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DUSP1在药物诱导的肝癌细胞衰老中的表达变化及其作用研究: 2014年; 目的:在肝癌的治疗中,化学疗法是重要的治疗手段,尤其在结合外科手术切除的联合治疗中,化疗被广泛的应用于临床。而体内试验证实,化疗药物诱导的细胞衰老在治疗肿瘤的过程中,普遍存在并发挥重要作用,我们着重探讨在药物诱导的人肝癌细胞衰老中,细胞内重要信号途径的变化,发现并利用对细胞衰老有重要意义的蛋白,增强化学治疗肿瘤的效果。在本课题中,我们利用化疗药物阿霉素(doxorubicin)和蛋白酶体抑制剂MG132诱导的人衰老肝癌细胞模型,对MAPK信号途径的负调控因子DUSP家族的表达变化进行检测,筛选表达水平发生显著变化的双特异性磷酸酶(DUSP)家族成员,并初步探讨其在细胞衰老中的作用。方法:利用低剂量的阿霉素和蛋白酶体抑制剂MG132诱导人肝癌细胞衰老;通过Real time RT-PCR和Western blotting检测DUSP家族基因mRNA和蛋白质水平的变化;利用siRNA干扰技术敲降DUSP1,检测药物诱导肝癌细胞衰老水平的变化。结果:经低剂量的阿霉素和蛋白酶体抑制剂短时间处理后,人肝癌细胞系Huh7和SMMC-7721细胞发生明显的细胞衰老;在诱导的衰老细胞中,DUSP1mRNA和蛋白质水平呈显著升高。在敲降DUSP1后,MG132诱导的细胞衰老得到显著的缓解。结论:DUSP1在药物诱导的人肝癌细胞衰老中具有重要的作用,为研究临床治疗中化疗药物引起肿瘤细胞衰老的具体机制带来启发。; 徐英倩杨兆娟王博石夏苏华刘永忠; 关键词：肝癌细胞衰老

与大鼠精子发生相关的基因序列: 一种基因工程技术领域的与大鼠精子发生相关的基因序列。本发明所分离出或纯化的与大鼠精子发生相关基因编码的核苷酸序列及其蛋白分子序列，所述的核苷酸序列，是指：包括在已经分离出或纯化的与大鼠基因具有高度同源性的核苷酸序列的DN...; 吴际杨兆娟; 文献传递

转化生长因子β1对肝癌细胞干性表型的调节作用被引量：9: 2012年; 目的:探讨转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)体外对肝癌细胞干性特征的影响。方法:以转化H-ras的鼠肝肿瘤细胞LPC-H-ras和人肝癌细胞株PLC/PRF/5为研究对象,利用MTT法和多细胞球体培养法检测TGF-β1对肿瘤起始细胞增殖的抑制作用,FCM法检测细胞表面分子CD133的表达以及活性氧(reactive oxygen species,ROS)的水平;实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative-PCR,RFQ-PCR)检测干细胞样基因的表达水平。结果:TGF-β1在体外能够改变LPC-H-ras细胞的形态并抑制细胞的生长;与未处理组相比,TGF-β1作用后,LPC-H-ras细胞表面CD133的表达降低,多细胞球体形成能力减弱,干细胞样基因的表达受到抑制;同样,在PLC/PRF/5细胞中,TGF-β1也能抑制CD133的表达、AFP基因表达以及多细胞球体的形成;另外,在LPC-H-ras细胞中,TGF-β1可诱导ROS表达升高,ROS的抑制剂N-乙酰半胱氨酸具有削弱TGF-β1诱导CD133表达下调的作用。结论:TGF-β1能够抑制肝癌起始细胞的增殖及干性,其作用机制可能与ROS表达上调有关。; 刘兰兰杨兆娟邹飞雁刘永忠; 关键词：肿瘤干细胞转化生长因子Β1 CD133 活性氧

髓性TGF-β受体Ⅱ敲除鼠的建立及其巨噬细胞表型的初步分析: 2012年; 目的:建立髓性TGF-β受体II(TβRII)敲除鼠模型并对其巨噬细胞表型进行了初步分析。方法:利用溶菌酶M启动子-重组酶转基因鼠(lysozyme M-Cre鼠)和TβRII条件敲除鼠,建立定向髓性TβRII敲除鼠,通过基因型检测、免疫细胞的分布组成,然后检测敲除鼠巨噬细胞细胞因子表达的变化及对肿瘤细胞凋亡的影响。结果:建立了髓性TβRII敲除鼠,并初步证明,在肿瘤细胞上清刺激条件下,TβRII敲除的巨噬细胞与对照细胞相比,CXCL1表达量下调。结论:TGF-β信号可调控巨噬细胞的CXCL1表达。; 李静怡马爱辉杨兆娟许东旭刘昀刘永忠; 关键词：巨噬细胞转化生长因子Β

纤毛轴动力蛋白Dnaic2基因的克隆与功能研究: 生殖发育是一个极其复杂的过程,任何影响这一过程的因素都可能导致不孕不育,因此了解生殖发育的具体机制以及在这些机制中起作用的基因的功能是人们迫切需要解决的问题。为此,我们采用DDRT-PCR的方法分析了5日龄及10日龄小鼠...; 杨兆娟; 关键词：DDRT-PCR; 文献传递

