王以光
- 作品数：180 被引量：511H指数：13
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程轻工技术与工程更多>>
- 利用强启动功能片段提高麦迪霉素4"-羟基丙酰化酶基因的表达被引量：6
- 1996年
- 利用PCR技术将本室克隆到的强启动功能片段取代麦迪霉素丙酰化酶基因(mpt)的启动子或与mpt基因自身启动子串连,获得含mPt重组质粒pCHFPE3和pCHFPE2。用含有这两个质粒的Streptomyces lividans TK24对螺旋霉素进行微生物转化,结果表明,与含有原启动子的mpt.S.lividans TK24(p.WFPE)相比,丙酰螺旋霉素的组分比例分别提高了89.02％和58.53％。含重组质粒pCHFPE2的螺旋霉素产生菌S.spiramyceticus发酵产物中丙酰螺旋霉素的组分也有较大辐度的提高。说明利用该强启动功能片段可以提高麦迪霉素丙酰化酶基因的表达。
- 顾海东王以光徐小敏魏贤英冯明华
- 关键词：启动子麦迪霉素基因表达
- 利用3－氨基－5－羟基苯甲酸(AHBA)合酶基因保守序列筛选安莎类化合物的方法
- 本发明涉及一种利用参与微生物产物生物合成酶编码基因保守序列从微生物中鉴定寻找新的活性物质的方法，具体来讲，就是利用分子生物学手段，根据安莎类化合物特异结构的AHBA生物合成基因保守序列，克隆相关基因，并以此为探针，获得安...
- 王以光高群杰
- 文献传递
- 新型纤溶酶CGW－3及其制备方法
- 本发明涉及从一株土壤链霉菌C3662的发酵液中分离纯化得到具有纤溶活性并能激活纤溶酶原的蛋白酶CGW－3,其分子量为29KDa,等电点为8.5以上,是一种丝氨酸蛋白酶,其N端15个氨基酸的序列为VVGGTRAAQGEFP...
- 王以光武临专陈昉龚勇
- 文献传递
- 基因工程技术在大环内酯类抗生素研究中的应用被引量：9
- 1997年
- 基因工程技术在大环内酯类抗生素研究中的应用大致分两个方面,一方面是对大环内酯类抗生素生物合成在基因水平的研究,使人们已从基因结构和组成方面深入了解其生物合成机制;另一方面基于上述研究基础,人们已经可能有目的地进行基因遗传操作,改造这类抗生素的结构,产生新的大环内酯类抗生素。本文将就以上两方面内容作一综述。 大环内酯类抗生素的结构从生物合成的角度,是指一组由聚酮体衍生而来的骨架组成的环状内酯环,经常有一或二个糖苷与之相连,最常见的有红霉素、螺旋霉素、麦迪霉素和泰洛星等。另外,如两性霉素B、杀念珠菌素、FK-506、雷帕霉素、阿弗菌素等也应属于这一类化合物。部分大环内酯类抗生素结构见图1。 大环内酯类抗生素生物合成途径大致相似,即先由低级脂肪酸经聚酮合成酶缩合形成大环,再连上糖苷。
- 王以光
- 关键词：抗生素大环内酯类基因工程
- 生技霉素稳定型基因工程菌的构建
- 利用温敏型质粒载体,运用同源重组技术将异戊酰基转移酶基因整合至螺旋霉素产生菌Streptomyces.spiramyceticus F21的染色体上,构建了稳定的生技霉素基因工程菌WSJ-1.将WSJ-1在不加压的情况下...
