刘丹 作品数:37 被引量:158 H指数:8 供职机构: 四川农业大学农学院 更多>> 发文基金: 四川省科技支撑计划 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
猪致病性大肠杆菌的分离鉴定与耐药性分析 2014年 为有效监测四川巴中某猪场病死仔猪大肠杆菌的耐药性和致病性,对从该猪场病死仔猪的内脏和组织中分离得到的13株大肠杆菌进行了药物敏感性检测和动物致病性试验。结果表明,菌株对12种药物均存在不同程度的耐药,其中,对强力霉素、氟苯尼考和红霉素等7种药物的耐药率均达100%;对阿米卡星的敏感性最高,为69%。动物致病性结果显示,3号小鼠注射对应菌液16 h内死亡,剖检可见多个脏器组织均有出血;仔猪注射死亡小鼠分离纯化液后都没有死亡,但不同猪只出现不同的临床病理变化。该猪场大肠杆菌耐药性较为严峻,建议制定合理的用药方案实行交替用药,避免长期使用同一种药物。 文彩芳 郗立新 罗露 张曼丽 刘丹 郝中香 颜其贵关键词:大肠杆菌 耐药性 核盘菌致病性测定方法研究 被引量:4 2011年 [目的]探讨核盘菌致病性测定的方法。[方法]研究了菌丝圆片活体叶片接种法、菌丝圆片离体叶片接种法、菌丝圆片活体茎杆接种法和带菌牙签活体茎杆接种法4种方法(9种处理)对核盘菌致病性测定结果的影响。[结果]各方法(处理)都能根据病斑大小区分出菌株间致病性的差异,但用菌丝圆片在离体叶片上不穿刺接种是最为简便易行、快速可靠的测定方法。[结论]为菌核病的防治及抗病品种的选育提供了理论依据。 刘丹 李沛利 严吉明 秦芸 叶华智关键词:菌核病 核盘菌 似鲇高原鳅败血症病原菌的分离鉴定与病理学观察 被引量:2 2014年 为确定一起似鲇高原鳅败血症疫情的病原,本实验通过无菌操作从病鱼体内分离到一株优势菌(GYQ),以腹腔注射与浸泡的方式进行人工感染试验,证明其为似鲇高原鳅败血症的病原菌。根据分离菌的形态、生理生化特性,结合16S r DNA和gyr B基因序列测定(KF952599和KJ001821)与系统发育分析,将其鉴定为鮰爱德华氏菌(E.ictaluri)。病鱼组织器官具有典型的败血症病理变化,以全身多组织器官充出血、细胞变性、坏死以及炎性细胞侵润为主要特征,尤其是肝、肾、脾、肠和脑较为严重。药敏结果显示该菌对氟苯尼考、强力霉素等6种药物表现为敏感;对庆大霉素等4种药物表现为不敏感。 周燕 耿毅 汪开毓 阳磊 刘丹 徐敬钧 陈德芳 黄小丽关键词:败血症 病理损伤 西伯利亚鲟海豚链球菌的分离鉴定及毒力基因检测 被引量:20 2015年 2013年8—9月,四川雅安汉源湖养殖的西伯利亚鲟发生一种以体表溃疡、内脏出血和心外膜囊肿为特征的传染病。为明确其病因,本研究从自然发病鱼的肝、脾和肾进行了病原菌的分离、人工感染、分离菌的表型特征和分子生物学特征的检测。结果从患病鱼体内分离到一株G+链状球菌(Ab130920),人工感染实验证实了其病原性,生理生化特性与海豚链球菌(ATCC29178)基本一致;16S r DNA序列(Gen Bank登录号:KJ162337)与Gen Bank中S.iniae16S r DNA序列同源性最高,在以16S r DNA序列及其Gen Bank中同源性较高的相关序列构建的系统发育树上,分离菌与海豚链球菌聚为一支;同时,在基于S.iniae lct O基因的特异性PCR检测中,从分离株基因组DNA扩增出预期大小的870 bp条带,进而鉴定分离菌Ab130920为S.iniae。在对cps D、sim A、sag A、pdi和scp I等5种S.iniae毒力基因的多重PCR检测中,分离菌均扩增出相应大小的特异性片段,表明其为一毒力较强的菌株,与人工感染实验的高致病性结果相佐证;药物敏感性检测发现其对阿莫西林、强力霉素、氟苯尼考等抗菌药物敏感,但对新生霉素、利福平、氧氟沙星耐药。 