朱荣
- 作品数:5 被引量:26H指数:1
- 供职机构:江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金:中国博士后科学基金江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 重组4-α-糖基转移酶转化淀粉制备大元环糊精的条件优化被引量:1
- 2018年
- 4-α-糖基转移酶能够以淀粉为底物通过分子内转糖基作用制备大元环糊精。本研究成功构建了产超嗜热菌Aquifex aeolicus来源的4-α-糖基转移酶重组菌的E.coli BL21 (DE3)/pET-24a(+)-AaAM。对重组菌进行摇瓶发酵,培养27h破壁上清酶活达到0.99 U/mL。以马铃薯淀粉为底物,对酶转化生成大元环糊精进行了条件优化。结果表明,在底物质量浓度为1 g/dL时,经异淀粉酶脱支预处理后,调节初始pH为7.0,反应温度为75℃,加酶量为20 U/g,在10 h时大元环糊精的转化率达到最高24.8%,为大元环糊精的工业生产奠定了基础。
- 朱荣朱荣宿玲恰
- 关键词:酶转化
- 人IL-29的定点突变及抗肿瘤活性初步分析
- 目的:在基因水平对人白细胞介素-29(hIL-29)成熟肽进行分子改造,以获得生物学活性更高的IL-29变异体。方法:根据hIL-29成熟肽的生物信息学分析数据,采用大引物PCR方法对其肽链第33位赖氨酸、35位精氨酸的...
- 陈伟朱荣葛春蕾陆源李利云李菲邬敏辰
- 关键词:定点突变变异体抗肿瘤活性
- 文献传递
- 人IL-29的定点突变及抗肿瘤活性初步分析
- 目的:在基因水平对人白细胞介素-29(hIL-29)成熟肽进行分子改造,以获得生物学活性更高的IL-29变异体.方法:根据hIL-29成熟肽的生物信息学分析数据,采用大引物PCR方法对其肽链第33位赖氨酸、35位精氨酸的...
- 陈伟朱荣葛春蕾陆源李利云李菲邬敏辰
- 关键词:定点突变变异体抗肿瘤活性
- 人IL-29的定点突变及抗肿瘤活性初步分析被引量:1
- 2015年
- 为探讨人白细胞介素-29(h IL-29)变异体的抗肿瘤活性,根据h IL-29成熟肽的生物信息学分析数据,采用大引物PCR方法对其肽链第33位赖氨酸、35位精氨酸的编码基因进行定点突变,获得的h IL-29变异体基因构建重组真核表达质粒转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115进行发酵表达,经纯化得到重组人白细胞介素-29变异体蛋白(rh IL-29mut33,35)。经CCK-8法检测抗肿瘤细胞增殖的数据显示,rh IL-29mut33,35对肝癌细胞BEL7402、结肠癌细胞HCT8和胃癌细胞SGC7901的增殖均具有抑制作用,高剂量组对这3种肿瘤细胞的增殖抑制率分别为(30.99±1.58)%、(22.47±1.37)%和(32.05±2.02)%,而且抗增殖作用比野生型rh IL-29的更强(P<0.01),表明变异体rh IL-29mut33,35具有潜在的医药开发价值。
- 陈伟朱荣葛春蕾陆源李利云李菲邬敏辰
- 关键词:定点突变变异体抗肿瘤活性
- 人白细胞介素-29的生物信息学分析被引量:25
- 2013年
- 目的利用生物信息学技术对人白细胞介素-29(Human nterleukin-29,IL-29)进行分析,为定点突变hIL-29,以提高其生物学活性奠定理论基础。方法利用生物信息学技术分析克隆得到的hIL-29基因,预测hIL-29基因编码蛋白的理化性质、结构、功能及可能影响其生物学活性的关键氨基酸位点;预测其三维结构,并与IFNλ3的晶体结构进行比对;对检索到的9个物种的IL-29基因同源序列进行比对,并构建系统进化树。结果 hIL-29基因编码蛋白含200个氨基酸残基,其N-末端19个氨基酸为信号肽,成熟肽的相对分子质量为20 018,理论等电点为9.08,肽链中含一个由胞内向胞外的跨膜结构域;hIL-29的空间构象由6个α螺旋(A~F)和无规则卷曲组成,螺旋A、B和F可能是hIL-29与特异性受体结合而发挥生物学效应的活性部位,A、F螺旋中有4个氨基酸残基可能是影响其生物学活性的关键氨基酸位点;系统进化分析显示,hIL-29与狗、猫、大熊猫、马、野猪、黑猩猩、长臂猿的IL-29具有较高的同源性,处于同一个大分枝,而人、黑猩猩、长臂猿的IL-29处于同一个小分枝,在系统进化树中的距离最近。结论关键位点氨基酸的差异可能对hIL-29的生物学活性影响较大,可作为对hIL-29进行分子改造的突变位点。本研究为后续进行hIL-29的定向改构及其构效关系等的深入研究奠定了理论基础。
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- 关键词:生物信息学突变