- 尚广东王以光戴剑漉
- 关键词：同源重组基因工程菌
- 文献传递
- 高效液相色谱质谱法测定格尔德霉素基因阻断变株产物被引量：1
- 2008年
- 目的:在研究格尔德霉素(GDM)生物合成的过程中利用基因阻断技术分别阻断 GDM 生物合成的起始基因3-氨基-5-羟基苯甲酸(AHBA)基因、含 AHBA 基因并与之相连的聚酮合酶(PKS)基因簇以及 GDM 生物合成相关的 PKS 和 PKS 后修饰基因簇 CT-PKS 获得3个 GDM 基因阻断变株。为了比较分析他们的次级代谢产物,采用高效液相色谱质谱法测定发酵液组分。方法:发酵液经过乙酸乙酯提取后用反相高效液相色谱分析。分析柱为迪马公司 Diamonsil^(TM)(钻石)C_(18)(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相是40%～100%甲醇,30 min 梯度洗脱;流速1 mL·min^(-1);二极管阵列检测器(DAD),检测波长304nm。利用电喷雾质谱(ESI)通过正负离子扫描获得相应化合物的相对分子质量信息;利用质谱的源内裂解技术获得相应化合物的结构信息。结果:检测发现,阻断2个不同的 GDM 生物合成基因以后主要产生2个不同于 GDM 的化合物。结论:该方法可快速、准确地对基因工程变株发酵新产物进行早期鉴别,指引后续的化学分离,并用于其他 GDM 基因阻断变株产物的定性。
- 李京艳赫卫清孙桂芝王以光
- 关键词：发酵产物高效液相色谱电喷雾质谱
- C-19位修饰的格尔德霉素衍生物及其制备方法
- 本发明涉及利用自发反应获得一组C-19位修饰的格尔德霉素衍生物及其制备方法，所述衍生物是采用适当的溶剂如醇类、缓冲液等将GDM与含巯基的化合物在室温避光或有氧及加氧条件下反应所得产物，通过抗肿瘤活性、细胞毒性以及水溶性测...
- 赫卫清林灵王以光倪四阳
- 文献传递
- 一种抗心肌肥大药物筛选模型及其构建和应用
- 本发明涉及以MR-1为靶标的抗心肌肥大药物筛选模型及其构建和应用，所说模型中，在大鼠心肌细胞中Ang II可诱导MR-1启动子-报告基因反应性表达上调，进而通过测定待筛化合物抑制报告基因表达的程度来评价化合物抗心肌肥大的...
- 王真王以光陈金晶孔维佳蒋建东司书毅何琪扬
- 一种产生纤溶酶的链霉菌C-3662的鉴定及发酵研究被引量：19
- 2002年
- 对一株从土壤中分离的纤溶酶产生菌链霉菌C - 3 6 6 2的形态、培养、生理生化和化学分类特征进行了研究 ,发现其与泛温链霉菌 (StreptomyceseurythermusCorbazetal.1 96 8)的特征很相符。通过对链霉菌C - 3 6 6 2的 1 6SrDNA序列进行测定与比对 ,发现它与泛温链霉菌的1 6SrDNA序列也有高达 98 1 9%的同源性。根据多相分类原则 ,认为链霉菌C - 3 6 6 2属于泛温链霉菌。对链霉菌C - 3 6 6 2的发酵培养基组成等的研究表明 ,合适的发酵培养基中应含有氮源黄豆饼粉 2 0 %、碳源淀粉 1 0 %和葡萄糖 2 5 %以及少量的无机盐类如硫酸镁。链霉菌C 3 6 6 2的发酵过程研究表明 。
- 武临专陈昉王以光黄英刘志恒
- 关键词：纤溶酶发酵
- 利用珍贵橙色束丝放线菌ATCC31565氨甲酰基化4,5-双氢-7-去氨甲酰基格尔德霉素被引量：1
- 2011年
- 格尔德霉素（geldanamycin，GDM）和安丝菌素（ansamitocin，ASM）分别是由吸水链霉菌（如streptomyces hygroscopicus17997）和珍贵橙色束丝放线菌（如actinosynnema pretiosum ATCC31565）产生的具有抗肿瘤活性的安莎类抗生素.
- 刘昕李书芬牛沂菲贾长虹武临专王以光
- 关键词：格尔德霉素放线菌酰基化甲酰基吸水链霉菌抗肿瘤活性