邓梦玲 耿毅 刘丹 周燕 汪开毓 黄小丽 陈德芳 余泽辉 陈成关键词:海豚链球菌 RDNA 毒力基因 四川省成都市狭叶十大功劳炭疽病病原菌的鉴定与生物学特性研究 被引量:6 2018年 为弄清狭叶十大功劳炭疽病的病原菌,从四川省成都市采集疑似为炭疽病的病叶,采用组织分离法分离病原菌,单孢纯化后通过柯赫氏法则验证为致病菌;根据形态学特征,结合多基因系统学,将病原菌鉴定为果生炭疽菌Colletotrichum fructicola。该菌对温度的适应范围较广,10~35℃之间均能生长和产孢,最适生长和产孢温度均为30℃;光照对菌丝生长和产孢影响不显著;在pH 3~11之间均能生长和产孢,菌丝生长最适pH为7,产孢最适pH为4;葡萄糖、甘露醇、乳糖和麦芽糖是菌丝生长的最适碳源,麦芽糖为产孢的最适碳源;蛋白胨是生长和产孢的最适氮源。 李沛利 刘丹 陈诗瑶 龚国淑关键词:炭疽病 病原鉴定 生物学特性 大鳄龟蛙病毒感染的PCR检测及组织病理分析 2013 年3 月成都某海洋馆送检2 只发病大鳄龟(Macrochelys temminckii),临床特征表现为:精神状态萎靡,爬行无力,对外界刺激反应迟钝;颈部和四肢局部红肿,腹甲溃烂,严重部位甚至穿孔,最后死亡。为... 余泽辉 耿毅 周燕 邓梦玲 刘丹 陈成 徐敬钧 范玉蕾关键词:大鳄龟 PCR 大鳄龟蛙病毒感染的PCR检测及组织病理分析 2013年3月成都某海洋馆送检2只发病大鳄龟(Macrochelys temminckii),临床特征表现为:精神状态萎靡,爬行无力,对外界刺激反应迟钝;颈部和四肢局部红肿,腹甲溃烂,严重部位甚至穿孔,最后死亡。为明确大... 余泽辉 耿毅 周燕 邓梦玲 刘丹 陈成 徐敬钧 范玉蕾关键词:大鳄龟 PCR 文献传递 猪常见呼吸道疾病的鉴别诊断及防治 2012年 近年来,猪呼吸道疾病的发生及流行日益复杂和严重,给规模化猪场带来严重的经济损失。根据目前临床疾病发生的形势估计,呼吸道疾病仍将是危害猪健康的主要疾病,严重影响养猪业的良好发展。 徐博文 代军 张阳 杨启帆 刘丹 舒蕾关键词:呼吸道疾病 规模化猪场 经济损失 疾病发生 养猪业 大鲵蛙病毒LAMP检测方法的建立 被引量:5 2015年 根据大鲵蛙病毒(Chinese giant salamander ranavirus,CGSRV)主要核衣壳蛋白MCP编码基因的序列设计合成4条特异性引物,以重组pMD19-T-MCP质粒为模板,通过反应条件与反应体系优化,建立CGSRV的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,测定LAMP对CGSRV的最低检测限,并与巢式PCR和普通PCR进行比较。结果表明,该LAMP方法最佳反应温度为62℃,反应时间为40min,对CGSRV最低检测限5copies/μL,而巢氏PCR和常规PCR的检测限为50和5×103copies/μL,表明该LAMP方法的灵敏度显著高于巢氏PCR和常规PCR;且与淋巴囊肿病毒、鲫鱼出血病疱疹病毒2型、云斑尖塘鳢虹彩病毒、鳜鱼传染性脾肾坏死病毒、迟钝爱德华菌、嗜水气单胞菌和维氏气单胞菌等均无交叉反应;反应结束后加入荧光染料EtBr可肉眼判定粉色为阳性,而棕色则为阴性。因此,该方法对CGSRV的检测较巢氏PCR和常规PCR更为简便、快速、灵敏、特异,且不需昂贵仪器设备,更适合养殖现场检测,为CGSRV早期感染的快速检测提供了新方法。 刘星星 耿毅 汪开毓 周燕 陈德芳 黄小丽 刘丹 陈成关键词:环介导等温扩增 猪源粪肠球菌的分离鉴定 被引量:2 2012年 对来自四川地区送检病猪采样分离到2株致病性革兰氏阳性球菌进行分离纯化,根据培养形态、理化特性和16SrRNA序列同源性分析,综合判定所分离菌株为粪肠球菌,采用纸片扩散法进行药物敏感性实验,结果显示分离的致病菌均对供试的头孢唑啉钠、利福平药物高度敏感,对氨苄西林、红霉素、氧氟沙星等药物不同程度耐药,根据结果制定相应防治措施,经处理后,病情得到控制。 舒蕾 刘杰 刘丹 马磊 张琦 颜其贵关键词:粪肠球菌 药敏试验