洪炀
- 作品数:116 被引量:131H指数:5
- 供职机构:中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 小鼠抗日本血吸虫感染的脾早期细胞免疫应答的初步研究被引量:2
- 2017年
- 以日本血吸虫尾蚴攻击感染C57BL/6小鼠,分别于感染后第1、2、3、4、5、7、9、11、13天收集小鼠脾组织,检测分析早期感染阶段小鼠脾中重要炎症因子的表达动态变化,观察脾不同亚群免疫细胞的变化趋势,分析先天免疫分子在血吸虫感染宿主免疫应答进程中的作用。RT-q PCR结果表明,GZMA、GZMB、GZMK等颗粒酶,CCL2、CXCL10、CXCL11等趋化因子,IL-12a、IL-4、IL-6、IL-10等白细胞介素在感染后均不同程度上调表达;流式细胞术结果表明,小鼠感染日本血吸虫后CD3^+CD4^+T细胞和CD3^+CD8^+T细胞比值一直高于未感染对照组;同时NK细胞亚群比例在感染后第5天和7天明显增多。这些免疫相关细胞和分子的变化可能在小鼠抗血吸虫感染中发挥了重要作用。本研究为探究日本血吸虫感染的先天免疫机制等积累了实验数据。
- 张祖航韩宏晓曹晓丹沈元曦韩倩洪炀傅志强林矫矫
- 关键词:日本血吸虫先天免疫免疫分子
- 免疫蛋白质组学及其在病原生物学中的研究进展被引量:2
- 2012年
- 免疫蛋白质组学是蛋白质组学与免疫学相结合而产生的一门新兴的交叉学科。该文介绍了免疫蛋白质组学的研究技术及其在病原生物学中的应用,并对其在诊断抗原及疫苗分子筛选中的应用前景及发展的局限性进行了论述。
- 洪炀傅志强朱传刚陆珂杨健美李浩石耀军苑纯秀林矫矫
- 关键词:病原生物学
- 一种喷鼻装置用可调节双喷头及喷鼻装置
- 本实用新型公开了一种喷鼻装置用宽度可调节双喷头,包括一输出主管和两输出支管,所述输出主管为三通结构,所述输出主管的一端设有进药口,另一端设有两个出药口,两所述输出支管的一端分别与一个出药口进行连接,两所述输出支管的另一端...
- 李浩陆珂石耀军洪炀杨健美林矫矫傅志强徐玉梅杨艺朱传刚
- 文献传递
- 日本血吸虫可溶性虫卵和童虫抗原刺激RAW264.7巨噬细胞的初步分析
- 2017年
- 本文采用不同浓度的日本血吸虫虫卵抗原(SEA)、童虫抗原(SSA)刺激小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,结果显示SEA抗原能明显刺激巨噬细胞增殖分化(SI〉2),且多数巨噬细胞形态发生了改变并出现细胞死亡。实时定量荧光PCR结果显示,在SEA、SSA抗原刺激下,巨噬细胞TNF-α、IL-6、IL,10和CCL2的mRNA表达量都明显高于对照组。结果提示血吸虫抗原对巨噬细胞的刺激作用可能在宿主抗血吸虫感染的先天免疫应答和虫卵肉芽肿形成免疫调节中发挥了一定的作用。
- 沈元曦张祖航韩宏晓傅志强洪炀林矫矫
- 关键词:日本血吸虫巨噬细胞虫卵抗原
- 日本血吸虫促凋亡基因SjBAD的初步研究被引量:1
- 2015年
- 目的了解日本血吸虫促凋亡基因Sj BAD的生物学、免疫学和转录表达特征,评估Sj BAD重组蛋白作为日本血吸虫病疫苗候选分子的潜力。方法根据Sj BAD的参考序列设计引物,应用PCR技术扩增Sj BAD基因,构建重组表达质粒p ET-28a(+)-Sj BAD。采用实时定量PCR检测Sj BAD基因在日本血吸虫不同发育期及42 d雌、雄虫体内的转录水平;应用Western blotting和间接ELISA法分析Sj BAD重组蛋白的抗原性和免疫原性。用重组抗原Sj BAD免疫BALB/c小鼠,通过计算减虫率及肝脏减卵率,评估重组抗原作为血吸虫病候选疫苗分子的潜力。结果成功克隆了日本血吸虫Sj BAD基因,构建了重组表达质粒p ET-28a(+)-Sj BAD,并在大肠杆菌中成功表达,重组蛋白分子量约为22 k Da。