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湖北大学生命科学学院生物资源绿色转化湖北省协同创新中心: 作品数：20 被引量：67H指数：6; 相关作者：李世宇尹李峰孙海霞王斯奇更多>>; 相关机构：华中农业大学食品科学技术学院武汉科技大学化学工程与技术学院华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程天文地球更多>>

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CO2浓度升高对星豹蛛体内营养物质含量及离体酶比活力的影响: 2015年; 本研究以星豹蛛Pardosaastrigera为对象，利用二氧化碳人工气候箱设置370μL/L（对照组，当前大气的CO2浓度）和75μL／L（实验组，对照C02浓度的2倍）2个CO2浓度。采用试剂盒，测定了不同CO2浓度下所饲养的四龄星豹蛛的总蛋白、总氨基酸和游离脂肪酸含量。同时，比较了不同CO2浓度下四龄星豹蛛的过氧化物酶、淀粉酶和超氧化物歧化酶比活力的差异。结果表明：在高浓度CO2下所饲养的四龄星豹蛛，其体内的总蛋白含量极显著高于对照处理（P=0．0058），其体内的总氨基酸和游离脂肪酸含量在不同CO2浓度处理之间差异不明显（p〉0．05）；CO2浓度升高对四龄星豹蛛的过氧化物酶和超氧化物歧化酶的比活力影响不明显（p〉0．05），但在高CO2浓度下，四龄星豹蛛淀粉酶的比活力显著高于对照处理（P=0．0176）。; 周文慧左琳高进云月利陈建张增焘彭宇; 关键词：CO2浓度升高星豹蛛营养物质

真菌毒素玉米赤霉烯酮生物降解的研究进展被引量：11: 2018年; 玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)及衍生物是一类主要由镰刀菌属的真菌产生的非甾体雌激素类真菌毒素,广泛存在于玉米、大麦、小麦和高粱等谷物饲料及其副产品中,严重危害牲畜及人类健康,迫切需要相关的技术对ZEN进行降解脱毒。传统的物理化学方法不能有效去除谷物中的毒素,并会破坏谷物的营养成分,影响食物口感,甚至造成二次污染,因此利用生物工程技术对ZEN及其衍生物进行脱毒是未来解决这一问题的主要方法。文中简要介绍了ZEN及衍生物和降解ZEN的微生物种类、降解特性,然后详细介绍了目前研究的ZEN降解酶种类、解析唯一的蛋白结构及其异源表达和应用情况,以期为通过分子酶工程和发酵工程等生物工程技术降低ZEN降解酶的成本提供指导,从而提高食品安全。; 李顺意于秋香向腊周玉玲张桂敏; 关键词：真菌毒素玉米赤霉烯酮异源表达食品安全

一种美味猕猴桃”金魁”快速无性繁殖方法被引量：3: 2018年; 研究不同植物激素对美味猕猴桃"金魁"成熟叶的不定芽分化、芽增殖与生根的影响以及组培苗的移栽技术.结果表明,TDZ(噻苯隆)比BA(6-苄基氨基嘌呤)更有利于不定芽的诱导,在含1 mg/L TDZ和0.2 mg/L NAA(萘乙酸)培养基上,不定芽诱导率达到90%以上;通过茎段培养,芽在含0.3 mg/L BA和0.5 mg/L GA3(赤霉素)培养基上30 d可以增殖4.5倍;所增殖的芽(2 3 cm长)在含0.7 mg/L IBA(吲哚丁酸)培养基上35 d内可以100%生根.组培苗在温室里炼苗30 d后移到室外自然环境中,生长健壮,移栽90 d后的成活率达到96%.; 陈永勤詹婧娴胡城陈琪琪王彦昌; 关键词：成熟叶不定芽快速无性繁殖

