衔草石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位等4种不同极性部位中能促进MG63细胞增殖的有效部位,在此基础上采用流式细胞术检测有效部位干预对MG63细胞周期的影响。结果:与空白对照组相比,鹿衔草氯仿部位和正丁醇部位能明显促进MG63细胞增殖(P<0.05或P<0.01),而石油醚部位、乙酸乙酯部位无明显促进MG63细胞增殖的作用(P>0.05);鹿衔草氯仿部位和正丁醇部位明显降低MG63细胞G0/G1期细胞分数(P<0.01),提高增殖指数(P<0.01)。结论:鹿衔草氯仿部位和正丁醇部位能推进体外培养成骨细胞细胞周期,从而促进成骨细胞增殖。; 吴银生黄美雅陈旭征何嘉承林煜林燕萍; 关键词：MG63细胞细胞增殖细胞周期鹿衔草活性部位

健骨颗粒对大鼠骨组织端粒酶逆转录酶增龄性变化的干预作用被引量：2: 2016年; 目的:探讨健骨颗粒对雌激素介导的骨组织端粒酶逆转录酶增龄性变化的干预作用。方法:6、7、10、15月龄SD大鼠雌雄各半,6月龄组直接处死取材,其余各组均随机分为健骨颗粒组和生理盐水组,雌雄各半,灌胃3个月后处死取材。左侧股骨行X线摄片。第5腰椎行HE染色及图像分析。ELISA法检测血清中的BGP、TRACP5b、E2、T和TNF-α含量。SYBR GREEN法检测第1腰椎中TERT、ER和NF-κB m RNA表达。Western blot法检测第2腰椎TERT、ERα蛋白的表达。结果:血清中BGP、TRACP5b、E2、T随月龄增大降低,且生理盐水组低于健骨颗粒组(P<0.01,P<0.05)。TNF-α随着月龄增大逐渐升高,生理盐水组高于健骨颗粒组(P<0.01,P<0.05)。骨组织中ERα、TERT m RNA与蛋白表达均随月龄的增长而降低,生理盐水组明显低于健骨颗粒组(P<0.01,P<0.05)。NF-κB的m RNA表达随月龄增长逐渐升高,且生理盐水组明显高于健骨颗粒组(P<0.01)。腰椎椎体及股骨头骨小梁随月龄增加逐渐出现骨质疏松的病理形态改变,且生理盐水组较健骨颗粒组明显(P<0.01)。结论:健骨颗粒能在一定程度上提高大鼠体内E2、T水平,从而有效激活骨组织TERT使成骨细胞端粒酶活性增加,减缓成骨细胞凋亡进程。; 林煜张怡元黄云梅吴银生林燕萍; 关键词：健骨颗粒端粒酶逆转录酶雌激素受体Α 增龄

肾主骨理论与雌激素介导的骨组织端粒酶逆转录酶增龄性变化之关系研究被引量：3: 2015年; 目的:通过实验研究探讨"肾主骨"理论和"雌激素介导的骨组织端粒酶逆转录酶增龄性变化"的关系。方法:收集不同年龄段不同性别符合纳入标准、排除标准的人的松质骨,采用Real-time PCR、Western Blot等方法检测各年龄段人群的骨组织中的端粒酶逆转录酶(TERT)、雌激素受体(ER)的表达和水平,同时采用ELISA检测血清中的骨钙素(BGP)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)、雌二醇(E2)、睾酮(T)含量。结果:男性与女性组骨组织中TERT、ERα的mRNA表达均随年龄的增长而降低(P<0.05)。各组TERT蛋白表达随着年龄增加逐渐减少(P<0.05)。男性与女性血清中的E2、T、BGP水平均随着年龄增大逐渐降低(P<0.05)。TRACP5b随着年龄增大逐渐升高(P<0.05)。其中女性绝经前后E2、BGP、TRACP5b有显著性变化(P<0.01)。结论:在自然衰老过程中,体内雌激素水平下降的同时,骨组织内TERT转录水平降低,端粒酶活性下降,使骨组织中骨形成功能衰退,骨形成低于骨吸收,从而导致骨质疏松,符合中医"肾主骨"理论。; 林煜张怡元吴银生肖莉莉冯尔宥林燕萍; 关键词：端粒酶逆转录酶增龄肾主骨

健骨颗粒对成骨细胞分化的影响被引量：16: 2012年; 目的:观察健骨颗粒对成骨细胞分化过程的影响。方法:取第3代SD大鼠颅骨成骨细胞,生理盐水血清组加入生理盐水血清;含药血清组加入最佳浓度的健骨颗粒颗粒含药血清;MTT法检测最佳含药血清浓度;运用采用ELISA法检测成骨细胞OCN的表达,采用比色法测羟脯氨酸(HYP)、碱性磷酸酶(AKP),实时荧光定量PCR-SYBR GREEN法检测核心结合因子(Cbfα1)、I型胶原(Col I)、成骨转录因子(OSX)mRNA的表达。取第4代细胞采用茜素红染色法染色矿化结节。结果:MTT法检测显示含药血清最佳浓度为20%;钙化结节观察显示含药20%组最先出现矿化结节,结节数量增多;含药血清组细胞液内OCN、AKP和HYP含量高于生理盐水血清组(P<0.05);Real-time PCR检测结果显示含药血清组Cbfα1、ColⅠ、OSX基因mRNA的相对表达水平明显高于生理盐水血清组(P<0.05)。结论:健骨颗粒含药血清能提高体外培养成骨细胞中矿化结节的数量、AKP、HYP、OCN的含量、ColⅠ、Cbfα1、OSX mRNA的表达,促进成骨细胞增殖,加快细胞分化。; 林煜吴银生卢天祥黄云梅林燕萍; 关键词：成骨细胞细胞分化骨质疏松健骨颗粒

