崔丽瑾
- 作品数：15 被引量：42H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅科技发展计划项目吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 口蹄疫病毒2B基因绿色荧光蛋白融合表达质粒的构建及表达被引量：2
- 2008年
- 目的构建口蹄疫病毒(FMDV)2B基因绿色荧光蛋白(GFP)融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达。方法RT-PCR扩增O型口蹄疫病毒WFL株的2B基因,克隆入表达载体pEGFP-C1,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,检测绿色荧光蛋白的表达和2B基因转录水平。结果经双酶切及PCR鉴定,目的基因片段大小与预期相符,测序结果与WFL株相应序列一致。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内绿色荧光蛋白的表达,荧光定量PCR检测到细胞内有2B基因的转录。结论已成功构建了FMDV2B基因GFP融合表达质粒,并在BHK-21细胞中获得了表达。
- 崔丽瑾王兴龙梅英武任林柱闫广谋张辉郎需龙段小宇路浩
- 关键词：口蹄疫病毒绿色荧光蛋白
- 应用RNA干扰技术抑制口蹄疫病毒复制与感染的研究
- 崔丽瑾
- 关键词：口蹄疫病毒RNAISHRNA
- 文献传递
- 靶向口蹄疫病毒IRES区RNA干扰位点的选择及shRNA表达载体的构建与鉴定被引量：1
- 2010年
- 以口蹄疫病毒WFL株为试验株,对口蹄疫病毒的IRES序列进行了保守性分析和RNA二级结构预测,推测高度保守的FMDV复制原点区域位于容易被siRNA结合的IRESRNA二级结构的环区,因此,在该区选择确定了2个siRNA干扰靶位,设计并合成能表达其小发夹结构shRNA的表达模板,克隆到含有U6启动子的真核表达载体中,建立了靶向口蹄疫病毒IRES区的siRNA真核表达系统,为进一步研究针对该区的RNA干扰对口蹄疫病毒的抑制作用打下了基础。
- 崔丽瑾王兴龙任林柱李晓艳郎需龙张付贤王英超
- 关键词：口蹄疫病毒SIRNA
- 新城疫病毒TL1株M基因的克隆和序列分析被引量：1
- 2007年
- 采用RT-PCR方法扩增了新城疫病毒（NDV）TL1株M基因，将扩增产物提纯后克隆入pGEM-Teasy载体，通过酶切、PCR和测序验证克隆正确。测序拼接得出M基因的序列长度为1232bp，该基因的ORF总长为1095bp，编码364个氨基酸。与GenBank下载的15株参考毒株M基因比较，核苷酸同源性为85．2％～98．1％，编码的氨基酸同源性为85．8％～98．9％。NDVTL1产生M蛋白分子中有7对碱性氨基酸，5个保守的Cys残基，与鹅源新城疫SF02株、ZJ1株具有类似的特征。这些结果为揭示NDVTL1株的分子生物学背景，阐明NDV种间传播机制奠定了基础。
- 王学理王兴龙李晓艳刘锴任林柱崔丽瑾闫广谋段小宇
- 关键词：新城疫病毒M基因
- 口蹄疫病毒WFL株ORF基因真核表达质粒的构建及病毒的拯救被引量：1
- 2008年
- 构建了FMDVWFL株ORF(open reading frame)基因真核表达质粒pEGFP-C1-A3I3,并进行了表达研究和共转染研究。结果发现,该质粒可以在BHK-21细胞中表达。将其与体外转录获得的FMDV RNA共转染BHK-21细胞后,用夹心ELISA、RT-PCR法以及电镜观察证明共转染后的细胞培养液中有病毒粒子,且病毒量高于单独转染RNA所得病毒量。证明用FMDV基因组真核表达质粒与其基因组体外转录RNA共转染敏感细胞可提高拯救病毒的数量。
- 任林柱王兴龙崔丽瑾张辉孟柯音
- 关键词：口蹄疫病毒真核表达反向遗传技术拯救
- 靶向IRES序列的siRNA对口蹄疫病毒体外增殖抑制效果
- 2010年
- 为探讨靶向核糖体进入位点(IRES)区域的siRNA在真核细胞中对FMDV复制的抑制作用,对FMDV WFL株的IRES序列进行了保守性分析和二级结构预测,选择了靶向IRES保守的功能核心区的病毒复制原点附近的2个干扰靶位,设计并构建了shRNA真核表达质粒,转染到IBRS-2细胞后感染FMDV,通过双抗夹心ELISA和real-timeRT-PCR检测FMDV复制情况,结果表明,针对IRES区域的RNAi能够在一定程度上抑制FMDV的复制。
- 崔丽瑾王兴龙任晓慧任林柱郎需龙杨艳玲李晓艳卜朝阳
- 关键词：口蹄疫病毒RNA干扰
- 口蹄疫病毒2B基因的生物信息学分析及其siRNA真核表达系统的建立被引量：1
- 2010年
- 应用RT-PCR方法扩增口蹄疫WLF株2B基因,将其克隆到pMD18-T载体中,测序后进行序列保守性分析和RNA二级结构分析,筛选适合作为siRNA的靶序列。根据siRNA表达载体要求,合成shRNA表达模板,连接到含有U6启动子的真核表达载体中,建立了靶向口蹄疫2B基因的真核表达系统,为进一步研究靶向2B基因的RNA干扰对口蹄疫病毒的抑制作用奠定了基础。
- 崔丽瑾王兴龙段小宇刘铠党源郎需龙李晓艳
- 关键词：口蹄疫病毒SIRNA真核表达系统
- 口蹄疫病毒自然感染和疫苗接种动物鉴别方法研究进展被引量：2
- 2008年
- 任林柱王兴龙崔丽瑾
- 关键词：口蹄疫病毒疫苗接种偶蹄动物自然感染世界动物卫生组织接触性传染病
- 羊布鲁菌O链M抗原提纯及其单克隆抗体的研制被引量：2
- 2007年
- 目的研制羊布鲁菌O链M纯化抗原及其单克隆抗体。方法采用冷酚法提纯羊布鲁菌16M的O链抗原,并经琼脂糖凝胶免疫扩散和SDS-PAGE鉴定,用灭活的该抗原免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,并进行鉴定。结果建立3株分泌单克隆抗体的细胞株2D10、3C6和1E10,ELISA效价分别为1.380、1.109和1.048,与大肠杆菌0:157、小肠结肠炎耶尔森菌0:9、鼠伤寒沙门菌和猪胸膜肺炎放线杆菌均无交叉反应。3C6和1E10与牛布鲁菌544A发生交叉反应,2D10的亲和常数达5.30×10~7M^(-1)。结论已制备出纯化的羊布鲁菌O链M抗原及其单抗。
- 梅建军王兴龙万忠海李晓燕马云志张辉崔丽瑾
- 关键词：单克隆抗体
- 野生动物布鲁氏菌病被引量：20
- 2010年
- 崔丽瑾王兴龙王英超张付贤唐婕杨艳玲郭振华
- 关键词：布鲁氏菌病野生动物人兽共患病畜牧业发展寄生菌两栖类
