钟根深
- 作品数：34 被引量：71H指数：5
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 靶向表皮生长因子受体的寡肽与力达霉素强化融合蛋白的构建及其抗肿瘤活性被引量：2
- 2009年
- 背景与目的:表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在多种肿瘤细胞表面异常表达。力达霉素是从链霉菌中分离得到的具有强抗肿瘤作用的烯二炔类抗生素。本研究的目的是制备一种特异性靶向EGFR的寡肽配体与力达霉素的强化融合蛋白(Ec-LDP-AE),并初步探讨其抗肿瘤活性。方法:制备融合蛋白(Ec-LDP),并分离纯化,用高效液相色谱法检测Ec-LDP的纯度,ELISA、流式细胞技术以及细胞免疫荧光方法分析纯化的Ec-LDP蛋白对不同肿瘤细胞的免疫结合活性。将纯化的Ec-LDP蛋白与力达霉素发色团进行组装,构建Ec-LDP-AE,用高效液相色谱法检测350nm处的吸收峰,MTT法检测Ec-LDP-AE的体外抗肿瘤活性。结果:成功构建并表达了Ec-LDP蛋白,目的蛋白分泌至大肠杆菌周质腔中,产量为每升发酵液18mg活性蛋白,其纯度为95.3%。ELISA和细胞流式检测结果均显示Ec-LDP蛋白对EGFR高表达的肿瘤细胞系A431和MCF-7都有很强的免疫结合活性,而对不表达EGFR的NIH3T3细胞则无结合活性。免疫荧光实验也证实Ec-LDP蛋白可与A431细胞膜受体结合。Ec-LDP-AE蛋白在350nm波长处出现特定吸收峰,表明其构建成功。MTT法检测结果显示Ec-LDP-AE对体外培养的肿瘤细胞有强烈的杀伤作用,对MCF-7和A431细胞的IC50值分别为3.06×10-11mol/L和9.38×10-13mol/L。结论:本研究制备的强化融合蛋白Ec-LDP-AE对表皮生长因子受体有靶向作用,并且保留了力达霉素的强烈细胞毒作用。
- 郭晓芳钟根深苗庆芳甄永苏
- 关键词：表皮生长因子受体融合蛋白靶向作用力达霉素抗瘤活性
- 四种小鼠肠道微生物DNA提取方法比较被引量：8
- 2015年
- 采用异硫氰酸胍(guandine thiocyanate,GITC)法、Tiangen DNA提取试剂盒、Omega DNA提取试剂盒和广泛应用的十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyl trimethyl ammonium bromide,CTAB)法提取小鼠粪便微生物总DNA,通过比较所提取DNA的浓度和纯度,发现粪便DNA提取试剂盒提取的DNA纯度最高但浓度最低;CTAB法所得的DNA浓度最高但纯度最低;GITC法所得DNA的浓度高于粪便DNA提取试剂盒,纯度高于CTAB法。通过变性梯度凝胶电泳(16S r DNA-PCR-DGGE)指纹图谱分析技术进一步比较了各种提取方法所代表微生物群落的丰富度和多样性。结果表明,GITC法提取得到的DNA所代表细菌的丰富度和多样性显著高于其他3种方法。本实验所建立的GITC法可更全面地反映肠道微生物的多样性和群落结构,是一种较为理想的粪便微生物DNA提取方法。
- 吴敏娜武亚琦屈艳魏纪东钟根深
- 关键词：DNA提取肠道微生物粪便
- 一种双单链抗体强化融合蛋白dFv-LDP-AE及其制备方法和应用
- 本发明涉及一种双单链抗体强化融合蛋白dFv-LDP-AE，它是由两个抗IV型胶原酶单抗3G11的单链抗体scFv、力达霉素辅基蛋白LDP和力达霉素活性发色团AE组成，分子量为67.1kDa，其融合蛋白dFv-LDP的基因...
- 钟根深甄永苏张胜华苗庆芳吴淑英
- 文献传递
- 双特异性融合蛋白EGF-LDP-IGF-AE的构建及抗非小细胞肺癌活性研究
- 目的 表皮生长因子受体(EGFR)和胰岛素样生长因子受体I(IGF-IR)在人非小细胞肺癌中呈过表达状态,且二者之间可发生多种形式的相互作用,是非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSC...