变形杆菌脂肪酶在大肠杆菌细胞表面的展示表达及重组酶的特性: 2018年; 在生物转化处理工业中利用细胞表面展示技术表达脂肪酶作为一种全细胞催化形式具有很大优势,因为脂肪酶展示在细胞表面作为一种固定化酶.以超折叠绿色荧光蛋白的羧基端结构域作为锚定区,构建变形杆菌来源的脂肪酶与羧基端结构域的融合基因.将融合基因插入到p ETsf GFP表达载体中,得到表面展示载体p ETsf GFP-Lip A.将重组质粒转入大肠杆菌Rosetta-Blue宿主菌中经自诱导后,利用免疫荧光显微技术和流式细胞仪分析确定脂肪酶成功展示于大肠杆菌细胞表面.重组酶的最高酶活达到7 009 U/g干细胞,最适反应温度和p H分别为为37℃和8.0,表面活性剂Tirton X-100、Co^(2+)和Ni^(2+)能显著提高脂肪酶的酶活,60%丙酮处理该酶18 h后脂肪酶残余酶活性为104%,60%乙醇处理该酶18 h后脂肪酶残余酶活性为117%,表明脂肪酶对有机试剂具有很好的耐受性.以上实验结果表明:细胞表面展示技术表达脂肪酶的最大优点为工业化应用提供了坚实的基础.; 田淑芳王雨李春华; 关键词：脂肪酶

低盐高效发酵豆豉新工艺研究被引量：3: 2015年; 为了缩短豆豉的发酵时间,降低豆豉含盐量,避免有毒真菌的污染,对豆豉低盐高效发酵工艺进行了研究。以淋出酱油中氨基酸含量为指标,确定了豆豉醅发酵原料配比为黄豆15 g∶麸皮6 g;豆豉曲制作过程中,米曲霉种曲的接种量为5%-10%,培养时间36 h;豆豉发酵过程中,最佳含盐量为7.5%,最佳温度50℃,发酵时间为7 d。该工艺杂菌污染少、发酵周期短、产品质量高,并且最终的成品营养丰富,氨基酸态氮含量达到0.83 g/100 g。; 谭薇李盘欣杜江源黄亚男马向东; 关键词：高温发酵豆豉低盐

枯草芽孢杆菌SCK6超级感受态的制备和转化条件优化被引量：7: 2017年; 枯草芽孢杆菌是一种革兰氏阳性好氧细菌,因其安全性和高分泌特性,已被广泛用作异源蛋白的表达宿主。然而,相比大肠杆菌,枯草芽孢杆菌的转化效率低,限制了其作为宿主的异源蛋白的定向进化。本文通过改变培养基、诱导剂浓度、质粒类型等参数优化感受态制备的条件,利用常规质粒进行转化,结果表明,用营养丰富的YN培养基替代常规LB培养基制备感受态,可以使转化效率提高4倍左右;加入1.5%的木糖诱导2 h,感受态的转化效率又提高2倍左右;用大肠杆菌Escherichia coli GM272来源的质粒又可进一步提高转化效率3倍左右。综合最优条件制备SCK6的感受态,转化整合型质粒pDG1730,效率可以达到10~6 CFU/μg,相对未优化的条件提高了2个数量级,为基于枯草芽孢杆菌的酶的定向进化和代谢工程奠定了基础。; 李信志卢争辉周玉玲李世宇张桂敏; 关键词：枯草芽孢杆菌木糖感受态

交联木聚糖制备工艺的优化和活性检测研究: 2018年; 交联木聚糖RBB-xylan是木聚糖酶在测定和筛选过程中常用的人工合成的色原底物,利用木聚糖和雷玛唑亮蓝制备RBB-xylan的传统方法得率较低.在传统方法的基础上采用改变单一变量对原有的实验方法逐步改进:将硫酸钠的滴加流速调整为0.8 m L/s,增加1 h陈化时间,将沉淀剂乙醇的用量提高3倍,从而使RBB-xylan得率从原来的50.5%提高到84.8%,效果显著.将RBB-xylan添加到平板可快速筛选出产木聚糖酶的菌株.结果表明,合成的RBB-xylan具有活性,可用于后续木聚糖酶的筛选及活性测定.; 尹李锋周玉玲张桂敏; 关键词：木聚糖酶单因素

