李艳霞 作品数:28 被引量:65 H指数:4 供职机构: 天津市第五中心医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 天津市卫生局科技基金 天津市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
蛋白激酶B1去类泛素化修饰抑制肝癌的增殖和转移 被引量:5 2017年 目的 探讨沉默泛素载体蛋白9(Ubc9)基因表达诱导蛋白激酶B1(AKT1)去类泛素化修饰,及其对肝癌细胞增殖和转移的影响.方法 利用RNA干扰技术沉默HepG2肝癌细胞Ubc9基因表达,Western blot法检测Ubc9、小泛素相关修饰蛋白1(SUMO1)和蛋白激酶B1(AKT1)蛋白表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞术检测HepG2细胞增殖活性,细胞划痕实验和Transwell方法检测细胞迁移能力.建立荷瘤鼠模型,测量肿瘤体积并绘制生长曲线,解剖肿瘤组织并称重比较.采用原位细胞凋亡实验检测肿瘤组织细胞凋亡情况,免疫组化法检测肿瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和 MMP-9的表达情况.结果 siR-Ubc9基因转染可使HepG2细胞中Ubc9、共轭SUMO1、游离SUMO1和AKT1蛋白水平均明显下降(均P〈0.05).对照组、siR-neg组和siR-Ubc9组的细胞增殖指数分别为53.19%、54.25%和39.17%,细胞迁移距离分别为(59.47±4.66)μm、(56.56±5.37)μm和(34.57±6.61)μm,发生迁移的细胞数量分别为(89.44±8.36)个/视野、(93.84±8.79)个/视野和(41.67±5.39)个/视野,siR-Ubc9组与对照组和siR-neg组差异均有统计学意义(均P〈0.05).对照组、siR-neg组和siR-Ubc9组的皮下肿瘤重量分别为(3.78±0.69)g、(3.72± 0.72)g和(2.09±0.61)g,细胞凋亡率分别为(7.79±2.21)%、(6.45±2.48)%,和(33.59±5.44)%,siR-Ubc9组与对照组和siR-neg组差异均有统计学意义(均P〈0.05).对照组和siR-neg组肿瘤组织中PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白均高表达,而siR-Ubc9组肿瘤组织中PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白表达均低表达,差异均有统计学意义(均P〈0.05).结论 通过沉默肝癌细胞中Ubc9基因表达能够诱导AKT1去SUMO化修饰,进而抑制肝癌细胞的增殖和转移,为未来肝癌基因治疗提供了新的借鉴方法. 盛凤 沈依萌 万乔浩 李艳霞 马晓芳 姜忠敏 张殿英 刘晓智 吴问汉关键词:肝肿瘤 细胞增殖 肿瘤转移 B细胞异位基因-2在大肠癌中的表达及其意义 2014年 本研究旨在探讨B细胞异位基因-2(BTG2)在结肠癌中表达及意义,现报道如下.一、材料与方法1.材料:收集2008年1月1日至2013年12月31日期间天津市第五中心医院肛肠外科行大肠癌手术切除标本100例,分为石蜡和冰冻组织。男64例,女36例;中位年龄56岁。另选正常大肠黏膜和大肠腺瘤标本各40例作为对照。 张亮 丁珊珊 张立东 王守峰 李艳霞 刘晓智 姜忠敏关键词:大肠癌 B细胞 手术切除标本 肛肠外科 中位年龄 大肠腺瘤 葛根素通过调节类泛素化修饰平衡改善心肌功能的研究 被引量:3 2021年 目的从小泛素样修饰蛋白(SUMO)介导SUMO化修饰平衡角度解读葛根素对心力衰竭(HF)的心功能保护作用及机制。方法通过主动脉缩窄术造成压力超负荷诱导HF,成功构建小鼠HF模型后,小鼠随机分为对照组、模型组、模型+葛根素组、葛根素组,每组6只;HL-1细胞构建HF模型,分为对照1组、模型1组、模型+葛根素1组、对照2组、模型2组、模型+葛根素2组,其中前3组转染Vector质粒,后3组转染HA-SENP1质粒。超声心动检测心室功能;苏木精-伊红染色检测心肌组织形态;蛋白印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、活化型Caspase-3、Bcl2、Bax和SUMO特异性蛋白酶1(SENP1)蛋白水平;JC-1试剂检测线粒体膜电位;TUNEL检测HL-1细胞凋亡情况。结果与对照组比较,模型组小鼠线粒体内活性氧及H_(2)O_(2)均增加,线粒体膜电位下降(P<0.05),与模型组比较,模型+葛根素组可改善HF小鼠心脏功能,活性氧和H_(2)O_(2)降低,线粒体膜电位增加,活化型Caspase-3/Caspase-3比值下降、Bcl2/Bax比值增加、SENP1蛋白下降(P<0.05)。