- 高糖刺激内质网应激诱导单核细胞活化
- 2013年
- 目的探讨内质网应激在高糖诱导单核细胞活化中的作用。方法采用高糖刺激培养的单核细胞株（THP-1）。RT—PCR和Westen印迹法检测葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、磷酸化c—Jun氨基末端蛋白激酶（p-JNK）等内质网应激反应指标变化以及分子伴侣甜菜碱干预后的改善效果。MTT法检测细胞增殖，Transwell小室法检测单核细胞的趋化能力。免疫荧光法检测单核细胞亚型。结果与正常对照组相比，GRP78mRNA和蛋白表达升高（P〈0．05）；p-JNK蛋白表达水平增加（P〈0．05）；单核细胞增殖活性和趋化能力增强，向M1亚型分化增多（P〈0．05）。分子伴侣甜菜碱可抑制高糖引起的单核细胞内质网应激反应、增殖活性和趋化能力，促使单核细胞向M2亚型分化。结论高糖通过刺激内质网应激而诱导单核细胞活化，甜菜碱可逆转高糖对单核细胞的激活作用。
- 黄丽冯兵庞琦陈吉刚郭艳红杜翔袁发焕
- 关键词：单核细胞高糖
- 内质网应激在尿毒症血清致内皮细胞功能异常中的作用被引量：7
- 2011年
- 目的探讨内质网应激(ERS)在尿毒症血清致内皮细胞功能异常中的作用。方法采集尿毒症患者和正常健康人的静脉血血清。以不同浓度的尿毒症血清或正常血清(2.5%、5%、10%、15%、20%)刺激人脐静脉内皮细胞(hUVEC)24h后,采用MTT比色法检测细胞活力的变化,流式细胞术检测细胞周期,Hoechst33342染色观察细胞凋亡,荧光定量RT-PCR法检测单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)mRNA表达的变化。结果当浓度小于10%时,尿毒症血清对hUVEC细胞增殖率和S期百分比的影响随浓度增加而增大。当浓度大于10%时,hUVEC细胞增殖率和S期百分比逐渐下降,且细胞凋亡率逐渐增高。与正常血清组比较,10%尿毒症血清刺激后hUVEC GRP78和MCP-1 mRNA表达均显著升高(P<0.05)。应用分子伴侣4-苯基丁酸(4-PBA)干预,可显著抑制尿毒症血清诱导的GRP78 mRNA和MCP-1 mRNA表达(P<0.05),降低hUVEC的增殖率和S期百分比(P<0.05)。结论内质网应激可能是尿毒症血清诱导内皮细胞功能异常的重要细胞内机制。
- 曾薇罗志锋齐伟郭艳红庞琦张均王宗前牟娇冯兵
- 关键词：内质网应激尿毒症人脐静脉内皮细胞动脉粥样硬化
- microRNA-215在糖尿病肾病小鼠肾组织中的表达及意义被引量：4
- 2012年
- 目的探讨microRNA-215（miR-215）在糖尿病肾病（DN）小鼠。肾组织中的表达变化规律及在DN发病中的作用。方法选择4周龄的2型糖尿病肾病db／db小鼠（实验组）和db／m小鼠（对照组），采用实时荧光定量PCR法动态检测8、12及16周龄时肾组织miR-215的表达变化；实时荧光定量PCR和Western印迹法、免疫组化法测定连环蛋白B互动蛋白1（CTNNBIP1）的mRNA及蛋白的表达；双荧光素酶报告法确证miR-215对CTNNBIP1表达的直接调控作用。结果（1）随着周龄的增加，db／db小鼠肾小球逐渐肥大、节段性系膜细胞增生和系膜基质积聚。（2）与同周龄的db／m小鼠比较，8、12及16周龄的db／db小鼠体质量（BW）、血糖（Glu）及24h尿白蛋白排泄量（UAE）均显著增加（均P〈0．05）。（3）随着周龄的增加，db／db小鼠肾脏组织miR-215表达显著高于同周龄的db／m小鼠（P〈0．05）。（4）与同周龄的db／m小鼠比较，db／db小鼠肾脏组织CTNNBIPlmRNA和蛋白均显著降低（均P〈0．05）。（5）应用双荧光素酶报告法证实，mi-215可显著抑制CTNNBIPl的表达（P〈0．01）。结论miR-215表达上调可能通过抑制CTNNBIPl的表达参与DN的发生、发展。
- 庞琦牟娇郭艳红陈吉刚曾薇黄拥军张均钱丹冯兵
- 关键词：糖尿病肾病微RNASΒ连环素
- MG132可增强糖尿病大鼠肾脏抗氧化能力
- 2011年
