汪道涌 作品数:9 被引量:12 H指数:2 供职机构: 东南大学基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 高等学校优秀青年教师教学科研奖励计划 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
用TnV分离粘细菌发育回复突变株 被引量:2 2001年 fruA∷TcΩ5 is a development deficient strain of M.Xamthus.Transposon TnV was used to randomly mutagenize various sites of fruA ∷TcΩ5 chromosome.Fruiting body formation was restored in one TnV insertion mutant,designated XM1206.The TnV\|inserted DNA fragment from XM1206 chromosome was cloned,which may be served as a probe to isolate the corresponding allele from wild\|type strain. 毛晓华 汪道涌 李新荣关键词:粘细菌 发育 回复突变 转座子 新的核糖体相关蛋白ECP参与果蝇学习记忆的在体研究 ECP是真核生物中普遍存在的、高度保守的一类蛋白质,其N端带有一个亮氨酸拉链结构域,C端带有一个eIF5c结构域,业已证明果蝇ECP是一个新的核糖体相关蛋白,可能在蛋白质的合成过程中发挥着重要的作用。有研究表明,其P因子... 徐敏 汪道涌 谢维关键词:ECP 果蝇 学习记忆 文献传递 果蝇中一个新基因ecp的功能鉴定与分析 我们从野生型黑腹果蝇胚胎cDNA文库中筛选并克隆得到ecp全长cDNA序列。生物信息学分析表明:ECP在进化过程中是十分保守的,从果蝇、斑马鱼到哺乳动物中均有其同源蛋白存在。从结构方面来看,ECP在其氨基端带有一个亮氨酸... 汪道涌关键词:果蝇 ECP MINUTE 翻译起始 文献传递 一种带亮氨酸拉链结构域蛋白单克隆抗体的制备及鉴定方法 带亮氨酸拉链结构域蛋白单克隆抗体的制备及鉴定方法,是一种单克隆抗体的制备及鉴定方法,其制备的方法为:根据ecp基因全长cDNA序列设计上、下游两条引物进行PCR扩增;用纯化的ECP-GST融合蛋白免疫6~8周龄Balb/... 谢维 刘加彬 汪道涌 张建琼文献传递 棕色固氮菌nifS敲除菌株的构建 被引量:1 2003年 从Azotobacter vinelandii中通过PCR扩增了5’和3’端分别缺失264bp和261bp的nifS′片段,克隆至载体pUC18,形成重组质粒pUCS,再通过同源重组的方法,将pUCS插入Azoto-bacter vinelandii的nifS中,形成nifS阻断突变体SU1,经Southern杂交和PCR扩增,证明所得确为nifS阻断突变株。SU1在外加氮源的BBGN培养基中能够快速生长,但在Burk's无氮培养基中,生长却极其缓慢,表明nifS基因的破坏,已造成SU1的固氮能力接近完全丧失。该突变体的成功构建,为进一步从中纯化固氮酶两组分,研究nifS对固氮酶结构及功能的影响及iscS与nifS之间的关系奠定了良好的基础。 汪道涌 谢维 毛晓华关键词:AZOTOBACTER 固氮 抗果蝇ECP蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定 被引量:2 2005年 目的: 制备抗果蝇ECP蛋白的单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定.方法: 用大肠杆菌表达并纯化的GST-ECP融合蛋白, 免疫6~8 wk的雌性BALB/c小鼠, 取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合, 经间接ELISA筛选和克隆化培养制备杂交瘤细胞系.用间接ELISA及Western blot等方法对mAb的Ig亚类(型)、腹水效价及特异性进行鉴定.结果: 获得1株杂交瘤细胞株, 命名为8G9.Ig亚类(型)鉴定表明, 此株mAb为IgG1(κ型).腹水mAb的效价为 1∶ 1×105.Western blot分析表明, 该株mAb可与果蝇的幼虫、蛹及成虫组织中表达的ECP特异性结合, 可特异性的识别ECP抗原的231~300aa区段.结论: 获得1株能稳定分泌抗ECP mAb的细胞株, 为进一步研究ECP的功能奠定了基础. 刘加彬 汪道涌 孙明宽 徐敏 刘琍 谢维关键词:黑腹果蝇 ECP 单克隆抗体 抗原表位 基于创新能力培养的研究生“高级生物化学与分子生物学技术”课程体系的构建 被引量:4 2009年 研究生教育是培养高层次人才的主要途径,面对近年来不断扩大的研究生队伍,如何提高培养质量是近年研究生教育工作的重点。研究生的培养质量,主要是看毕业生能否为经济建设、科学进步发展做出应有的贡献。产生这种贡献的大小与研究生具有的创新精神和创新能力密切相关^[1],创新能力是衡量研究生教育质量的重要指标, 袁榴娣 李新荣 汪道涌 丁洁 邓湘蕾 毛晓华关键词:创新能力培养 研究生教育 分子生物学技术 生物化学 教育质量 教育工作 一种粘细菌发育相关基因的分离及敲除分析 2002年 FruB是与粘细菌 (Myxococcusxanthus)发育特异性转录因子FruA具有亲和力的蛋白因子 ,协同FruA参与对靶基因的调控。根据FruB氨基端氨基酸序列 ,设计简并性寡核苷酸引物对染色体DNA进行PCR扩增 ,以扩增产物为探针自粘细菌小型基因文库筛选出同源的4 5kbSacI阳性片段。fruB基因阻断分析表明 ,fruB功能缺失延缓子实体发育并降低粘孢子产率 。 毛晓华 汪道涌 刘芳关键词:粘细菌 发育相关基因 基因克隆 基因敲除 果蝇中Ecp蛋白的表达、纯化与抗体制备 被引量:3 2003年 获得特异性抗Ecp多克隆抗体 ,为进一步研究ecp的功能奠定基础。利用特异引物 ,通过RT PCR扩增出编码Ecp蛋白的全长cDNA ,克隆至谷胱甘肽S转移酶融合蛋白表达载体pGEX 4T 1(His) 6C中 ,转染大肠杆菌DH5α,经诱导表达后 ,利用谷胱甘肽琼脂糖珠从细胞裂解物中特异吸附融合蛋白 ,经凝血酶裂解 ,释放出Ecp蛋白 ,再经Ni NTA亲和层析 ,最终获得高纯度的Ecp蛋白。用纯化的Ecp蛋白免疫新西兰家兔 ,亲和层析纯化抗Ecp抗体。利用该抗体进行的WesternBlot结果表明 :Ecp蛋白在野生型黑腹果蝇胚胎、三龄幼虫神经系统、成虫、成虫头部组织中均有明显表达 。 汪道涌 刘莉 谢维关键词:克隆 抗体制备 黑腹果蝇 果蝇