与模型1组相比,模型+葛根素1组活性氧及H_(2)O_(2)减少,线粒体膜电位升高(P<0.05)。与模型+葛根素1组比较,模型+葛根素2组细胞内H_(2)O_(2)和活性氧增加,线粒体膜电位降低,细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论葛根素通过抑制SENP1过表达,减弱HF小鼠心肌细胞的氧化应激,减轻线粒体损伤,抑制心室重构,最终改善心脏功能。 边希云 肖晓琳 薛娜 于田 马晓芳 李艳霞 刘晓智 杜新平关键词:葛根素 膜电位 小泛素样修饰蛋白特异性蛋白酶1介导糖尿病性血管内皮细胞损伤修复的研究 被引量:2 2020年 目的利用小泛素相关修饰体(SUMO)特异性蛋白酶1(SENP1)解离过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)的小泛素样修饰蛋白1(SUMO1)修饰。方法人脐静脉内皮细胞培养传代后分对照组、高糖组及SENP1组;Western blot法检测SENP1、SUMO1、PGC-1α和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)水平;实时荧光定量PCR检测线粒体转录因子A(TFAM)、核呼吸因子2α(NRF-2α)和雌激素受体相关受体α(ERRα)的mRNA表达;ELISA测定乳酸脱氢酶(LDH);细胞划痕愈合方法、Transwell方法和体外血管模拟形成实验分别检测细胞自愈、迁移和形成血管拟态的能力。结果与对照组比较,高糖组共价SUMO1、PGC-1α和活化Caspase-3蛋白表达明显升高,SENP1蛋白表达明显降低,TFAM、NRF-2α和ERRα的mRNA表达明显降低,细胞划痕修复能力及模拟血管形成能力下降(P<0.05,P<0.01)。与高糖组比较,SENP1组SENP1蛋白表达明显升高,共价SUMO1、PGC-1α和活化Caspase-3蛋白表达明显降低,TFAM、NRF-2α和ERRα的mRNA表达明显升高,细胞划痕修复和迁移能力及模拟血管形成能力明显改善(P<0.05,P<0.01)。对照组、高糖组和SENP1组细胞上清液中LDH水平比较,差异有统计学意义[(24.66±6.39)ng/ml vs(302.45±30.54)ng/ml vs(174.08±21.03)ng/ml,P<0.01]。结论SENP1能够诱导PGC-1α发生去SUMO修饰,解除其对PGC-1α下游转录因子的抑制作用,改善线粒体功能,抑制高糖诱导的血管内皮细胞功能损伤作用。 李萍 李丽丽 李艳霞 马晓芳 边希云 肖晓琳 张春艳 刘凤婷 刘晓智关键词:半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 L-乳酸脱氢酶 一种类器官培养图像压缩方法 本发明涉及图像通信技术领域,具体涉及一种类器官培养图像压缩方法,包括:根据类器官培养图像的灰度共生矩阵获取类器官培养图像中像素点在不同后置灰度编码长度下对应的平均编码长度,从而筛选最优后置灰度编码长度,根据最优后置灰度编... 刘晓智 姜忠敏 张春艳 马晓芳 韩冰 李艳霞增加B细胞异位基因2蛋白表达抑制结肠癌细胞的增殖与转移 被引量:2 2015年 目的通过增加B细胞异位基因2(BTG2)蛋白表达水平的方法,抑制结肠癌细胞的增殖和转移。方法采用Western blot法检测正常人肠上皮细胞HIEC和结肠癌细胞SW620、HT-29、LS174T中BTG2蛋白的表达水平。采用免疫组织化学方法检测40例正常结肠上皮、40例结肠腺瘤和40例结肠癌组织中BTG2蛋白的表达情况。将含BTG2基因全长序列的质粒转染结肠癌SW620细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTr)法绘制细胞生长曲线,免疫荧光方法检测Ki-67蛋白表达,划痕实验和Transwell双室培养体系检测结肠癌SW620细胞的迁移能力,鼠尾胶Matrigel 3D培养体系检测SW620细胞伪足生长情况。结果Western blot检测结果显示,正常人肠上皮细胞HIEC、结肠癌细胞SW620、HT-29和LS174T中BTG2蛋白相对表达水平分别为0.83±0.12、0.18±0.04、0.20±0.05和0.36±0.07。免疫组织化学方法检测结果显示,BTG2蛋白在正常结肠组织、结肠腺瘤组织和结肠癌组织中的阳性表达率分别为82.5%(33/40)、77.5%(31/40)和17.5%(7/40),组间差异有统计学意义(P〈0.05)。免疫荧光方法检测结果显示,对照组、空载质粒组和BTG2转染组中Ki-67阳性率分别为(76.2±8.0)%、(81.4±9.7)%和(50.1±7.1)%,组间差异有统计学意义(P〈0.05)。