郑林冲
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
- 供职机构：上海医药工业研究院更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 利用易错PCR提高头孢菌素C酰化酶的活性
- 本研究采用易错PCR，引入不同浓度的Mg2+和Mn2+，得到的易错PCR产物经克隆、转化后进行初筛，共筛选了400株转化子，有35株活性比未突变的酶活性提高，将35株初筛活性提高的转化子用金属鳌合亲和层析法得到纯酶后再进...
- 王颖秋郑林冲谢丽萍朱宝泉胡又佳
- 关键词：抗生素合成工艺头抱菌素酶活性
- 文献传递
- 四环素类药物生物合成研究进展被引量：7
- 2012年
- 四环素类药物是抑制细菌蛋白合成的一大类广谱抗生素,广泛用于多种细菌及立克次氏体、衣原体、支原体等所致之感染。四环素类药物由Ⅱ型聚酮体途径(polyketide synthase,PKSⅡ)合成,通过一套可重复使用的结构域在重复的反应步骤中多次催化酚聚酮结构的生成。该类化合物的结构多样性主要来源于聚酮合成后的修饰。本文对四环素类药物的生物合成途径及关键酶调控机制的研究进展展开综述。
- 郑林冲谢丽萍胡又佳
- 关键词：四环素生物合成
- 基于易错PCR的头孢菌素C酰化酶的定向进化被引量：4
- 2013年
- 以前期工作中获得的一个可以直接转化头孢菌素C(CPC)为7-氨基头孢烷酸(7-ACA)的CPC酰化酶为基础,采用易错PCR,引入不同浓度的Mg2+和Mn2+,所得易错PCR产物经克隆、转化后进行初筛,共筛选了400株转化子,其中有35株酶活力得到提高。采用金属螯合亲和色谱法分离得到纯酶后再进行复筛,其中一株酶活力显著提高,转化率提高约35%。测序结果显示,该CPC酰化酶突变蛋白的编码序列中有两个碱基发生突变,使得第122位的丙氨酸被替换为缬氨酸。在最适条件下,该酶催化CPC生成7-ACA的转化率为95%。
- 王颖秋郑林冲谢丽萍朱宝泉胡又佳
- 关键词：易错PCR体外进化头孢菌素C7-氨基头孢烷酸
