河北大学化学与环境科学学院药物化学与分子诊断省部共建教育部重点实验室 作品数:8 被引量:5 H指数:1 相关作者: 焦肖霞 贾海莲 赵晶晶 唐志远 张程 更多>> 相关机构: 陕西师范大学化学化工学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河北省自然科学基金 河北省青年科技基金 更多>> 相关领域: 理学 生物学 医药卫生 一般工业技术 更多>>
淀粉样蛋白纤维微观结构的红外光谱分析 淀粉样蛋白纤维是一种具有独特微观结构的蛋白聚集体。就微观形貌而言,淀粉样蛋白纤维是宽度为纳米级而长度可达微米级的蛋白纳米线;就空间构型而言,淀粉样蛋白纤维是由至少两个β-折叠片层以非共价键形式结合而形成的具有cross-... 马刚 高亚超 邹烨 李昊一关键词:淀粉样蛋白 红外光谱 文献传递 自组装多效价簇糖分子的构筑、识别及降血糖功能研究 糖-蛋白间选择性识别作用在细胞的生长、分裂、免疫调节和癌细胞转移等方面起着重要作用 王克让 李小六文献传递 基于无标记荧光共振能量转移的microRNA检测方法研究 被引量:1 2020年 利用以阳离子共轭聚合物为能量供体的荧光共振能量转移(FRET)策略和滚环扩增放大技术,建立了一种新型的microRNA(miRNA)检测方法。阳离子共轭聚合物采用聚[(9,9-双(6’-N,N,N-三乙基铵)己基)亚芴基亚苯基二溴化物](PFP)。PFP是一种由大量吸光单元共轭而成的阳离子聚合物,具有独特的光捕获和荧光增强性能,可以和带有负电荷的DNA通过静电作用相互结合。SG是一种能够结合于所有双链DNA双螺旋小沟区域的染料,其在游离状态下,荧光微弱,但一旦与双链DNA结合后,荧光会大大的增强。首先,设计了一条可与目标分子特异性杂交的锁式探针和与RCA产物序列互补的DNA链。当体系中存在miRNA时,在T4 DNA连接酶作用下,锁式探针连接成环;随后,在phi29 DNA聚合酶和dNTPs共同作用下,在miRNA的3’端滚环扩增出一条与锁式探针序列互补的长单链DNA,所得产物与互补DNA链杂交形成双链DNA(dsDNA)。此时SG作为FRET受体掺入其中,形成SG-dsDNA共同体。随后, SG-dsDNA与PFP因静电相互作用而紧密接近,由于PFP的发射光谱与SG的激发光谱有重叠,因此二者之间可以发生FRET现象。反之,当体系中不存在miRNA时,挂锁探针则无法连接成环,阻止了扩增反应的进行及其产物与互补DNA链的杂交反应。加入SG后,由于SG与单链DNA的结合能力很弱, SG则游离于溶液中,不会与PFP发生有效的FRET。因此目标分子的浓度与体系的FRET效率直接相关。以let 7a作为待测miRNA分子,在0.05~5 nmol·L-1的范围内, let 7a的浓度与从反应体系测得的FRET效率(I520/I423)成正比。同时以无PFP参加的检测方案作为对比实验,证明了PFP确实具有提高灵敏度的作用。另外,以四种同族miRNA分子及两种其他miRNA分子作为干扰物质对方法的特异性进行了考察,发现除了两种与目标分子序列高度相似的物质存在干扰外,其他物质几乎不产生信号。利用该方法对细胞总RN 张文月 郝文会 赵静 王愈聪关键词:无标记 MICRORNA 荧光共振能量转移 支化滚环扩增均相光散射检测单核苷酸多态性 2011年 结合简便、高效的支化滚环扩增反应与光散射技术,建立了一种均相、无标记检测单核苷酸多态性的方法。通过设计与突变型DNA完全匹配的锁式探针,突变型DNA可作为模板,使锁式探针在连接酶作用下于45℃连接成环,由Phi29 DNA聚合酶在33℃引发支化滚环扩增反应,生成大量的长链DNA产物。反应产物在0.2 mol/L HClO4介质中变性、聚集,产生强烈的光散射信号。野生型DNA与锁式探针的3%末端有一个碱基错配,不能使锁式探针连接成环和引发支化滚环扩增,仅产生很弱的光散射信号。依据二者产生的光散射信号差异,可特异性区分单碱基差别。方法灵敏度高、成本低,可准确测定1 pmol/L突变型DNA和定量检测基因突变频率。所有的成环反应、支化滚环扩增反应及光散射测定可逐步完成,无需分离、洗涤步骤,操作方便、减小了污染的风险。 张程 焦肖霞 成永强 李正平关键词:单核苷酸多态性 光散射 淀粉样纳米组装体结构的红外光谱探针研究 探讨了如何应用红外光谱探针技术研究淀粉样纳米组装体的微观结构和模型构建。我们首先讨论了如何通过对探针光谱区和酰胺Ⅰ带光谱区的联合分析获得淀粉样纳米组装体在四级结构和二级结构上的微观结构细节。之后我们探讨了如何利用这些重要... 马刚 贾宝环 王瑶关键词:红外光谱 自组装 滚环扩增阳离子共轭聚合物均相检测microRNA 被引量:1 2013年 结合恒温滚环扩增(rolling circle amlification,RCA)、单链特异性核酸外切酶Ⅰ(exonucleaseⅠ,ExoⅠ)和阳离子共轭聚合物(Cationic conjugated polymer,CCP)荧光共振能量转移(fluorescence reso-nance energy transfer,FRET)技术,建立了一种特异、灵敏的均相检测microRNA(miRNA)的新方法.该方法应用荧光标记探针与RCA扩增的长链DNA产物杂交,当加入CCP时,其与杂交的标记探针通过静电力结合,发生高效的FRET.未杂交的标记探针利用ExoⅠ水解成单核苷酸,其与CCP相互作用力弱,不能发生有效的FRET.基于此,无需分离和洗涤步骤,实现了RCA扩增miRNA的均相检测.方法特异性好,灵敏度高,线性为0.5~20pmol/L,检出限为0.2pmol/L.方法为miRNA均相检测和原位成像分析以及临床诊断提供了新策略. 成永强 贾海莲 唐志远 赵晶晶 李正平关键词:分析化学 MICRORNA 滚环扩增 反应型荧光探针在肼检测中的应用 被引量:3 2018年 肼在医药、农药、染料及化工等领域起着重要作用,然而肼具有致癌、神经毒、内脏损伤等毒性。近年来,对肼的高灵敏性、高选择性识别与传感已成为研究的焦点。在众多肼识别体系中,基于探针分子与肼之间特殊化学反应的反应型荧光探针分子,利用化学反应的专一性,可实现对肼的高选择性识别。化学家们已经开发出多个基于不同反应机理的反应型肼荧光探针,均表现出优良的性能。综述了基于不同化学反应的肼荧光探针分子的研究进展,介绍了包括4-溴丁酸酯、邻苯酰亚胺、乙酸酯、活性烯、醛、2-氟-5-硝基苯甲酸酯、4-硝基苯甲酸酯、肉桂酸酯、4,4,4-三氟-1,3-丁二酮、4-硝基苯磺酸酯等识别位点在内的研究现状,同时展望了该领域的发展趋势。 刘维岩 杨瑜涛 李雪 周婷婷 胥稳智 李玮关键词:荧光探针