划痕实验显示,对照组、空载质粒组和BTG2转染组SW620细胞两侧间的距离分别为(79.27±11.24)μm、(80.65±12.17)μm和(124.77±19.63)μm,组间差异有统计学意义(P〈0.05)。Transwell实验结果显示,对照组、空载质粒组和BTG2转染组SW620细胞的迁移率分别为(78.5±13.1)%、(73.2±12.9)%和(47.4±9.1)%,组间差异有统计学意义(P〈0.05)。经BTG2基因转染的SW620细胞克隆球伪足数量减少,延展性较差。结论BTG2基因参与结肠癌细胞的增殖和转移,有效恢� 姜忠敏 张亮 张立东 王守峰 郑末 李艳霞 刘晓智关键词:结肠肿瘤 细胞增殖 细胞迁移 肿瘤转移 一种脂质体挤出器设备 本实用新型提供了一种脂质体挤出器设备,包括底座、挤出器与2个注射器,所述的挤出器位于所述的底座上,所述的挤出器的两端分别与对应的注射器相连,所述的底座上设置有2个固定支架,所述的固定支架对所述的注射器进行夹持;所述的底座... 薛娜 边希云 肖晓琳 韩冰 于田 李艳霞 马晓芳碳酸饮料对乳恒牙更替期牙齿健康的影响 被引量:1 2014年 目的研究碳酸饮料对乳恒牙更替期牙齿健康的影响作用及机制。方法 40颗犬牙釉质样本分别采用15μL可口可乐(可口可乐组)、雪碧(雪碧组)、纯苏打水(苏打水组)和生理盐水(生理盐水组)浸泡,各10颗。测定处理后饮料中钙、磷溶出浓度;分离牙乳头干细胞,以添加可口可乐、雪碧、苏打水和生理盐水的条件培养基进行细胞培养,采用PCR法和Western blot法检测核因子-κB受体活化剂配体(RANKL)、骨保护素(OPG)和维生素D受体(VDR)的mRNA和蛋白表达水平。结果各组钙、磷溶出浓度(mmol/L)由高到低均依次为:雪碧组(3.679±0.114、0.089±0.008)、可口可乐组(2.217±0.109、0.036±0.005)、生理盐水组(0.021±0.004、0.009±0.001)和苏打水组(0.007±0.001、0.002±0.000)。各组RANKL的mRNA和蛋白表达差异均无统计学意义。苏打水组和生理盐水组OPG的mRNA和蛋白表达水平均高于可口可乐组和雪碧组(均P<0.05),雪碧组与可口可乐组、生理盐水组与苏打水组间差异均无统计学意义。生理盐水组VDR的mRNA和蛋白表达水平低于可口可乐组和雪碧组,高于苏打水组(均P<0.05)。结论碳酸饮料可能通过调控成骨相关基因表达及维生素D受体家族共同影响乳恒牙更替期的牙齿健康。 孙莲莲 李长春 姜忠敏 盛凤 李艳霞 刘晓智关键词:骨保护素 靶向抑制Hedgehog信号通路对肝细胞癌增殖、凋亡和转移的影响 被引量:4 2018年 目的观察靶向抑制Hedgehog信号通路对肝细胞癌增殖、转移的影响。方法构建SmoshRNA质粒,建立Smo稳定低表达的肝癌QGY-7701细胞系。采用流式细胞术、CCK8及Tran—swell实验检测Smo基因沉默前后QGY-7701细胞周期、凋亡、增殖及转移能力的变化;通过裸鼠皮下种植模型研究Smo基因沉默对肝癌细胞体内生长的抑制作用,电镜下观察肝癌细胞超微结构的变化。结果实时PCR(RT—PCR)和蛋白印迹(Westernblot)检测显示成功构建shR—Smo稳定基因转染的肝癌细胞系。流式细胞周期实验显示,与对照组比较,shR—Smo组G0/G1期细胞增加,S期细胞减少;凋亡、CCK8及Transwell实验显示Smo基因沉默能够显著增加肝细胞癌凋亡百分率到(5.46±1.46)%,增殖活性显著下降,迁移率减少到(7.82±2.14)%;裸鼠皮下种植模型显示Smo基因沉默能够明显抑制体内肝癌细胞的生长,电镜发现Smo基因沉默后肝癌细胞中溶酶体明显增多。结论阻断Hedgehog信号通路可降低肝细胞癌恶性程度,靶向抑制Hedgehog信号通路有望成为肝细胞癌基因治疗的新选择。 沈依萌 高庆祥 刘晓智 万乔浩 田孝东 杨尹默 李艳霞 吴问汉关键词:信号传导 HEDGEHOG信号通路 免煎颗粒剂与传统汤剂临床疗效的系统评价 被引量:14 2018年 目的:系统评价中药免煎颗粒剂与传统汤剂的临床疗效。方法:检索中国知网(CNKI)、维普期刊资源整合服务平台(VIP)、万方医学数据库、Pub Med等数据库,纳入中药免煎颗粒剂与传统汤药疗效对比研究文献,通过手工检索及阅读,对纳入的临床对照研究进行评价,并采用Rew Man 5.3软件进行荟萃分析。结果:纳入32个随机对照试验,共5 156例患者。Meta分析结果显示:颗粒剂组与传统汤剂组比较,临床总有效率差异无统计学意义(RR=1.01,95%CI[0.99,1.03],P=0.23);颗粒剂组临床治愈率高于传统汤剂组,差异有统计学意义(RR=1.08,95%CI[1.03,1.13],P=0.001)。结论:本系统评价结果显示,颗粒剂的临床总有效率与传统汤剂相当,而临床治愈率优于传统汤剂,可在临床广泛应用。 盛凤 陈自雅 李艳霞 刘晓智 杨崔领关键词:免煎颗粒剂 传统汤剂 疗效