矫健
- 作品数：39 被引量：65H指数：4
- 供职机构：首都医科大学附属北京同仁医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 人鼻腔纤毛上皮细胞的浸没培养被引量：2
- 2014年
- 目的：浸没培养法培养人鼻腔纤毛上皮细胞，为纤毛相关研究及经鼻药物安全性评价等研究提供可靠的细胞学模型。方法：采用低温酶消化法，浸没培养人鼻腔纤毛上皮细胞，倒置相差显微镜观察细胞生长状况，扫描电镜及免疫细胞化学方法观察细胞融合及纤毛分化状态，高速数字化显微视频成像系统检测纤毛摆动频率。结果：①相差显微镜下，纤毛细胞数量逐渐增加，至7～10d达到高峰后逐渐减少，纤毛细胞存活时间维持在14～21d；②细胞培养第7天，扫描电镜可见鼻腔上皮细胞表面覆盖纤毛或微绒毛，杯状细胞及无纤毛柱状上皮细胞相间排列；③细胞培养第7天，Ⅳ型β-微管蛋白、闭合小环蛋白-1免疫荧光结果显示细胞融合及纤毛分化良好，纤毛细胞比例可达20％～30％；④培养第7、14、21天纤毛摆动基础频率分别为（10．73±2．15）Hz、（9．92±1．97）Hz、（10．30±2．11）Hz，无明显统计学差异；⑤外源性刺激剂100μmol／L ATP可明显增加纤毛摆动频率。结论：应用酶消化法浸没培养人鼻腔纤毛上皮细胞，细胞融合及纤毛分化状态良好，纤毛摆动活跃，对外源性刺激反应灵敏，是应用于纤毛相关研究及经鼻药物安全性评价等研究的一个较为理想的细胞模型。
- 矫健孟娜张罗
- 关键词：鼻腔纤毛上皮细胞细胞培养
- 转化生长因子-β1对慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉上皮紧密连接屏障功能的影响被引量：5
- 2018年
- 目的本研究旨在探讨中国汉族人群中慢性鼻窦炎伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSw NP)患者鼻腔上皮紧密连接(tight junction,TJ)屏障功能的改变以及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对其调控作用。方法气液界面方法体外培养鼻息肉患者及健康对照鼻腔上皮细胞,待细胞分化完成后加入不同浓度的TGF-β1刺激上皮细胞72 h,检测上皮细胞跨膜阻力(transepithelial resistance,TER)及细胞间荧光素通透性的变化,评价上皮细胞屏障功能的改变;此外,分别应用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和免疫荧光技术检测紧密连接相关基因mRNA及蛋白表达的改变。结果与健康对照上皮相比,鼻息肉来源的上皮细胞TER明显降低,上皮细胞对荧光素FITC-葡聚糖(FITC-Dextran)的通透性增加,10 ng/m L TGF-β1刺激可明显降低两种上皮细胞的TER,同时增加荧光素通透性。细胞紧密连接蛋白occludin及zonula occludens(ZO)-1免疫荧光结果显示,健康对照上皮细胞间紧密连接蛋白呈现连续的线性结构,而鼻息肉上皮紧密连接蛋白表达模式呈现明显破坏,包括紧密连接线性结构分离、断裂等,而经10 ng/m L TGF-β1刺激后,无论健康对照还是鼻息肉来源的上皮细胞间紧密连接蛋白表达模式均有明显破坏。结论中国汉族鼻息肉患者的鼻腔上皮紧密连接屏障功能有明显的缺陷,而TGF-β1在诱发鼻息肉上皮屏障功能缺陷中发挥了重要的调控作用,或可作为鼻息肉治疗潜在的靶位点。
- 矫健张罗
- 关键词：鼻息肉转化生长因子-Β1
- 白细胞介素13抑制人鼻腔上皮纤毛细胞分化的研究被引量：3
- 2015年
- 目的在原代培养的人鼻腔黏膜上皮细胞模型上,探索白细胞介素13(interleukin-13,IL-13)对黏液纤毛系统的影响及调控纤毛细胞分化的分子机制。方法体外分离培养人鼻腔黏膜上皮细胞,用IL-13处理后,western blot检测纤毛标志蛋白β-tubulinⅣ的表达;ELISA检测杯状细胞标志分泌蛋白MUC5AC的表达;单细胞涂片结合免疫组化方法检测纤毛细胞及杯状细胞的数量;realtime PCR检测纤毛细胞分化关键基因的表达。结果与对照组相比,IL-13处理14 d后,纤毛细胞比例明显减少、β-tubulinⅣ的表达显著降低,并且杯状细胞数量及黏蛋白的分泌增加;IL-13处理后显著降低了纤毛细胞分化相关转录因子FOXJ1、RFX2、RFX3及基体合成过程调控基因CCNO、CETN2的表达水平。结论 IL-13显著抑制人鼻腔黏膜上皮纤毛细胞的分化,其机制可能是通过抑制纤毛细胞分化过程的关键转录因子和调控基体合成相关基因而实现的。
- 王明矫健张罗
- 关键词：白细胞介素13上皮纤毛转录因子
- IL-13调控MiR-21参与人鼻腔黏膜上皮细胞黏液纤毛分化
- 目的 探索IL-13对人鼻腔黏膜上皮细胞黏液纤毛分化的作用及其调控的miRNA通路.方法 体外分离、原代培养正常人及鼻息肉患者鼻腔黏膜上皮细胞,IL-13刺激后,分别利用Real-time PCR检测黏液细胞、纤毛细胞标...
