何奎芳
- 作品数：35 被引量：59H指数：5
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省自然科学基金中国科学院西部之光基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学轻工技术与工程机械工程更多>>
- 变形链球菌表面蛋白遗传多态性与黏附作用关系的初步研究被引量：1
- 2004年
- 庄姮刘天佳刘建国杨德琴何奎芳李颂
- 关键词：变形链球菌表面蛋白遗传多态性限制性片段长度多态性分析
- 变形链球菌自溶素真核载体质粒pcDNA3.1(+)-tPA/AtlA/IRES/eGFP的构建
- 目的：构建变链菌自溶素真核表达质粒pcDNA3.1 (+)-tPA/At lA/IRES/eGFP,为进一步研究变链菌自溶素(AtlA)的功能奠定基础.方法：(1)通过对变链菌UA159生物信息学分析,确定自溶素AtlA...
- 何奎芳潘乙怀邓辉武艳飞
- 关键词：变形链球菌
- 大鼠牙髓组织中甲硫氨酸脑啡肽合成位点及其调控的实验研究
- 目的:检测大鼠牙髓组织甲硫氨酸脑啡肽（MEK）的细胞内生物合成位点及其凋控。方法:（1）将健康雄性大鼠随机分成 4组,第1组为对照组,第2组为牙髓炎组,第3组为FOY-305注射组,第4组为牙髓炎加FOY-305注射组,...
- 潘乙怀刘传通何奎芳
- 关键词：牙髓脑啡肽甲硫氨酸
- 变形链球菌表面蛋白可变区真核载体质粒pEGFP—N1-SrV＋的构建及在293T细胞的表达被引量：2
- 2011年
- 目的构建变形链球菌（变链菌）表面蛋白可变区（extended-v）真核表达质粒pEGFP—N1-SrV＋，并转架哺乳动物细胞293T，为进一步研究该区功能奠定基础。方法根据已报道变链菌OMZl75的srv＋基因序列，化学合成SrV＋的编码基因srv＋，将真核载体质粒pEGFP—N1和srv＋基因片段分别用KpnⅠ／XhoⅠ双酶切，连接获取重组质粒pEGFP-N1-Srv＋，并对其进行PCR、酶切和测序鉴定。通过H旨质体法瞬时转染哺乳动物细胞293T。运用荧光显微镜观察、Westernblot及real-timePCR法橙。目的蛋白在293T细胞中的表达情况。结果通过基因化学合成技术，获得1136bp的目的基因srv＋，经测序鉴定与模板目的基因序列一致；成功构建真核表达质粒pEGFP-N1-SrV＋；PCR扩增检测可获得1．33kb目的基因片段；KpnI／XhoI双酶切可见4．7kb和1．1kb两条电泳条带，证实重组质粒pEGFP-N1-SrV＋携带目的基因；通过荧光显微镜观察到重组质粒pEGFP．N1-SrV＋融合GFP后的表达，目的细胞的转染效率达到80％以上；Westernblot检测到相对分子质量（Mr）为72×10^3处有特征条带，其大小和Srv＋融合蛋白（42×10^3＋28×10^3=70×10^3）相吻合；real-timePCR数值分析显示：在293T细胞中，s邢＋基因的过表达效果显著。结论成功构建了真核表达载体质粒pEGFP-N1-SrV＋，并能够在哺乳动物细胞293T中表达。
- 何奎芳于晓光潘乙怀刘建国亓庆国
- 关键词：变形链球菌293T细胞
- 不同血清型变形链球菌表面蛋白可变区(extended-V)的同源性分析被引量：3
- 2006年
- 目的分析不同血清型变形链球菌表面蛋白可变区(extended-V)的基因及蛋白质的同源性,探讨该区在防龋疫苗研制中的作用。方法以变形链球菌血清型c、d、f、g参考株及部分c型临床株为模板,PCR扩增SrV+区片段,通过内切酶DdeⅠ进行限制性片段长度多态性分析并测序,将其测序结果在NCBI服务器上用blastn搜索软件进行同源性比较。结果在相同条件下血清c、f型菌株均扩增出约1.13kb左右的片段,酶切后出现5种基因型(A、B、C、D、E)。选取所占比例较多的A、B、C型代表株进行测序,经比较显示其基因型间的同源性达92%—98%。