- 郭晓芳朱小飞钟根深曹海英苗庆芳
- 关键词：EGFRIGF-1RNSCLC
- 旨在增强力达霉素抗肿瘤活性的靶向性融合蛋白的构建及活性检测
- 郭晓芳钟根深苗庆芳朱小飞吴敏娜张胜华李劲
- 力达霉素（Lidamycin, LDM）是由中国医学科学院医药生物技术研究所自主开发的一种烯二炔类抗生素，研究显示它对多种肿瘤细胞均具有强烈的杀伤活性，在动物模型中对多种移植瘤也具有显著的生长抑制活性，该药已进入II期临...
- 关键词：
- 关键词：力达霉素卵巢癌抗肿瘤活性
- CIK细胞增敏力达霉素对人肝癌HepG2细胞作用的实验研究
- 许芝山蔡瑞艳李良钟根深
- 关键词：力达霉素CIK肝癌
- 抗HER2抗体CDR3结构域与力达霉素融合蛋白的构建及其活性初探
- 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,占女性肿瘤死亡首位,其发病率逐年增高,人们迫切需要采用新的治疗方法来提高患者的生存率及生存质量.分子靶向治疗在肿瘤治疗中的地位逐渐上升,成为肿瘤治疗的一个热点.目前已有多种分子靶向治疗的...
- 胡磊钟根深甄永苏
- 关键词：乳腺癌结构域
- 文献传递
- 力达霉素经肝动脉介入治疗或静脉化疗作用于兔肝癌 VX2移植瘤的实验研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨力达霉素经肝动脉介入治疗和静脉化疗两种给药途径对VX2兔肝癌的影响。方法开腹方法将VX2瘤组织块分别植入12只新西兰大白兔的肝左叶,建立VX2兔肝癌模型,B超检测肿瘤生长情况后随机分为两组:A组为力达霉素肝动脉介入组,B组为力达霉素静脉化疗组(6只/组)。A组在数字减影血管造影(DSA)引导下经肝固有动脉注入力达霉素(1 ml,0.05 mg/kg),B组通过耳缘静脉注入力达霉素(1 ml,0.05 mg/kg),给药10 d后活杀两组动物,取肝肿瘤组织4%多聚甲醛固定,免疫组化方法测定CD34、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达;应用Cobas 8000检测血清生化丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平;计算并比较两种不同给药方式的肿瘤生长抑制效果。结果给药10 d后两组肿瘤均有增大,但与B组相比,A组肿瘤生长率明显降低(P<0.05);免疫组化结果显示,介入途径给药更能下调CD34、PCNA表达水平。结论在治疗兔肝癌VX2中,力达霉素经肝动脉介入给药治疗效果优于静脉化疗给药。
- 许芝山钟根深霍书华齐劲松薛会朝周艳君李良
- 关键词：力达霉素介入治疗VX2肝肿瘤
- 以明胶酶为靶点的小型化抗体与力达霉素构建的基因工程强化融合蛋白及其抗肿瘤活性的研究
- 抗体-药物偶联物的开发是当前抗肿瘤药物研发的一个重要发展方向,然其成功的发展在某种程度上有赖于抗体部分的靶向运输能力和被输送药物的生物学活性。明胶酶在多种肿瘤中高表达,且在肿瘤的侵袭、转移以及血管生成中发挥着重要的作用,...
- 钟根深
- 关键词：力达霉素明胶酶抗体活体成像正交设计靶向治疗
- 文献传递
- 葛根素对胶质瘤细胞迁移侵袭能力影响研究被引量：5
- 2013年
- 目的:探讨葛根素对人胶质瘤细胞U251的迁移、侵袭能力的影响。方法:体外培养U251细胞,加入佛波脂诱导,明胶酶谱法和Transwell小室分别观察不同浓度葛根素对其MMP表达水平及迁移侵袭能力的影响。结果:与对照组相比,葛根素显著降低U251细胞的MMP-2、MMP-3、MMP-9酶活性及迁移、侵袭能力,且呈一定量效关系。结论:通过抑制MMP酶活性,葛根素可有效抑制人胶质瘤细胞U251的迁移侵袭。
- 岳双柱袁国艳金保哲钟根深惠磊黄立勇赵新利马鹏举
- 关键词：葛根素迁移MMP
