王会智
- 作品数：7 被引量：27H指数：4
- 供职机构：郑州大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 旋毛虫病的流行病学、临床学、血清学及分子生物学研究被引量：2
- 2002年
- 崔晶王中全张荣光安敬军赵国强丁南王会智
- 关键词：旋毛虫病流行病学血清学临床学分子生物学
- 旋毛虫成囊前期幼虫抗原结构基因TspE1的克隆与表达被引量：12
- 2002年
- 目的 克隆和表达旋毛虫河南地理株成囊前期幼虫编码 3 1kDa抗原的结构基因 (TspE1)。 方法 大鼠感染旋毛虫后第 17天收集成囊前期幼虫 ,提取虫体的总RNA。通过RT PCR特异性扩增目的基因 ,构建重组质粒pUC18 Ts HN3 ,将重组质粒 pUC18 Ts HN3中的目的基因亚克隆入原核表达载体pGEMEX 1,构建重组子 pGEMEX 1 Ts HN3 ,经IPTG诱导 ,在E .coliJM 10 9(DE3 )中表达。对表达产物进行SDS PAGE分析和Westernblotting鉴定。 结果 SDS PAGE显示目的基因在大肠杆菌中获得高效表达 ,重组蛋白的分子量为 3 1kDa ,以诱导 4h时表达量最多。薄层凝胶光密度扫描分析结果显示 ,表达的融合蛋白量约占细菌总蛋白的 2 6%。Westernblotting证实 ,融合蛋白条带能被感染旋毛虫的大鼠血清及旋毛虫病患者血清识别。 结论 旋毛虫河南地理株成囊前期幼虫抗原结构基因TspE1克隆和原核表达成功。
- 崔晶王中全王会智赵国强张红卫
- 关键词：旋毛虫成囊前期幼虫分子克隆旋毛虫病
- 旋毛虫成囊前期幼虫31kDa结构基因的分子克隆及表达
- 旋毛虫病是一种严重的人兽共患寄生虫病.作者于1999-2001年以旋毛虫成囊前期幼虫为实验材料、以31kDa结构基因为研究对象进行了旋毛虫基因重组抗原的制备及其特性的初步研究.为了研制出能够于用旋毛虫病早期免疫学诊断且具...
- 王会智
- 关键词：旋毛虫成囊前期幼虫克隆表达
- 文献传递
- 旋毛虫病的流行病学、临床学、血清学及分子生物学研究
- 崔晶王中全张荣光安敬军赵国强丁南王会智王宪生
- 该项目属医学领域，对旋毛虫病的流行病学、临床学、血清学及分子生物学进行了系列研究。通过对该省2441名居民的血清流行病学调查和503例患者的临床学研究，揭示了一些前人尚未述及的旋毛虫病的流行病学特点和临床特征，表明本病在...
- 关键词：
- 关键词：旋毛虫病血清学检测分子生物学诊断
- 旋毛虫成囊前期幼虫编码31kDa抗原基因的分子克隆及序列分析被引量：6
- 2002年
- 目的 克隆旋毛虫河南株成囊前期幼虫编码 31kDa抗原基因 (TspE1)片段 ,并测定其基因序列 ,以了解该基因序列与已报道虫株的差异。方法 根据TspE1基因已知序列设计合成一对引物 ,采用RT -PCR技术获取旋毛虫成囊前期幼虫目的基因 ,PCR产物经纯化后用BamHⅠ、HindⅢ进行双酶切 ,定向克隆入pC18质粒 ,转化大肠杆菌JM10 9;重组质粒用BamHⅠ +HindⅢ酶切及PCR扩增鉴定。用Sanger双脱氧链终止法进行DNA序列测定 ,应用DNASIS软件进行同源性比较及预测抗原表位。结果 RT -PCR扩增获得成囊前期幼虫TspE1基因 (约 870bp) ,EcoRⅠ酶切鉴定正确 ;筛选出 7个阳性克隆 ,对目的基因的测序结果显示有 5种类型 ,但都与GenBank中的TspE1基因序列及由其推测的氨基酸序列有较高同源性 ,尤其是Ts HN3核苷酸及氨基酸序列同源性分别达 99 6 %和 98 9% ;TspE1基因中可能存在 7个抗原表位。 结论 应用RT -PCR技术扩增出旋毛虫河南株成囊前期幼虫编码 31kDa抗原结构基因 ,证实TspE1基因在成囊前期幼虫已有表达 ;
- 崔晶赵国强王会智张红卫王中全
- 关键词：旋毛虫成囊前期幼虫反转录-聚合酶链式反应DNA序列测定
- 基因重组抗原在旋毛虫病免疫诊断及免疫预防方面的研究被引量：7
- 2002年
- 王会智王中全崔晶
- 关键词：免疫学旋毛虫病
- 旋毛虫河南株TspE1基因克隆及多态性分析被引量：7
- 2002年
- 目的:构建旋毛虫河南株成囊前期幼虫编码相对分子质量为31 000的蛋白抗原结构基因(TspE1)的重组质粒(pUC18－TspE1),测定TspE1基因序列,分析旋毛虫河南株的基因多态性。方法:根据TspE1基因已知序列设计合成一对引物,采用RT-PCR技术获取旋毛虫成囊前期幼虫目的基因,PCR产物经纯化后用BamHI、HindⅢ进行双酶切,定向克隆人 pUC18质粒,转化大肠杆菌JM109;重组质粒用 BamHI+HindⅢ 酶切及 PCR扩增鉴定。用 Sanger双脱氧链终止法进行 DNA序列测定,应用 DNASIS软件进行同源性比较。结果:RT－PCR扩增获得成囊前期幼虫TspE1基因(871 bp),EcoR I 酶切鉴定正确;筛选出 7个阳性克隆,对目的基因的测序结果显示旋毛虫河南株TspE1基因有5种类型,但都与GenBank中的TspE1基因序列及由其推测的氨基酸序列不完全相同。结论:应用RT－PCR技术扩增出旋毛虫河南株成囊前期幼虫编码相对分子质量为31 000的抗原结构基因．证实TspE1基因在成囊前期幼虫已有表达,结果还提示旋毛虫河南株可能存在有基因多态性。
- 崔晶王中全王会智张荣光赵国强
- 关键词：旋毛虫成囊前期幼虫反转录-聚合酶链反应DNA序列测定遗传多态性