二至丸抑制去势大鼠骨量减少的实验研究: 目的:探讨二至丸抑制去势大鼠骨量减少的作用机制。方法:2月龄清洁级SD大鼠60只,雌性,随机数字表法分为2组,空白组15只与造模组45只。造模组采用摘除双侧卵巢建立绝经后骨质疏松症动物模型,随机数字表法分为3组,模型组1...; 梁文娜李冠慧李西海丁珊珊康洁张凌媛沈建英李灿东; 关键词：绝经后骨质疏松症二至丸骨量生物力学; 文献传递

健骨颗粒含药血清培养成骨细胞整合素/黏着斑激酶信号通路相关因子的表达被引量：9: 2010年; 背景:目前有关成骨细胞整合素的功能状态及整合素信号转导调控的研究较少。健骨颗粒对成骨细胞整合素表达水平及信号转导通路调控的作用未被阐明。目的:观察健骨颗粒含药血清对成骨细胞黏附的影响,揭示健骨颗粒对成骨细胞整合素表达水平及信号转导通路的调控作用。方法:健康雄性3月龄SD大鼠用于制备健骨颗粒含药血清,选取最佳剂量的含药血清干预第3代大鼠成骨细胞,ELISA法检测培养液中纤连蛋白、Ⅰ型胶原、玻连蛋白的水平,Western blot法检测成骨细胞黏着斑激酶的磷酸化情况,实时荧光定量PCR法检测成骨细胞纤连蛋白、Ⅰ型胶原、玻连蛋白、黏着斑激酶mRNA的表达。结果与结论:浓度为20%的健骨颗粒含药血清能明显增强体外培养成骨细胞的增殖活力。随着含药血清干预时间的延长,成骨细胞表达及分泌的纤连蛋白、Ⅰ型胶原、玻连蛋白、黏着斑激酶mRNA及蛋白水平逐渐上升,黏着斑激酶的磷酸化水平也逐渐增高(P<0.05);均明显高于同期的生理盐水血清干预水平(P<0.05或P<0.01)。说明健骨颗粒能作用于成骨细胞整合素激活的粘着斑激酶转导通路各相关因子,使成骨细胞进入"分泌增加→黏附增加→功能增强、分裂增殖→分泌增加"的良性循环,对成骨细胞的成骨效应起正性调节作用。; 林煜卢天祥吴银生黄云梅林燕萍; 关键词：健骨颗粒成骨细胞整合素粘着斑激酶

青娥方对去卵巢大鼠骨组织Src/p130Cas/CRK信号通路的影响被引量：1: 2020年; 目的:研究青娥方对去卵巢大鼠骨组织Src/p130Cas/CRK信号通路的影响。方法:96只3月龄雌性SD大鼠,随机分为假手术组、单纯去卵巢组、骨疏康组(去卵巢+骨疏康颗粒组)、青娥方组(去卵巢+青娥方组)。前两组灌服0.9%氯化钠溶液,后两组分别灌服骨疏康及青娥方。分别于用药4周、8周、12周检测大鼠腰椎Src/p130Cas/CRK mRNA及蛋白含量、右股骨颈骨密度(BMD)、右股骨最大载荷、左股骨颈骨小梁面积百分比(BV/TV)等指标的变化。结果:去势后4周,单纯去卵巢组Src mRNA、CRK mRNA及蛋白表达升高,在8、12周有所下降,而p130Cas mRNA持续升高,8周达到峰值,均显著高于同期假手术组(P<0.01,P<0.05)。股骨颈骨、股骨最大载荷及股骨颈骨小梁面积百分比随着时间推移逐渐降低。青娥方干预4、8、12周后,Src mRNA、p130Cas mRNA、CRK mRNA及蛋白表达持续降低,低于单纯去卵巢组(P<0.01,P<0.05)。股骨颈BMD在用药后4周有所下降,在用药后8、12周BMD显著高于单纯去卵巢组(P<0.01,P<0.05)。而股骨最大载荷持续升高,在8、12周显著高于单纯去卵巢组(P<0.05,P<0.01),但仍低于假手术组。股骨颈骨小梁面积百分比持续下降,下降速度随时间推移明显减缓,在12周显著高于单纯去卵巢组(P<0.01,P<0.05)。结论:青娥方能抑制骨组织Src/p130Cas/CRK的表达,提高骨密度、股骨最大载荷及股骨颈骨小梁面积百分比,降低去卵巢大鼠的骨吸收速度。; 郭世明吴志君何亚标黄云梅黄美雅林燕萍; 关键词：SRC P130CAS CRK 骨密度

两种治法方药治疗骨性关节炎的计算机模拟比较研究被引量：7: 2014年; 目的从分子层面比较补肾法和活血法方药治疗骨性关节炎(osteoarthritis,OA)的作用。方法利用化学空间、分子对接、生物网络等计算机模拟方法,分析补肾法和活血法方药化学成分的物理化学性质及其与靶点作用的网络特征。结果补肾法和活血法方药的化学成分在化学空间中都分布离散,有较大的重叠区域;所建的网络模型中,补肾法和活血法方药的网络作用特征分布也存在部分的相似之处,其网络中每个化合物的平均靶点数分别为1.86和2.11,平均每个靶点分别与4.46和3.93个化合物相关联,反映其多成分—多靶点作用。结论计算机模拟直观地展示了补肾法和活血法方药及其在治疗OA上的异同点,从分子层面上揭示了两种方药配伍使用具有更广谱的靶作用和潜在的协同作用。; 郑春松徐筱杰叶蕻芝李会婷刘献祥; 关键词：补肾法活血法骨性关节炎计算机模拟

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