血清d、g型无扩增产物,将g型6715表面蛋白SpaA全片段基因同OMZ175的产物序列在blastn上进行比较,有3个大小不一的片段出现同源性;血清d型OMZ176的表面蛋白基因序列在GeneBank上未能查出,故无法比较,但其相应蛋白质的同源性也在77%—82%之间,显示出相当高的同源性。结论就c、f型菌株来说,可以将该区纳入疫苗的研究范畴;d、g型虽未能扩增出相应产物,但其基因还是存在部分区域的相似性,且其蛋白质同源性很高,也可以考虑利用d、g型上同c、f型共有的某些肽段进行疫苗的研制。
- 何奎芳刘建国刘天佳杨德琴庄姮李颂
- 关键词：变形链球菌血清型同源性分析
- 手用protaper镍钛锉临床折断分析
- 何奎芳
- 变形链球菌表面蛋白可变区与葡聚糖合成的关系被引量：7
- 2006年
- 目的：探讨变形链球菌表面蛋白可变区与葡聚糖合成的关系。方法：取本课题组前期工作所获得的变链c型临床株，分成水溶性葡聚糖（WSG）组和水不溶性葡聚糖（WIG）组；每组又按葡聚糖合成能力分为合成量高（ABS〉0．5）与合成量低（ABS〈0．15）组。以所选细菌DNA为模板，PCR扩增表面蛋白V区编码基因SrV＋，经DdeI酶切分型，比较各基因型在两组细菌中的分布情况。结果：1）两组均有4种基因型（A、B、C、D）并且在构成比上都以A、B型占多数，C、D型所占比例较少且存在明显差异；2）在WSG组主要基因型的分布出现差异：合成量高的以A型为主占50％，B型占33．33％，C型占11．11％；合成量低的以B型为主占50％，A型占30．77％，C型19．15％。5）在WIG组A、B型的分配基本相似，均在40～48％之间。结论：变形链球菌表面蛋白可变区的基因型分布与水溶性葡聚糖的合成存在一定的相关性而与水不溶性葡聚糖的合成未见明显关联。
- 何奎芳刘建国刘天佳杨德琴庄姮李颂
- 关键词：变形链球菌葡聚糖基因型
- 新型镍钛器械用于重度弯曲根管再治疗的体外研究
- 目的：评价机用镍钛器械(ProTaper retreatment system,PRS)用于重度弯曲根管再治疗的效果.方法：36颗离体下颌单根管前磨牙,牙根弯曲度25°～35°,截冠后余留牙根长度15...
- 赵瑜潘乙怀何奎芳
- 关键词：根管再治疗
- 表没食子儿茶素没食子酸酯对人牙周韧带细胞增殖作用的研究
- 目的：探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对人牙周韧带细胞(human periodontal ligament cells,hPDLC)体外培养中是否存在增殖作用....
- 唐琳何奎芳曹金芳王惠宁
- 关键词：没食子儿茶素没食子酸酯牙周韧带细胞细胞增殖
- 变形链球菌表面蛋白V区、P区及C末端遗传多态性与龋病发生关系的研究被引量：6
- 2005年
- 目的 了解变形链球菌表面蛋白 V区、P区及 C末端遗传多态性与其粘附性能的关系。方法 实验菌株选自本实验室前期工作所获得的粘附力较强和较弱的血清 c型变形链球菌临床分离株 ,提取全菌 DNA ,经PCR分别扩增表面蛋白 V区、P区编码基因 spa P- pv(2 0 6 0～ 315 7bp)、C末端编码基因 spa P- c(4 0 0 3～ 4 85 1bp)后 ,用限制性内切酶 Alu 进行限制性片段长度多态性分析。结果 两组不同粘附力的变形链球菌 (血清 c型 )临床分离株全菌 DNA扩增产物 spa P- pv经 Alu 酶切后 ,出现了两种基因型 a、b。两种基因型在不同粘附力菌株的分布不同 (P<0 .0 5 ) ,a型在低粘附力菌株中的比例高于高粘附力菌株 ,而 b型在高粘附力菌株中的比例高于低粘附力菌株。 spa P- c经 Alu 酶切后 ,共呈现两种基因型 c、d。 d型在高、低粘附力的菌株中各占 1例 ,其分布无统计学差异。结论 spa P-
- 庄姮刘天佳刘建国杨德琴何奎芳李颂
- 关键词：变形链球菌基因型粘附力
