裴林
- 作品数：13 被引量：45H指数：4
- 供职机构：徐州医学院基础学院生物化学与分子生物学研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脑缺血/再灌对蒙古沙土鼠海马突触体酪氨酸磷酸化的影响被引量：7
- 2000年
- 用蒙古沙土鼠双侧颈总动脉结扎 (BCAO)前脑缺血模型 ,研究缺血 /再灌对海马突触体蛋白酪氨酸磷酸化的影响及NMDA受体 (NR)非竞争性拮抗剂氯胺酮 (ketamine ,KT)、L 型电压门控钙离子通道 (L typevoltagegat edcalciumchannel,L 型VGCC)拮抗剂硝苯吡啶 (nifedipine ,ND)及非NR拮抗剂 6 ,7 二硝基喹恶啉上卫四 ( 6 ,7 dini troquinoxaline 2 ,3 dione ,DNQX)对其变化的影响。结果如下 :( 1)缺血 15min导致蛋白酪氨酸磷酸化水平明显下降 ,再灌引起包括 180kD蛋白在内的多种蛋白酪氨酸磷酸化水平快速 (再灌 15min)而持续 (至少 48h)升高 ;( 2 )脑缺血 15min ,再灌 6h ,蛋白酪氨酸磷酸化达最高水平 ,180kD蛋白酪氨酸磷酸化水平为假手术对照组的 1 8倍 ;( 3)缺血前腹腔注射KT或ND ,对缺血 /再灌诱导 180kD等蛋白酪氨酸磷酸化水平升高均有拮抗作用 ,但DNQX无此作用 ;( 4)免疫沉淀和免疫印渍证明 ,180kD蛋白为NR2B ,且其蛋白表达在脑缺血 /再灌时没有变化。结果提示 ,( 1)脑缺血 /再灌诱导NR2B等蛋白酪氨酸磷酸化增加 ,激活NR通道 ,加重神经元损伤 ;( 2 )NR通道不仅可被酪氨酸磷酸化调节 ,而且NR通道和L 型VGCC都参与了脑缺血 /再灌对NR2B等蛋白酪氨酸磷酸化水平的调节 。
- 李勇裴林张光毅
- 关键词：脑缺血氯胺酮酪氨酸磷酸化
- 矾酸钠和染料木黄酮对脑缺血／再灌注诱导海马神经元损伤的作用及分子机制被引量：1
- 2003年
- 目的研究矾酸钠和染料木黄酮对脑缺血/再灌注后海马神经元损伤的作用及其分子机制.方法采用蒙古沙土鼠双侧颈总动脉结扎诱导的短暂(15 min)前脑缺血模型,用底物γ-32P掺入法测定酪氨酸蛋白激酶(PTK)的活性,免疫印迹法分析NMDA受体2B亚基(NR2B)的酪氨酸磷酸化变化;采用体外孵育的大鼠海马脑片模拟缺血模型,测定海马神经元细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的漏出量作为神经元损伤的指标.结果沙土鼠缺血/再灌6 h,海马突触体总PTK活性显著升高,缺血前20min腹腔注射染料木黄酮对PTK总活性有明显的降低作用,而矾酸钠对其却无明显作用;短暂前脑缺血/再灌注6 h后,NR2B的酪氨酸磷酸化显著增加,矾酸钠与染料木黄酮可分别增加、减少这种磷酸化的增加,而对NR2B的蛋白表达无明显作用;大鼠海马脑片"缺血"30 min/再灌1 h,细胞LDH的漏出量明显增加,"缺血"前15 min,在海马脑片孵育液中加入矾酸钠与染料木黄酮可分别增加、减少LDH的漏出量.结论PTK和酪氨酸蛋白磷酸酶(PTP)共同参与缺血性脑损伤的调节,而PTK起着更为重要的作用.