- 目的探讨蛋白酶体抑制剂MG132对糖尿病肾病（DN）大鼠的治疗作用及其机制。方法72只大鼠随机分为正常对照组（NC）、DN组和MG132治疗组（DN＋MG132），每组各24只。在治疗第4、8和12周末检测各组大鼠24h尿蛋白排泄率（UPER）、24h尿量和尿丙二醛（MDA）含量、肾组织26S蛋白酶体、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）活性；实时荧光定量PCR法检测各组大鼠肾组织SOD、GSH—PX和p47phoxmRNA的表达变化；Western印迹检测p47phox的蛋白表达变化。结果与Nc组大鼠比较，在4、8和12周时，DN大鼠的UPER显著增高（均P〈0．05）；12周时病理显示DN组大鼠肾小球系膜显著增生和系膜基质积聚增多。与同期DN组大鼠比较，MG132治疗组大鼠的UPER显著降低（均P〈0．05），肾小球系膜增生和基质积聚均减少。在4、8和12周，DN组大鼠肾组织26S蛋白酶体活性比NC组分别增高了2．14倍、2．66倍和3．68倍（均P〈0．05）。与DN组大鼠比较，MG132治疗组大鼠26S蛋白酶体活性显著下降（均P〈0．05）。与NC组大鼠相比，DN组大鼠肾组织p47phoxmRNA表达分别升高了1：55％、149％和120％（均P〈O．05）；p47phox蛋白表达分别升高了139％、152％和186％（均P〈0．05）；尿MDA含量分别升高了1．95倍、2．04倍和2．62倍（均P〈0．05）；而DN大鼠肾组织SOD活性分别下降23．09％、33．59％和53．31％（均P〈0．05）；GSH—PX的活性分别下降28．57％、33．06％和48．76％（均P〈0．05）；SODmRNA表达分别下降38．09％、61．44％和76．53％（均P〈0．05），GSH．PXmRNA表达分别下降29．16％、37．26％和62．40％（均P〈0．05）。与1）N组大鼠比较，MG132治疗组大鼠肾组织D47phoxmRNA和蛋白表达以及尿MDA含量则显著下降（均P〈0．05），而SOD和GSH—PX的活性和mRNA均显著升高（均P〈0．05）。结论MG132对DN大鼠肾脏有显著的保�
- 罗志锋齐伟曾薇庞琦郭艳红牟娇冯兵
- 关键词：氧化性应激抗氧化剂蛋白酶体MG132
- 内质网应激在尿毒症血清致内皮细胞增殖和炎症激活中的作用
- 目的探讨内质网应激(ERS)在尿毒症血清致内皮细胞增殖和炎症激活中的作用。方法采用MTT比色法检测人脐静脉血管内皮细胞(hUVEC)增殖能力的变化,流式细胞技术检测细胞周期,荧光定量RT-PCR法检测单核细胞趋化蛋白-1...
- 曾薇罗志锋齐伟郭艳红庞琦张均王宗前牟娇冯兵
- 关键词：内质网应激尿毒症人脐静脉内皮细胞动脉粥样硬化
- 文献传递
- 蛋白酶体抑制剂对大鼠糖尿病肾病的治疗作用
- 目的探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠糖尿病肾病的治疗作用。方法 54只成年Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为正常对照组(NC)、糖尿病肾病模型组(DN)、MG132治疗组(MG132)。分别在药物干预的4、...
- 齐伟曾薇庞琦郭艳红牟娇冯兵刘理叶自林袁发焕
- 文献传递
- 调节内质网应激对糖尿病小鼠肾脏SET7／9表达的影响被引量：3
- 2012年
- 目的探讨调节内质网应激对小鼠肾组织组蛋白甲基转移酶（HMT）SET7／9表达的影响及意义。方法db／db小鼠按随机数字表法分为糖尿病肾病（DN）组和甜菜碱治疗（DN＋B）组；db／m小鼠作为正常对照（NC）组，每组各18只。实验第4、8、12周末分别采用实时定量PCR和（或）Western印迹法测定小鼠肾组织SET7／9、葡萄糖调节蛋白（GRP）78、H3K4me2和单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）表达水平；ELISA法测定24h尿蛋白排泄率（UPER）和尿MCP-1浓度；全自动生化分析仪检测血糖（BG）、血肌酐、血尿素氮的动态改变；PAS染色观察肾脏病理改变。结果与NC组比较，DN组BG、BUN、UPER、MCP-1均显著升高（均P〈0．05），且呈时间依赖性。DN组小鼠第4周末开始出现肾小球基底膜增厚、系膜细胞增生改变，第12周末出现明显系膜基质积聚。与NC组比较，DN组肾组织GRP78、SET7／9的mRNA和蛋白质表达水平均显著升高，H3K4me2蛋白水平也显著升高，且呈时间依赖效应。与DN组比较，甜菜碱治疗组小鼠肾小球病变明显减轻，GRP78、SET7／9的mRNA及蛋白表达水平显著降低，BG、BUN、UPER、MCP-1、H3K4me2水平显著降低（均P〈0．05）。结论内质网应激可能是介导糖尿病小鼠肾脏SET7／9表达的上游机制。
