陈春
- 作品数：4 被引量：23H指数：2
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- hCuZn-SOD基因的克隆、表达及其产物的初步纯化和表征被引量：16
- 2004年
- 为获得hCuZn-SOD基因,根据GenBank中人铜锌超氧化物歧化酶(hCuZn-SOD)基因碱基序列,设计扩增引物,用RT-PCR方法从人的肝细胞中克隆出hCuZn-SODcDNA序列,并将它插入pUCm-T载体中,经过DNA序列测定证实,该片段序列的一个碱基发生突变(与报道基因相比),引起其编码第116个氨基酸由G变为D.采用定向克隆的方法将hCu Zn-SOD的cDNA片段克隆到表达载体pGEX-2T上,构建表达质粒pGEX-SOD,并转化大肠杆菌BL21(DE3).SDS-PAGE分析证实,经IPTG诱导,融合蛋白GST-SOD获得高效表达.破碎菌体、上清经谷胱甘肽亲和层析初步纯化后,得到纯度达90%的目的蛋白.活性实验表明,GST-SOD具有生物活性.
- 陈春陈躬瑞刘树滔卢菀华饶平凡
- 关键词：克隆RT-PCR融合蛋白
- 重组SOD的摇瓶发酵条件研究被引量：2
- 2006年
- 目的:对含PTD-SOD重组质粒的工程菌进行诱导表达。方法:通过SOD活性和SDS-PAGE电泳分析,考察了诱导时间和诱导剂浓度对PTD-SOD表达量的影响。同时考察了诱导温度对产物表达形式的影响。结果:表达条件为IPTG浓度0.5mM,诱导时间4h,诱导温度20℃。结论:在上述条件下重组SOD在摇瓶中的表达效果最好。
- 陈航黄晓南陈春刘树滔饶平凡
- 关键词：超氧化物歧化酶诱导剂基因表达大肠杆菌
- TAT-PTD融合的hCu，Zn-SOD的表达、纯化和表征
- 人的铜锌超氧化物歧化酶(hCu，Zn-SOD)是一种重要的胞内酶，具有消除人体内超氧阴离子自由基(O2-)，保护细胞免受损伤的作用。TAT蛋白转导域(TAT-PTD)是近年来被证实的一种可有效携带生物大分子穿过细胞膜的生...
- 陈春
- 关键词：超氧化物歧化酶蛋白转导域融合蛋白
- 文献传递
- 基于REST架构的J2EE三层架构代码生成器设计与实现
- 陈春
- 关键词：RESTJ2EE三层架构代码生成器
