游上游
- 作品数:35 被引量:62H指数:5
- 供职机构:武汉市儿童医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金武汉市卫生局临床重点学科研究项目武汉市卫生局资助项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 双向电泳测定血清α_1酸性糖蛋白异质体的改进
- 2004年
- 胡红兵邱艳游上游
- 关键词:血清
- 呼吸道合胞病毒感染SPC-A1相关新基因zlg10con的电子克隆及分析和验证被引量:1
- 2003年
- 通过mRNA差异显示法获得了与呼吸道合胞病毒感染SPC A1细胞相关的 5 2个表达序列标签(EST)片段 ,其中的一个EST片段 g10 1在RSV感染后的细胞中高表达 .采用生物信息学原理和方法对g10 1进行了鉴定后预测这是一个新基因片段 ,经电子克隆获得了 76 1bp的延伸产物 ,并且通过了实验验证 .该基因片段含有一个典型的 5 4个氨基酸的ORF ,命名为zlg10con 。
- 李蕾赵东赤张楚瑜李乐游上游黄静宁
- 关键词:呼吸道合胞病毒SPC-A1细胞电子克隆表达序列标签
- 武汉地区儿童感染的革兰阴性杆菌质粒AmpC酶基因型调查
- 2008年
- 虞涛李长振鲍连生杨劳荣游上游
- 关键词:质粒儿童分子流行病学
- 血清CMV DNA荧光定量PCR方法的建立与初步应用被引量:1
- 2006年
- 吴旗邹俊煊虞涛张楚瑜游上游
- 关键词:巨细胞病毒荧光定量聚合酶链式反应
- 抗AIF单链抗体在大肠杆菌中的可溶性表达和鉴定
- 2006年
- 目的:获得具有生物活性的抗酸性同功铁蛋白(AIF)单链抗体(scFv)。方法:将AIF4c9scFv基因亚克隆于原核表达载体pPOW3,构建重组表达质粒pPOW4c9,电转化大肠杆菌DH5α,以温度诱导重组抗AIFscFv表达,经镍螯合层析柱纯化后,用ELISA和Westernblot检测表达蛋白与AIF的结合特性。结果:抗AIFscFv抗体在大肠杆菌中获得可溶性表达,亲和力常数KD为3.18×10-8mol/L;纯化后的可溶性AIFscFv含量约为1.6mg/L。重组蛋白能特异识别AIF,并且具有良好的抗体生物学活性。结论:在大肠杆菌中表达并纯化了特异性可溶性抗AIFscFv抗体。
- 艾洪武郭军庆游上游
- 关键词:单链抗体可溶性表达
- 抗酸性同功铁蛋白重组免疫细胞因子的制备及其特性研究
- 2005年
- 目的构建并表达抗酸性同功铁蛋白(acidicisoferritin,AIF)的免疫细胞因子,并研究其抗肿瘤特性。方法在克隆小鼠趋化因子CXCL10全长基因的基础上,构建抗AIF单链抗体与CXCL10组成的重组免疫细胞因子,并在小鼠骨髓瘤细胞NSO中进行表达;使用流式细胞技术(FCM)和体外细胞趋化试验等方法来研究该重组蛋白的抗肿瘤特性。结果重组免疫细胞因子(IP10scFv)真核表达产物的相对分子质量(Mr)约为41.1×103,纯化后的蛋白浓度为68mgL,抗体亲和常数(KDIP10scFv)为2.28×10-8molL。IP10scFv能够特异识别分泌AIF的SMMC7721细胞,并能与激活后的小鼠T淋巴细胞表面CXCR3受体特异性结合,对小鼠激活的T淋巴细胞有较强的趋化作用。结论成功地制备了抗AIF单链抗体与趋化因子CXCL10构成的重组免疫细胞因子,该免疫细胞因子是肿瘤治疗的潜在制剂。
- 游上游郭军庆艾洪武陈柳
- 关键词:免疫细胞因子肿瘤重组蛋白小鼠骨髓瘤细胞SMMC7721细胞抗肿瘤特性T淋巴细胞
- 酸性同功铁蛋白单克隆抗体免疫学特性的研究
- 1999年
