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蔡家利: 作品数：140 被引量：420H指数：10; 供职机构：重庆理工大学更多>>; 发文基金：重庆市科技攻关计划重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>

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四种猪呼吸道疾病综合征病原多重PCR检测方法的建立及应用被引量：6: 2015年; 为建立同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、胸膜肺炎放线杆菌(APP)和猪肺炎支原体(M.hyo)的多重PCR方法,分别针对PRRSV的ORF1a基因、PCV2的ORF2基因、APP的OMLA基因和M.hyo的P46基因的保守区域设计4对特异性引物,优化反应体系及条件,建立了可同时扩增PRRSV(225bp)、PCV2(337bp)、APP(107bp)、M.hyo(176bp)相应基因的四重PCR方法。结果显示,该方法能单管同时特异地鉴别检测PRRSV、PCV2、APP、M.hyo 4种病原体,对猪瘟病毒、副猪嗜血杆菌、猪呼吸道冠状病毒、猪流感病毒、猪细环病毒及猪细小病毒等无特异性扩增,说明该PCR具有良好的特异性;方法的灵敏度分别为195、272、241、321pg/μL。应用该方法对重庆市的61份样品进行检测,其中PRRSV、PCV2、APP、M.hyo的阳性率分别为22.9%(14/61)、18.0%(11/61)、8.2%(5/61)和18.0%(11/61)。该方法的建立为临床上4个病原的快速鉴别诊断提供了有力的技术手段。; 陈玉燕杨俊聂福平王昱张姜琳秦敏肖进文王国民李应国蔡家利; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪圆环病毒2型胸膜肺炎放线杆菌猪肺炎支原体

抗HPV16E6全蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1: 2017年; 为了制备特异性识别HPV16E6蛋白的单克隆抗体,为建立HPV早期诊断试剂盒提供有效试剂,通过细胞融合、间接ELISA方法筛选阳性克隆、多次亚克隆得到稳定分泌抗体的单克隆杂交瘤细胞株,体内诱生法大量制备腹水,过UNOsphere SuPrA^(TM)柱和ENrich^(TM)SEC650分子筛柱纯化,通过蛋白电泳鉴定其纯度并测定抗体浓度,并采用Western Blot法和间接免疫荧光法验证纯化后HPV16E6抗体与HPV16型阳性Caski细胞和HPV18型阳性Hela细胞特异性结合。建立了亚型为IgG2a的单克隆HPV16E6-4D4杂交瘤细胞株,两步纯化后得到纯度较高的抗体,可特异性识别HPV16型阳性的Caski细胞中的E6蛋白,不与Hela细胞反应,为在蛋白水平上检测HPV16型病毒提供了新手段。; 顾盼胡仁建王玲玲周康森吴胜昔蔡家利; 关键词：单克隆抗体蛋白免疫印迹间接免疫荧光法

大细胞肺癌免疫组化检测方法的优化被引量：1: 2014年; 优化了一种大细胞肺癌免疫组化的检测方法,从抗原修复、过氧化物酶祛除剂、封闭液、一抗、二抗、染色剂几个方面进行了优化。结果表明,优化方法较传统方法具有更高的敏感性和特异性,操作简单,无需特殊仪器设备和较高的专业技能,耗时短,费用低,具有简单易行的特点。; 张趁华蔡家利; 关键词：大细胞肺癌免疫组化

应用Dot-ELISA检测肉品中沙门氏菌被引量：16: 1991年; (一)材料与方法1.载体:硝酸纤维素膜(2×8cm),浙江黄岩四青生化材料厂产品。2.沙门氏菌多价抗血清:成都生物制品研究所产品,重庆肉联厂提供。3.参考菌株:沙门氏菌(A～F群),重庆肉联厂提供;金色葡萄球菌(1800株)。; 蔡家利王诗德顾金泉张益; 关键词：沙门氏菌 DOT-ELISA

抗人大细胞肺癌单抗用于肺癌检测的价值研究被引量：1: 2015年; 为探讨抗人大细胞肺癌单克隆抗体在临床免疫组化检测中的应用,制备了抗人大细胞肺癌单克隆抗体,纯化后鉴定其纯度,并应用于临床免疫组化检测大细胞肺癌。结果显示,采用辛酸-硫酸铵法纯化小鼠腹水中的单抗效果较好。免疫组化结果表明,制备的抗人大细胞肺癌单抗可特异性地鉴别人大细胞肺癌。其可广泛应用于临床免疫组化检测中,为肺癌的早期诊断提供较可靠的辅助指标。; 张趁华蔡家利; 关键词：肺癌单克隆抗体免疫组化

鸭传染性浆膜炎的研究历史及现状被引量：16: 2001年; 鸭传染性浆膜炎已日益困扰着中国的养鸭业。本文追溯了国内外对其的研究历史并结合研究现状 ,对此病的各方面特征进行了较为详细地评述。; 苏小运蔡家利; 关键词：传染性浆膜炎血清型流行病学病理变化防制

猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白的原核表达及单克隆抗体制备被引量：1: 2013年; 目的获得原核表达的PRRSV N蛋白,并制备N蛋白的单克隆抗体。方法将已构建的含有PRRSV N蛋白基因的重组表达载体阳性菌,在37℃条件下,用终浓度1 mmol/L的IPTG诱导表达4 h。经SDS-PAGE分析,表明N基因在大肠杆菌中得到了高效表达。经镍柱亲和层析纯化,以此蛋白作为抗原采用长程免疫法免疫Balb/c小鼠,取4次免疫后的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞用PEG-1500进行细胞融合。结果获得了纯度较高、免疫学活性较好的N蛋白,细胞融合率为81.3%。建立间接ELISA,用于检测杂交瘤细胞上清中的单克隆抗体。初检阳性率为17.3%,经2次亚克隆反复筛选获得了2株分泌抗PRRSV单抗的杂交瘤细胞株,命名为4G10和2F9。ELISA证实所获得的单抗是特异性针对PRRSV共同的抗原表位,4G10和2F9经反复冻存、复苏及多次传代,仍能分泌高效价抗体。结论成功制备出高效价的抗PRRSV N蛋白的单克隆抗体,为建立一种快速、特异的PRRSV检测方法奠定了基础。; 吴胜昔邵烈刚曾政陈晶刘人菊袁丽萍熊仲良蔡家利; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白单克隆抗体

猪繁殖和呼吸综合征病毒分离与鉴定被引量：37: 1997年; 在对国内某地区７个患病猪群流行病学调查的基础上，用Ｍａｒｃ１４５细胞培养从４个猪群流产胎儿分离到３株导致细胞病变的病毒———Ｊ１、Ｊ２和Ｊ３株。它们对氯仿和热（５６℃，１ｈ）、甲醛、酸、碱均敏感。病毒粒子呈球状，直径３０～８０ｎｍ，负染后病毒粒子大小８０～１００ｎｍ，在Ｍａｒｃ１４５细胞质内增殖，５溴２′脱氧尿核苷（ＢＵＤＲ）对其无抑制作用。结合血清学试验，鉴定３个毒株均为猪繁殖和呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ），可能为美洲型ＰＲＲＳＶ。; 姜平简中友马志永蔡家利蔡宝祥; 关键词：猪病 PRRS

一组动物源性阳离子抗菌肽及其应用: 本发明提供一组新型人工设计动物源性型阳离子抗菌肽，是对天然牛乳铁素抗菌肽序列、结构分析的基础上设计合成，该系列抗菌肽序列如下：CQUT-a：PheArgTrpTrpGlnArg；CQUT-b：ArgArgGlnTrpPh...; 王远强林治华丁元蔡家利韩英子