嗜碱芽孢杆菌耐热耐碱内切木聚糖酶基因的密码子优化及在毕赤酵母中的表达被引量：3: 2017年; 【目的】研究极端耐热耐碱的木聚糖酶,使其能够满足造纸行业中碱性高温的苛刻环境。【方法】将一种来源于嗜碱芽孢杆菌S7的耐热耐碱内切木聚糖酶基因(xyn10A)密码子进行优化,基因合成后克隆至pHBM905BDM载体上,并转化毕赤酵母GS115菌株。【结果】木聚糖酶基因(xyn10A)优化后与原始序列比对相似性为76.70%。基因合成后克隆到pHBM905BDM载体上,并成功转化毕赤酵母GS115菌株。通过交联木聚糖底物平板水解圈法初筛及摇瓶复筛得到一株产酶量较高的菌株,且其在摇瓶发酵第10天达到最高酶活力,为495U/mL。另外,糖基化分析表明该酶在毕赤酵母中表达时被糖基化修饰。【结论】密码子优化后的极端耐热耐碱木聚糖酶基因在毕赤酵母中成功表达。; 严闯尹李峰周玉玲张桂敏; 关键词：毕赤酵母

AChE在水稻抗性诱导的褐飞虱凋亡中肠细胞中的定位及表达被引量：1: 2016年; 【目的】褐飞虱Nilaparvata lugens是水稻的重要害虫之一。本研究旨在了解水稻品种抗性诱导的褐飞虱中肠细胞凋亡与细胞中乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,ACh E)的关系。【方法】从4龄Ⅰ型褐飞虱若虫中肠组织分离原代细胞,用不同抗性的水稻幼苗汁液处理第一代继代细胞,利用TUNEL染色法检测细胞的凋亡情况,再分别利用免疫组织化学和荧光定量PCR技术对ACh E进行亚细胞定位和检测其表达水平的变化。【结果】在对照组(未处理)细胞中,检测不到代表凋亡细胞核的绿色荧光,而免疫组化后阳性反应颜色很浅,表明细胞中存在ACh E的本底水平表达。感虫水稻品种TN1幼苗汁液处理细胞中,细胞的凋亡率为8%,抗性水稻B5幼苗汁液处理的细胞中有65%的细胞发生凋亡;而抗性水稻TKM-6幼苗汁液处理的细胞中则有85%的细胞发生凋亡。免疫组化的检测结果表明,所有凋亡的细胞中都存在ACh E的积累,且主要分布在细胞质中;ACh E在凋亡后期并不迁入凋亡小体中,而是集中在细胞核附近。荧光定量PCR检测表明,TKM-6,B5和TN1幼苗汁液处理的细胞中ACh E的表达量分别为对照细胞的29.9,18.4和8倍,该结果与细胞水平上免疫组化的检测结果一致。【结论】本研究结果证实了水稻品种抗性与其诱导的中肠细胞凋亡率呈正相关,且凋亡细胞的细胞质中存在ACh E的积累。这些发现为揭示ACh E在褐飞虱与水稻的互作中的功能、促进抗性水稻新品种的选育及开发新的褐飞虱防治措施提供了一定的参考信息。; 王斯奇陈俊章娟娟杨之帆; 关键词：褐飞虱乙酰胆碱酯酶荧光定量PCR

非脱羧勒克菌wt16对黄曲霉菌生长与产毒的抑制作用被引量：1: 2018年; 黄曲霉菌及其毒素严重威胁农产品质量安全,本文旨在探寻非脱羧勒克菌对黄曲霉菌及其毒素污染防控效果。从湖北黄陂分离筛选出一株非脱梭勒克菌wt16,将其与黄曲霉菌在液体培养基中共培养后测定非脱羧勒克菌wt16菌株对黄曲霉菌生长及产毒的抑制率。结果表明,在沙氏液体培养基中,非脱羧勒克菌wt16能明显抑制黄曲霉菌的生长及产毒,对其菌丝生长的抑制率为77%~92%,对其产毒的抑制率为90%~96%。通过扫描电子显微镜观察发现,非脱羧勒克菌wt16能改变黄曲霉菌丝的形态,使得黄曲霉菌丝体由规则的球体聚集成不规则形状,单个菌丝会由细长型断裂成小截形态,菌丝表面也变得更为光滑;并且发现wt16在花生粉及未受机械损伤的花生颗粒上对黄曲霉菌的生长及产毒均表现出很强的抑制作用。进一步研究发现,非脱羧勒克菌wt16菌株发酵上清液中含有能抑制黄曲霉毒素合成的有效成分,且该发酵上清液的制备以培养4 d以上为最佳,培养温度为15~40℃。; 王同谢华里王婷马向东李培武张奇; 关键词：黄曲霉菌黄曲霉毒素

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