Western blotting表明Sj BAD具有较好的抗原性和免疫原性,间接ELISA法检测表明重组蛋白免疫小鼠产生了高水平的特异性抗体Ig G。实时定量PCR检测发现Sj BAD基因在日本血吸虫的各个发育阶段均有转录,以14 d表达量最高,且在雄虫体内的表达量高于雌虫。两次动物免疫试验表明,重组蛋白Sj BAD在BALB/c小鼠体内诱导了30.82%和27.87%的减虫率,及42.52%和45.84%的肝脏虫卵减少率,均显著高于PBS对照组(P均<0.05)。结论成功克隆、表达了日本血吸虫促凋亡相关基因Sj BAD,该基因在日本血吸虫不同发育期虫体内均有表达。纯化的重组Sj BAD蛋白在小鼠体内能诱导产生部分抗血吸虫感染的免疫保护效果。
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- 关键词:日本血吸虫细胞凋亡BAD
- 日本血吸虫PHB1的克隆、表达及其免疫保护效果评估
- 2022年
- 为了探讨日本血吸虫抗增殖蛋白1(SjPHB1)的免疫保护潜力,应用PCR技术扩增SjPHB1基因,克隆至pMD19-T克隆载体,对其进行测序及生物信息学分析;然后构建pET32a(+)-SjPHB1重组表达质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,对重组菌进行鉴定、诱导表达,并纯化重组蛋白;再利用Western blot检测重组蛋白的反应原性;最后以小鼠为动物模型,评估重组蛋白抗日本血吸虫病的免疫保护效果。结果显示:SjPHB1基因ORF序列为825 bp,编码274个氨基酸,具有2个优势辅助T细胞抗原表位和6个优势B细胞抗原表位;rSjPHB1以包涵体的形式表达,分子量约为47 kDa,能被anti-His的小鼠血清、人工感染日本血吸虫的小鼠阳性血清特异性识别,表明获得正确表达;该重组蛋白能被免疫小鼠血清识别,具有良好的反应原性;rSjPHB1刺激小鼠产生了较高水平的特异性IgG抗体,但未诱导产生显著的减虫率和肝脏减卵率。本研究结果为进一步探讨SjPHB1基因的生物学特性提供了基础。
- 张旻杨珊珊张燕周思含黄明月洪炀林矫矫傅志强
- 关键词:日本血吸虫克隆免疫保护效果
- 一种特异性的检测弓形虫的方法
- 本发明公开了一种特异性的检测弓形虫的方法。所述方法包括以下步骤:1、重构弓形虫SAG1和SAG2抗原表位基因序列;2、连接转化目的基因和载体;3、重组质粒的表达纯化;4、表达重组蛋白;5、Western blot检测重组...
- 朱传刚王钊哲许瑞林矫矫陈兆国洪炀陆珂李浩吴思敏李嘉静江嘉欣
- 日本血吸虫感染不同适宜性宿主的比较研究
- 林矫矫洪炀彭金彪蒋韦斌傅志强石耀军刘金明冯新港韩宏晓
- 日本血吸虫TOM34基因的克隆和表达分析
- 背景:线粒体的外膜转运酶通过主动运输的方式将这些线粒体前体蛋白运输到线粒体内,在线粒体前体蛋白进入线粒体的过程中发挥着重要的作用。日本血吸虫线粒体外膜转运酶34基因(SjTOM34)可能对其生长发育具有重要作用。方法:应...
- 洪炀李祥瑞林矫矫李学珍傅志强石耀军陆珂杨健美朱传刚苑纯秀李浩
- 关键词:日本血吸虫基因克隆
- 日本血吸虫精氨酸酶的克隆表达及酶活性分析
- 2013年
- 为解析日本血吸虫精氨酸酶的功能,本研究克隆了SjARG基因、长度为1095 bp,并将该基因克隆一到原核表达载体pET-28a,获得重组质粒pET-28a-SjARG,并在大肠杆菌中成功表达,Western blot显示重组蛋白具有良好的抗原性;通过酶活性分析显示,重组蛋白SjARG在添加Mn2+后活性得到提高,酶活性大小为502 U/mg,Km值为82.7mM。该研究结果为进一步深入研究该基因的表达特性、酶学性质以及候选疫苗分子研究方面提供了基础。
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- 关键词:日本血吸虫精氨酸酶酶活性