- 颜景芝张光毅裴林李勇刘永侯筱宇
- 关键词：染料木黄酮脑缺血再灌注海马神经元损伤分子机制
- Ca^（2＋）／CaMPKⅡ与脑缺血兴奋毒性关系的研究被引量：1
- 1996年
- 采用大鼠海马脑片体外缺血模型，观察了“缺血”或谷氨酸及氯胺酮对海马脑片Ｃａ￣（２＋）／ＣａＭＰＫⅡ活性的影响，同时观察了缺血对神经元胞外谷氨酸堆积的影响。结果如下：（１）Ｃａ￣（２＋）／ＣａＭＰＫⅡ活性随“缺血”时间的延长而逐渐下降，缺血１０，２０和３０ｍｉｎ，酶活性分别为对照组的６３％，４４％和２９％（１０ｍｉｎ，Ｐ＜０．００２；２０和３０ｍｍ，Ｐ＜０．００１），提示该酶对缺血非常敏感。（２）单纯过量外源性谷氨酸作用３０ｍｉｎ，能引起酶活性显著下降到仅为对照组的２４％，提示脑缺血时酶活性的抑制与兴奋毒性有关。（３）海马脑片在体外缺血３０ｍｉｎ时，谷氨酸在胞外的堆积增加２倍多（从１２８±２０升高到４３１±７４ｎｍｏｌ·ｍｇ￣（－１）ｐｒｏ·ｍｉｎ￣（－１），ｎ＝６）。（４）氯胺酮对“缺血”和单纯外源性谷氨酸所诱导的酶活性抑制均有明显的拮抗作用，但其拮抗作用显著不同，前者可使酶活性恢复至对照的６２％，后者高达９２％。说明脑缺血引起酶活性下降不仅与ＮＭＤＡ受体有关，而且与其它因素有关。
- 裴林纵艳艳张磊孙亚锋张光毅
- 关键词：海马脑片脑缺血兴奋毒性
- 氯胺酮和硝苯吡啶对培养神经元谷氨酸兴奋毒性的保护作用被引量：8
- 1996年
- 以体外培养的大鼠胚胎皮层神经元为对象，以培养上清液中乳酸脱氢酶活性为指标，研究了谷氨酸兴奋毒性及药物的保护作用。结果表明，培养１０ｄ的皮层神经元置于含１０或５０μｍｏｌ·Ｌ－１谷氨酸和低糖（１ｇ·Ｌ－１）的ＤＭＥＭ培养液中后，随着作用时间的延长，ＬＤＨ漏出逐渐增加。在谷氨酸处理前，于培养液中加入氯胺酮或硝苯吡啶，则ＬＤＨ漏出量明显低于对照组。氯胺酮和硝苯吡啶并用，ＬＤＨ漏出量比单独使用氯胺酮或硝苯吡啶下降更加明显。结果表明，谷氨酸对培养的神经元可产生严重损伤。氯胺酮和硝苯吡啶单用或并用均有明显的保护作用。
- 裴林纵艳艳孙亚锋张光毅
- 关键词：谷氨酸氯胺酮硝苯吡啶兴奋性氨基酸
- 脑缺血/再灌对海马磷酸酪氨酸蛋白含量的影响及其机制的研究被引量：1
- 2001年
- 目的和方法 :采用蒙古沙土鼠双侧颈总动脉结扎 (BCAO)前脑缺血模型 ,研究N 甲基D 门冬氨酸 (NMDA)受体 (NR)非竞争性拮抗剂氯胺酮 (ketamine,KT)、L 型电压门控钙离于通道 (L typevoltagegatedcalciumchannel,L型VGCC)拮抗剂硝苯吡啶 (NifedipineND)及非NR拮抗剂 6 ,7 二硝基喹恶啉上卫四 (6 ,7 dinitroquinoxaline 2 ,3dioneDNQX)对沙土鼠脑缺血及缺血 /再灌海马可溶性 (S3)、突触体 (P2 )和颗粒性 (P3)部分中磷酸酪氨酸蛋白 (p tyr pr)含量变化的影响。 结果 :①缺血 15min ,三部分 (P2 ,P3,S3) p tyr pr含量均下降 ,而S3 部分 p tyr pr含量下降更明显 ;随着脑缺血再灌时间的延长 ,三部分P tyr Pr含量均逐渐升高。S3 部分恢复快 ,P2 与P3 部分相比 ,升高的速度较慢 ,但升高的幅度较大 ,且再灌后期变化不大 ;②脑缺血前腹腔注射KT或ND ,均可部分地拮抗缺血再灌引起的p tyr pr含量的升高 ,而DNQX对此无影响。 结论 :缺血 /再灌引起的p tyr pr变化与NR通道及L型VGCC有关 。
- 裴林李勇张光毅崔肇春朱正美
- 关键词：脑缺血KT海马
- 右美沙芬对培养大鼠皮层神经元谷氨酸兴奋毒性和缺氧损伤的保护作用被引量：1
- 1997年
