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师文娟
作品数:
2
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供职机构:
中国医学科学院北京协和医学院
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发文基金:
国家自然科学基金
国家重点基础研究发展计划
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相关领域:
生物学
医药卫生
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合作作者
邵丁丁
中国医学科学院北京协和医学院基...
王恒
中国医学科学院北京协和医学院基...
钟翔
中国医学科学院北京协和医学院基...
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师文娟
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钟翔
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王恒
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邵丁丁
传媒
1篇
基础医学与临...
年份
2篇
2010
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2
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人Ⅱ型CD74及人源与疟原虫来源MIF在昆虫细胞中的表达研究
人Ⅱ型CD74作为巨噬细胞迁移抑制因子(Macrophage Migration InhibitoryFactor,MIF)的受体分子,MIF与其结合后能活化多条信号通路,并引发下游多种级联反应,与多种人类自身疾病的发生...
师文娟
关键词:
杆状病毒
昆虫细胞
CD74
MIF
文献传递
人Ⅱ型CD74基因胞外端片段在昆虫细胞中的表达
2010年
目的建立应用昆虫杆状病毒表达系统表达人Ⅱ型CD74胞外端片段的技术平台。方法运用分子克隆技术,分别将CD 74胞外端全长(73-232 aa)和与MIF结合的核心区(109-192 aa)片段置于表达载体pFastBacDual的PPH启动子下,重组质粒转入含有Bacmid的大肠杆菌DH10Bac后与病毒基因组重组,提取重组病毒杆粒基因组,转染Sf-21细胞系。用RT-PCR检测目的基因mRNA,用SDS-PAGE和Western blot分析重组蛋白的表达。结果 CD74胞外端全长(73-232 aa)可实现在昆虫细胞中的表达,目的蛋白可被His标签抗体和CD74抗体识别;在细胞感染72 h、病毒接种滴度MOI为8时,目的蛋白可实现最大表达量。CD74与MIF结合的核心区(109-192 aa)片段在mRNA可实现转录的情况下未实现目的蛋白表达。结论成功建立人Ⅱ型CD74胞外端全长在昆虫细胞Sf-21中的表达平台,并获得了目的蛋白表达的优化条件。
师文娟
邵丁丁
钟翔
王恒
关键词:
CD74
杆状病毒
昆虫细胞
蛋白表达
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