应激蛋白Gadd45G对人结肠癌细胞增殖影响的研究被引量：4: 2013年; 目的:研究生长抑制和DNA损伤诱导45G蛋白(growtharrest and DNA-damage-inducible 45 gamma,Gadd45G)对人结肠癌细胞增殖的影响,并初步探讨可能的作用机制。方法:构建携带有四环素可调控(tetracycline-on,Tet-on)基因表达系统的真核表达载体pTRIPZ-Gadd45G,采用慢病毒感染的方法转入人结肠癌细胞系HCT116和SW480,并在强力霉素(doxycycline,Dox)的诱导下过表达Gadd45G。分别采用MTT法、FCM和衰老相关半乳糖苷酶染色法检测Gadd45G过表达对结肠癌细胞增殖、凋亡、细胞周期和衰老的影响,实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)和蛋白质印迹法检测Gadd45G过表达对衰老相关细胞因子白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)及细胞周期相关蛋白表达的影响。结果:在Dox诱导后,含Tet-on基因表达系统的结肠癌HCT116和SW480细胞可稳定表达Gadd45G蛋白。过表达的Gadd45G能显著抑制结肠癌HCT116和SW480细胞的增殖(P<0.001),且使细胞周期被阻滞在G2/M期。Gadd45G的表达可造成结肠癌细胞衰老(P<0.001),但不能诱导细胞凋亡。在Gadd45G过表达抑制细胞增殖的过程中,IL-8mRNA的表达水平明显提高,衰老标志物γ-H2A蛋白的表达水平明显升高,p53、p21/CDKN1a、p16/INK4a和Rb蛋白的表达水平并未发生明显变化。结论:应激蛋白Gadd45G过表达可通过诱导细胞衰老而抑制结肠癌细胞的增殖。; 张力杨兆娟刘永忠; 关键词：结肠肿瘤细胞老化细胞增殖

小鼠Dnaic2基因序列: 一种基因工程技术领域的小鼠Dnaic2基因序列。本发明所分离出或纯化的、与人DNAI2基因具有高度同源性的小鼠Dnaic2基因编码的核苷酸序列及其蛋白分子序列，所述的核苷酸序列，是指：包括在已经分离出或纯化的与人DNAI...; 吴际杨兆娟; 文献传递

TGFβ信号调控阿霉素诱导的衰老肿瘤细胞表达SA-β-gal被引量：1: 2013年; 目的:细胞衰老是维持机体稳态的一种重要机制,表达SA-β-gal被认为是衰老细胞的一种特异性的标志,但有研究表明在衰老细胞中SA-β-gal染色阳性只是衰老细胞的溶酶体变大的结果,为了探究SA-β-gal的表达与细胞衰老之间的具体关系,我们验证了参与调节衰老细胞表达SA-β-gal的信号通路及SA-β-gal的表达情况是否会对细胞衰老的过程产生影响。方法:肿瘤细胞用低剂量的阿霉素处理24小时后,再分别给予不同的小分子抑制剂继续作用4天,观察SA-β-gal染色阳性的细胞数目及SA-β-gal表达与否对于衰老细胞在分泌细胞因子、生长阻滞等细胞生物学功能上的影响。结果:在阿霉素诱导细胞发生衰老的过程中,TGFβ抑制剂SB431542能够抑制衰老细胞表达SA-β-gal,而SA-β-gal表达的缺失并不影响细胞衰老的其他特征性改变。结论:低剂量的阿霉素作用肿瘤细胞后,细胞会进入衰老的状态。在细胞衰老的过程中,TGFβ受体I的抑制剂SB431542可以抑制衰老细胞表达SA-β-gal,但是SA-β-gal的缺失表达并不影响细胞衰老的过程及衰老细胞的其他特性,如:不可逆的生长阻滞、分泌有活性的细胞因子等。结果表明:SA-β-gal并不能作为衰老细胞的特异性标志。; 许东旭张力杨兆娟夏苏华刘永忠

人与哺乳动物雌性生殖细胞发育及雌性生殖干细胞生物学特性研究: 吴际邹康张永杨兆娟; 该项目隶属于生殖生理学领域。生殖是一切生物体的基本特征之一，人类和哺乳动物的生命必须依赖生殖过程得以延续。生殖细胞是实现这一过程的特殊细胞。雌性生殖细胞由原始生殖细胞，雌性生殖干细胞和其发育后生成的卵母细胞组成。它们的正...; 关键词：; 关键词：生物学特性

NDRG1对人肠癌细胞失巢凋亡的影响被引量：1: 2015年; 目的:探讨NDRG1对体外培养的人肠癌细胞系失巣凋亡的影响。方法:采用慢病毒系统将NDRG1表达单元转入人肠癌细胞系SW620、HCT8中,建立相应的过表达稳定细胞系;通过siRNA的方法干扰HCT116和LOVO细胞系中NDRG1的表达,分别在非贴壁培养的情况下培养48小时,采用流式细胞术和TUNEL染色检测细胞的凋亡情况。结果:在贴壁培养条件下,NDRG1过表达并没有显著影响肠癌细胞的生长及增殖,而NDRG1特异性siRNA干扰HCT116细胞中NDRG1的表达后,其凋亡率无明显变化(P>0.05)。在悬浮培养条件下,NDRG1过表达的肠癌细胞的失巢凋亡率显著低于正常对照组(P<0.05),而用三种不同的siRNA干扰HCT116及LOVO细胞中NDRG1的表达后,其失巢凋亡率均显著高于正常对照组(P<0.05)。结论:NDRG1在体外可抑制人肠癌细胞的失巢凋亡。; 林龙龙杨兆娟钱钰夏苏华张力李静怡马爱辉许东旭王博石刘昀刘永忠; 关键词：NDRG1 失巢凋亡肠癌

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杨兆娟

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