郭洪宇
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：哈尔滨医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省卫生厅科研项目黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IKCa1通道阻滞剂TRAM-34对HUVEC增殖作用的影响被引量：2
- 2011年
- 目的体外应用IKCa1通道阻滞剂TRAM-34干预人脐静脉内皮细胞(HUVEC),探讨其抑制HUVEC增殖作用的影响。方法采用免疫荧光和RT-PCR法观察HUVEC细胞IKCa1的表达,常规MTT法分析不同浓度TRAM-34作用24、48、72 h后HUVEC细胞增殖的变化。结果免疫荧光和RT-PCR法均证实HUVEC细胞表达IKCa1。TRAM-34浓度低于10μmol/L时作用不明显,而高于10μmol/L时能明显抑制HUVEC增殖,并随药物浓度升高而抑制作用增强,呈显著浓度依赖性。TRAM-34抑制作用呈时间依赖性,处理细胞72 h作用明显强于48 h,而24 h无明显变化。结论 HUVEC细胞表达IKCa1。TRAM-34能显著抑制HUVEC细胞增殖,其抑制作用呈浓度和时间依赖性。
- 郭洪宇张雅芳林芳遇春林杨慧科李晓冬
- 关键词：人脐静脉内皮细胞
- 中电导钙激活钾通道调节表皮生长因子诱导的人脐静脉内皮细胞体外增殖被引量：1
- 2016年
- 目的观察表皮生长因子(EGF)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)离子通道中电导钙激活钾通道(KCa 3.1)表达的影响,以及KCa 3.1在EGF诱导HUVECs体外增殖过程中的作用。方法 MTT法筛选EGF最佳实验浓度;免疫荧光和Western blotting技术检测EGF对HUVECs细胞KCa 3.1的表达;经KCa 3.1阻断剂TRAM-34处理,MTT法分析EGF诱导的HUVECs增殖情况;流式细胞技术检测细胞周期,RT-PCR法分析细胞周期蛋白D1(cyclin D1)及周期蛋白依赖性蛋白激酶4(CDK4)表达的水平。结果 EGF处理细胞48h后,MTT实验证实25μg/L浓度的EGF促细胞增殖效应最强。免疫荧光染色显示,EGF明显促进KCa 3.1蛋白表达,且Western blotting提示KCa 3.1的表达上调1.4倍。进一步研究显示,高选择性阻断剂TRAM-34阻断KCa 3.1通道48h后EGF的促细胞增殖作用显著下降,并呈时间和剂量依赖性;细胞周期G1期细胞百分比明显增加;CDK4的mRNA表达下调,而cyclin D1表达无明显变化。结论 KCa 3.1可能通过影响细胞周期进程调节EGF诱导的HUVECs增殖过程。
- 郭洪宇赵玉娇高博李晓冬张雅芳杨慧科
- 关键词：人脐静脉内皮细胞表皮生长因子免疫印迹法