- 目的:探讨抗不同组织酸性同功铁蛋白(AIF)单克隆抗体(McAb)的免疫学特性。方法:应用聚焦层析技术分别从人胎盘和原发性肝癌组织中分离出低pI值的AIF,常规制备McAb和进行免疫组织化学测定。结果:共筛选到5株抗人胎盘AIF和2株抗人原发性肝癌(PHC)AIF的McAb,即2f8、4g7、4g8、5c3、7a9和4c9、4e2。抗AIFMcAbs均与各自AIF分子上不同抗原决定簇结合,其中针对不同组织AIF的McAb5c3和4e2作用于同一抗原决定簇。使用McAb2f8和4c9,对正常肝组织、慢性肝炎与肝硬化和PHC肝组织进行了免疫组织化学检查,其阳性率分别为2f8:0、10.0%、76.3%;4c9:0.6.7%、81.6%。结论:人胎盘和PHC组织AIF中存在着共同的抗原决定簇,抗PHCAIFMcAb在免疫诊断中优于抗人胎盘AIFMcAb。
- 游上游张楚瑜黄巍易先平
- 关键词:单克隆抗体免疫组织化学
- 湖北地区住院儿童产超广谱β内酰胺酶基因型与相耐药性分析
- 虞涛游上游杨劳荣罗德娟鲍连生刘秀珍尉庭华邱艳胡红兵
- 为了解该地区住院患儿分离产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的感染情况和流行病学特征,课题组对该院2004年5月-2005年5月临床分离的120株产ESBLs大肠埃希菌和克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因亚型进行了分析研究...
- 关键词:
- 关键词:医院感染基因型耐药性儿童传染病
- NK细胞对T细胞向腺病毒感染的小鼠肝脏聚集作用的影响
- 游上游艾洪武虞涛张家云尉庭华徐腊香何文军刘秀珍刘海峰陈莎吴旗
- 该课题使用尾静脉注射复制缺损型腺病毒感染的小鼠模型,同时,应用抗NK1.1+单克隆抗体来剔除小鼠体内的NK细胞,使用FACS分析腺病毒感染的小鼠模型中肝脏的浸润淋巴细胞,应用RT-PCR检测小鼠肝组织、肝浸润淋巴细胞和脾...
- 关键词:
- 关键词:动物实验腺病毒感染基因表达
- 武汉市儿童医院临床分离大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌中产质粒介导AmpC酶和ESBLs的研究被引量:5
- 2008年
- 目的研究武汉市儿童医院临床分离高产质粒AmpC酶和超超广谱β内酰胺酶(SSBL)肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌的分子流行病学特征。方法收集我院2005年8月—2006年8月住院患儿临床分离的头孢西丁中介或耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌161株。采用三维试验检测AmpC酶,表型确认试验检测ESBLs,质粒转化试验定位耐药基因;采用PCR技术扩增质粒AmpC与CTX-M基因;使用限制性片段长度多态性(RFLP)技术确定CTX-M基因簇的特征;利用基因测序确定AmpC酶及CTX-M的基因亚型。结果DHA-1型和ACT-1型为主要的质粒AmpC酶基因型,发现1种新的ACT型质粒AmpC酶,其与ACT-1的同源性仅为84%。CTX-M-14型和CTX-M-3型为主要的ESBLs基因型。最常见的大肠埃希菌SSBL基因组合为CTX-M-14+DHA-1+ACT-1型,肺炎克雷伯菌的为CTX-M-3+DHA-1+ACT-1。结论我院临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中,产SSBL菌株所占比例显著高于单产质粒AmpC酶菌株;CTX-M-14/CTX-M-3+DHA-1+ACT-1是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中最常见的SSBL基因型。
- 虞涛李长振鲍连生杨劳荣游上游
- 关键词:超广谱Β内酰胺酶儿童