刘志浩
- 作品数：6 被引量：20H指数：2
- 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学水利工程更多>>
- 转基因玉米中膦丝菌素乙酰转移酶双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：8
- 2013年
- 【目的】以单克隆抗体（monoclonal antibody,mAbs）为基础，建立检测膦丝菌素乙酰转移酶（the phosphinothricin acetyltransferase,PAT）的双抗体夹心ELISA方法,为转基因玉米PAT蛋白的检测提供参考。【方法】由P3301质粒扩增出膦丝菌素乙酰转移酶基因（blalaphos resistance gene）bar，并与表达载体pET28a构建重组质粒，诱导表达产生外源性PAT蛋白；以纯化后的PAT蛋白为免疫原，制备mAbs，建立双抗体夹心ELISA方法，并与PCR检测方法进行比较，确定该方法的准确性和可靠性。【结果】应用mAbs 4D5和3E8成功建立了检测PAT蛋白的双抗体夹心ELISA方法，其有效检测范围为3.125～50 ng/mL。采用该夹心ELISA方法对36份已知转基因背景的玉米样品进行了检测，根据阴阳性判定值OD450〉0.210，检测出含PAT蛋白的Bt176阳性样品4份，以bar基因为检测目标利用传统PCR方法也检测出相同的Bt176样品4份，2种检测方法的符合率为100%。【结论】利用建立的双抗体夹心ELISA免疫学检测方法，可以对转基因玉米中的PAT蛋白进行准确、特异、有效的检测。
- 刘志浩高丽丽王新桐孙佳芝杨正友柴同杰
- 关键词：双抗体夹心ELISA
- 转基因玉米中膦丝菌素乙酰转移酶(PAT)双抗体夹心ELISA检测方法的建立
- 转基因技术的广泛应用和转基因植物的商业化种植在带来巨大经济效益和社会效益的同时，转基因生物及食品的安全性和环境风险问题也日益受到人们的关注。为了对转基因作物及其产品进行有效跟踪、监控、风险评估和标识，保证相关转基因作物及...
- 刘志浩
- 关键词：双抗体夹心ELISA检测转基因玉米
- 文献传递
- 动物福利的研究现状
- 作为一种生命形式，同人类一样有着基本生存需要和高层次的心理需要，它们需要基本的饮食、饮水，需要适宜的活动空间和生活环境，需要安全感，需要表达自己的天性。动物福利的实质是善待活着的动物，为其提供舒适的饲养环境，给予其完善的...
- 刘敬博柴同杰张明亮刘志浩董洪亮
- 关键词：动物福利生活环境饲养管理
- 产气荚膜梭菌α毒素双抗体夹心ELISA检测方法的建立及初步应用被引量：11
- 2014年
- 为了对产气荚膜梭菌α毒素进行快速、有效的检测,本研究以单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)为基础,建立了双抗体夹心ELISA(double antibody sandwich ELISA,DAS-ELISA)方法。纯化原核表达的α毒素蛋白为免疫原,制备腹水型mAb并分离纯化作为检测抗体,免疫新西兰大白兔制备抗α毒素多克隆抗体纯化后作为捕获抗体,通过试验优化反应条件,建立标准曲线;并对建立的DAS-ELISA方法进行性能评价及初步应用。DAS-ELISA方法对α毒素的有效检测范围为5.86~375μg/L,最低检测线为4.57μg/L,比多抗-多抗双夹心ELISA具有更高的特异性和敏感性。初步应用结果显示,相同培养条件下,A^E型产气荚膜梭菌标准菌株的培养上清中,α毒素含量差异较大,A型菌(NCTC528)中α毒素含量显著高于其他菌型。本研究成功制备了高特异性的mAb,并建立了特异、灵敏、稳定的DAS-ELISA方法,为高效检测α毒素提供了有效工具。
- 孙佳芝王新桐刘雪慧苗增民刘志浩王海荣柴同杰
- 关键词：产气荚膜梭菌Α毒素多克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 山东省竞技体育市场组织与管理的SCP分析
- 随着当前社会经济的发展，竞技体育日益成为全世界人民的共同议题。我国不属于传统意义上的竞技体育强国，在很多方面都落后于欧美等国家，尤其是在竞技体育产业组织与管理方面，既不利于竞技体育产业的长期稳定健康发展，也制约了我国体育...
- 刘志浩
- 关键词：竞技体育产业市场管理SCP分析
- 水泥砂浆试件及风化片麻岩的力学性能关系研究
- 以煤渣水泥砂浆、铁丝水泥砂浆和玻璃纤维水泥砂浆等水泥砂浆试件及风化片麻岩为实验研究对象，研究水泥砂浆试件及风化片麻岩的力学性能关系，得到煤渣水泥砂浆、铁丝水泥砂浆和玻璃纤维水泥砂浆等水泥砂浆试件的最优配合比、铁丝水泥砂浆...
- 刘志浩
- 关键词：力学性能工程应用
- 文献传递