- 王明矫健张罗
- 变应性鼻炎患者血清氧化应激状态研究被引量：7
- 2010年
- 目的 检测变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）患者外周血血清中氧化应激标志物,探讨氧化应激反应在AR发病机制中的作用.方法 留取23例健康人、48例AR患者外周血血清,分别检测氧化应激标志物一氧化氮（nitric oxide,NO）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）、总一氧化氮合酶（total nitric oxide synthase,TNOS）,脂质过氧化产物丙二醛（malondidehyde,MDA）,以及体内主要抗氧化酶超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）水平.采用SPSS 13.0软件对数据进行分析.结果 AR患者血清NO水平（（x）±s,以下同）为[（97.92±73.42）μmol/L]较健康对照组[（64.04±29.54）μmol/L]明显升高（t=-0.281,P〈0.05）;iNOS与TNOS比值（0.51±0.11）较健康对照组（0.45±0.15）明显升高（t=-2.061,P〈0.05）;血清GSH-Px活性[（258.24±45.25）U/（ml·min）]较健康对照组[（215.11±47.62）U/（ml·min）]明显升高（t=-2.2349,P〈0.05））.而AR患者血清SOD活性、MDA含量较健康对照组分别有升高和降低趋势,但差异无统计学意义（Z=-1.656,t=1.922,P值均〉0.05）.结论 氧化应激反应参与AR病理生理过程,而iNOS-NO通路在AR的发病过程中可能发挥着更为重要的作用.
- 矫健张伟孟娜王鸿张罗
- 关键词：氧化性应激超氧化物歧化酶鼻炎变应性一氧化氮一氧化氮合酶
- 在耳鼻咽喉科学教学中如何提高研究生科研能力的思考
- 2016年
- 近年来,科研与临床并重的教学理念已经逐渐被国内各大教学型医院接受并推广,在耳鼻咽喉科学研究生教学中探讨科研与临床并重的教学培养模式,让学生在临床学习中培养科研思维,提升科研能力,既可以提高教学质量,又可以提升学生的学习能动性,并促进专业技能的提高,为培养具有国际竞争力的医学创新型人才打下坚实基础。
- 矫健刘博张罗
- 关键词：耳鼻咽喉科学
- NOS2基因单核苷酸多态性与过敏性鼻炎相关性研究
- 矫健张罗
- 实验室技术人员工时定额管理初探被引量：1
- 2018年
- 目的探讨操作工时在实验室技术人员管理中的应用。方法采用类推比较法制定操作工时，量化考核实验室技术人员。结果考核结果作为绩效奖励、聘任晋级之依据。结论量化考核有利于调动广大实验室技术人员的积极性和创造性，提高科研水平，推动实验室建设。
- 吴媛媛矫健刘博张罗
- 关键词：医院管理行政管理人员标准工时定额管理
- 2型细胞因子白细胞介素4和白细胞介素13对慢性鼻窦炎伴鼻息肉中鼻黏膜上皮细胞自噬的影响
- 2022年
- 目的 探究2型细胞因子白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)和IL-13对慢性鼻窦炎伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSwNP)中鼻黏膜上皮细胞自噬的影响。方法 收集16例CRSwNP息肉组织(其中嗜酸细胞型和非嗜酸细胞型鼻息肉组织各8例)和8例对照黏膜组织。Western blot检测自噬标志蛋白——人微管相关蛋白1A/1B轻链3B(LC3B)的表达,免疫组化染色检测LC3B的表达和分布,免疫荧光染色实验检测LC3B的点状分布。结果 与对照黏膜组织相比,LC3BⅡ的表达在CRSwNP的息肉组织中增加,并且LC3B在嗜酸细胞型鼻息肉上皮层分布最多。IL-4和IL-13可诱导鼻黏膜上皮细胞中LC3BⅡ的表达和促进LC3B的点状分布。结论 与对照黏膜和非嗜酸细胞型鼻息肉组织相比,嗜酸细胞型鼻息肉组织上皮细胞中自噬体数量显著增加。IL-4和IL-13可有效诱导鼻黏膜上皮细胞自噬体增加。本研究为寻找以自噬为靶点的CRSwNP治疗新方法提供理论依据。
- 赵妍王月矫健王向东张罗
- 关键词：鼻窦炎鼻息肉自噬上皮细胞细胞因子类鼻黏膜
- 以慢性鼻窦炎内在型为导向的临床治疗选择被引量：1
- 2023年
- 慢性鼻窦炎(chronic rhinosinusitis,CRS)是累及鼻窦黏膜超过12周的炎性疾病,根据临床表型是否合并鼻息肉(nasalpolyp,NP),可以分为CRSwNP和CRSsNP2种。临床发现,相似临床表型患者的疾病预后和生活质量改善存在明显差异。炎症细胞浸润和免疫炎症介质是CRS内型驱动的重要因素,其中,尤以嗜酸性粒细胞浸润的2型CRS的疾病严重程度、并发症、治疗高复发率和较低生活质量成为CRS治疗的难点。以CRS内型为导向的治疗方法可能更有助于患者的预后和生活质量的提高。本文总结目前CRS内型研究的进展和以内型为导向的治疗选择展开综述。
- 司马宇彤赵妍矫健王向东张罗
- 关键词：慢性鼻窦炎嗜酸性粒细胞生物制剂