- 陈吉刚庞琦曾薇郭艳红牟娇聂凌袁发焕冯兵
- 关键词：糖尿病肾病甜菜碱内质网应激组蛋白甲基转移酶
- 甜菜碱对糖尿病肾病小鼠的治疗作用及其机制被引量：19
- 2012年
- 目的探讨分子伴侣甜菜碱(betaine)对糖尿病肾病小鼠的治疗作用及机制。方法 db/db小鼠按随机数字表法分为糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)组和甜菜碱治疗组(DN+B),db/m小鼠作为正常对照组,每组18只。在治疗第4、8、12周末分别采用实时荧光定量PCR和Western blot技术测定GRP78的表达水平,ELISA测定尿单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的含量,常规病理和生化方法检测肾脏病理、血糖(blood glucose,BG)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、24 h尿蛋白排泄率(urinary albumin excretion rate,UAER)的动态改变。结果①与同期正常对照组比较,DN组小鼠的BG、BUN、24 h UAER、MCP-1均明显升高(P<0.05),甜菜碱治疗后可明显降低BG、BUN、24 h UAER、MCP-1水平(P<0.05),而对Scr无明显影响。②与正常对照组比较,12周时DN组小鼠肾小球基底膜增厚,系膜细胞增生,系膜基质积聚,而甜菜碱治疗后可明显抑制肾脏的病理变化。③与正常对照组比较,DN组小鼠肾脏组织GRP78 mRNA和蛋白质表达水平均显著升高(P<0.05),甜菜碱治疗后可明显抑制GRP78的表达(P<0.05)。结论甜菜碱可能通过减轻内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)及相关的炎症反应治疗DN小鼠。
- 陈吉刚庞琦曾薇郭艳红牟娇聂凌袁发焕冯兵
- 关键词：GRP78糖尿病肾病甜菜碱小鼠
- 尿毒症患者血浆蛋白酶体与内皮功能损伤的相关性被引量：2
- 2012年
- 目的探讨尿毒症患者血浆蛋白酶体与动脉内皮损伤的相关性。方法选择新诊断未透析的尿毒症患者（A组，45例）和已行血液透析6～12个月的尿毒症患者（透析充分为B组，44例；透析不充分为C组，31例）为对象。正常健康人15例为健康对照组（D组）。应用多普勒超声检测左前臂桡动脉内-中膜厚度和内皮舒张功能。酶联免疫法（ELISA）检测各组血浆20S蛋白酶体、肿瘤坏死因子α（TNF—α）、C-反应蛋白（CRP）和转化生长因子β1（TGF-β1）的含量。分光光度法检测血浆20S蛋白酶体的活性。结果D组血浆20S蛋白酶体含量和活性均极低。与D组比较，A组、B组和C组患者血浆20S蛋白酶体含量和活性，以及TNF—α、CRP和TGF-β1的含量均显著升高。与A组比较，B组血浆20S蛋白酶体含量和活性均显著降低，而C组明显升高；TNF-α、CRP和TGF-β1也存在相似的变化。与D组比较，A组、B组和C组患者桡动脉内皮依赖性舒张功能（EDD）和非依赖性舒张功能（EID）均显著下降；切面内膜中膜面积（IMA）均显著增加；C组患者桡动脉内一中膜厚度（IMT）明显增厚，腔内径明显变小。与A、B组比较，C组患者EDD进一步显著降低。与D组血清比较，A、B、C组血清刺激内皮细胞释放蛋白酶体和TNF-α均显著升高，尤以C组升高最明显。在A组和C组，血浆20S蛋白酶体含量和活性、炎性细胞因子与内皮舒张功能EDD均呈负相关；血浆20S蛋白酶体含量和活性与TNF—α、CRP和TGF-β1均呈正相关。结论尿毒症患者血浆20S蛋白酶体含量和活性的显著升高与动脉内皮功能损伤密切相关。
- 罗志锋冯冰曾薇郭艳红庞琦陈吉刚牟娇李燕聂凌袁发焕冯兵
- 关键词：尿毒症动脉粥样硬化蛋白酶体内皮功能
- MG132可增强糖尿病大鼠肾脏抗氧化能力
- 目的探讨蛋白酶体抑制剂MG132对糖尿病肾病大鼠的治疗作用极其机制。方法 72只大鼠随机分为正常对照组(NC)、糖尿病肾病组(DN)和MG132治疗组(DN+MG132),每组各24只。在治疗第4、8和12周末检测各组大...
- 罗志锋齐伟曾薇庞琦郭艳红牟娇冯兵刘理叶自林袁发焕
- 关键词：糖尿病肾病氧化应激抗氧化蛋白酶体MG132
- 文献传递