- 本文采用16～18d胎龄的大鼠皮层细胞进行分离培养，以培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）活性作为细胞损伤的指标，分别观察了缺氧和过量谷氨酸对皮层神经元的影响以及右美沙芬的保护作用。实验结果表明，外源性谷氨酸（10和50μmol／L）和缺氧（5h）均引起LDH释放增加，而这种作用皆被右美沙芬所抑制。提示右美沙芬对此有明显的保护作用。以上结果说明谷氨酸兴奋毒性与NMDA受体在缺血性脑损伤过程中起着重要的作用。
- 裴林纵艳艳孙亚锋张光毅
- 关键词：右美沙芬皮层神经元谷氨酸
- 大鼠海马脑片缺氧诱导Ca^(2+)/CaM PKII活性抑制机理的研究被引量：14
- 1997年
- 采用大鼠海马脑片体外缺氧模型，观察了Ca2+和氯胺酮对海马脑片Ca2+／CaMPKⅡ活性的影响，同时观察了缺氧对神经元胞外谷氨酸堆积的影响。结果如下：（1）有钙或无钙培养时，酶活性随缺氧时间的延长均下降，但前者比后者酶活性下降更显著，提示外ca2+在神经元缺氧损伤中起重要作用。（2）海马脑片在体外缺氧30min，谷氨酸在胞外的堆积增加2倍多。（3）单纯过量外源性谷氨酸能引起酶活性显著下降，提示脑缺氧时酶活性的抑制与兴奋毒性有关。（4）氯胺酮对缺氧和单纯外源性谷氨酸所诱导的酶活性抑制均有明显的拮抗作用，说明脑缺氧引起酶活性下降与NMDA受体介导有关。我们的结论是：脑缺氧时该酶活性的抑制是与下列途径有关：谷氨酸→NMDA受体→Ca2+→Ca2+靶酶。
- 裴林纵艳艳张磊孙亚锋张光毅
- 关键词：海马脑片缺氧调钙蛋白
- 氯胺酮对培养神经元无氧与再灌损伤保护作用机理的研究被引量：3
- 1997年
- 采用１６－１８ｄ胎龄的大鼠皮层细胞分离培养，分别观察无氧再灌和谷氨酸对皮层神经元的影响以及氯胺酮的保护作用。结果如下：培养１２ｄ的细胞先置于缺氧环境中５ｈ，再灌０－２４ｈ后，随着无氧再灌时间延长，ＬＤＨ漏出增加。外源性谷氨酸也引起ＬＤＨ的漏出增加。无氧再灌和谷氨酸处理前，于培养液中加入氯胺酮，则ＬＤＨ漏出量均明显低于对照组。结果表明，无氧和再灌及过量谷氨酸均造成皮层神经元严重损伤，氯胺酮对上述损伤皆有明显的保护作用。以上结果说明谷氨酸兴奋毒性与ＮＭＤＡ受体在缺血性脑损伤过程起着至关重要的作用。
- 裴林纵艳艳张光毅
- 关键词：氯胺酮缺氧再灌注损伤
- Quin2法测定人血小板胞浆游离钙浓度
- 1994年
- 应用荧光钙指示剂Ｑｕｉｎ２测定胞装游离钙浓度的方法，研究了在不同胞外游离钙浓度［Ｃａ￣（２＋）］＿０下人血小板场急状态时及由凝血四激活后的胞装游离钙浓度［Ｃａ￣（２＋）］＿１的变化．结果显示：凝血的可使负载Ｑｕｉｎ２的人血小板［Ｃａ￣（２＋）］＿１呈现浓度依赖性的短暂升高，且这种作用对［Ｃａ￣（２＋）］＿０有明显的依赖性。该项结果提示凝血酸引起的［Ｃａ￣（２＋）］＿１升高主要来源于外钙内流，部分为内钙释放所致．
- 陆志强王道生赵皓裴林
- 关键词：血小板钙凝血酶
- 抗磷酸酪氨酸抗体的制备、纯化和应用被引量：1
- 2000年
- 目的 制备抗磷酸酪氨酸多克隆抗体 ,利用此抗体研究缺血再灌注对海马磷酸酪氨酸蛋白 (p -tyr -pr)免疫反应性的影响。方法 以偶联磷酸化酪氨酸的牛血清白蛋白 (BSA)作为免疫原免疫兔获得抗血清。将磷酸酪氨酸偶联到溴化氰活化的sepharose 4B上。抗血清经磷酸酪氨酸 -sepharose 4B亲和柱纯化 ,所得抗体专一性强 ,并经dotblot鉴定。结果 抗体仅对酪氨酸磷酸化的蛋白质包括酪氨酸磷酸化的血清白蛋白、溶菌酶、卵清蛋白起抗原抗体反应 ,而不识别非酪氨酸磷酸化的溶菌酶、卵清蛋白 ;不识别作为免疫原的骨架成分BSA ,也不识别丝氨酸磷酸化的卵清蛋白和苏氨酸磷酸化的卵清蛋白 ;缺血 /再灌注 6h海马各区p -ty -pr免疫反应性明显增强 ,氯胺酮或硝苯吡啶对此有拮抗作用。结论 亲和纯化后的抗体是高度特异性的。缺血 /再灌注后p -tyr-pr免疫反应性增强与N -甲基 -D -天冬氨酸 (NMDA)
- 裴林李勇王德广张光毅崔肇春朱正美
- 关键词：抗体多克隆抗体
