陶鹏
- 作品数：20 被引量：73H指数：6
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- SARS冠状病毒N蛋白的细胞定位及其RNA干扰研究
- 本文旨在构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与SARS冠状病毒不同长度核衣壳蛋白区段融合表达的pEGFP-C1重组载体，对293细胞进行瞬时转染，显微镜下观察核衣壳蛋白不同区段在细胞内的定位;构建增强型绿色荧光蛋白(EGF...
- 陶鹏
- 关键词：SARS冠状病毒核衣壳蛋白细胞定位短发夹状RNARNA干扰
- 几种肿瘤特异性启动子在人肝癌细胞系中的活性比较
- 2010年
- 目的克隆甲胎蛋白（AFP）、survivin（SUR）、人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因启动子,检测并评价其在不同肝癌细胞系和正常组织细胞中的转录活性,为肝癌靶向性基因治疗提供依据。方法采用PCR法扩增获得AFP、SUR、hTERT基因的启动子片段,将之克隆到表达虫荧光素酶基因的报告质粒上,检测AFP、SUR、hTERT基因启动子在肝癌细胞系和正常组织中的转录活性,评价其转录活性水平和肿瘤特异性。结果成功克隆了AFP、SUR、hTERT启动子,证实AFP、SUR、hTERT启动子在肝癌细胞中具有肿瘤特异性转录活性,SUR启动子活性最高,其活性水平为AFP启动子的52~98倍;hTERT启动子次之,其活性水平为AFP启动子的14~30倍;AFP启动子活性最低。结论 hTERT和SUR启动子在肝癌细胞系中具有较强的启动活性和显著的肿瘤特异性,可望开发成为新型的肝癌靶向性基因治疗工具。
- 况舸唐霓陶鹏吴莹张君黄爱龙
- 关键词：启动子人端粒酶逆转录酶SURVIVIN基因疗法肝癌
- HBV转基因小鼠与正常小鼠CD4^+ CD25^+调节性T细胞数量和功能的比较被引量：1
- 2010年
- 目的比较HBV转基因小鼠和正常同种小鼠CD4+ CD25+调节性T细胞数量和功能的差异及其意义。方法用流式细胞术对18只HBV转基因小鼠和18只正常同种小鼠外周血CD4+ CD25+调节性T细胞的频率进行分析;磁珠分选小鼠脾CD4+ CD25- T细胞和CD4+ CD25+ T细胞,分为HBsAg刺激组和非HBsAg刺激组体外单独和混合培养,分别以流式细胞术、淋巴细胞增殖实验和ELISA检测分泌TGF-β的CD4+ CD25+ T细胞频率,评价CD4+ CD25+调节性T细胞对CD4+ CD25- T细胞增殖的抑制作用,以及诱生的细胞因子IFN-γ、IL-6水平;免疫组化检测肝脏叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Forkhead/winged helix transcription factor,Foxp3)蛋白的表达水平。结果与正常同种鼠比较,HBV转基因小鼠外周血CD4+ CD25+调节性T细胞数量无明显差异(P>0.05),肝脏淋巴细胞Foxp3表达也无明显差异(P>0.05)。HBsAg刺激组,HBV转基因小鼠CD4+ CD25- T细胞的增殖能力、诱生的细胞因子IFN-γ、IL-6水平显著低于正常同种鼠(P<0.01);非HBsAg刺激组,HBV转基因小鼠分泌TGF-β的CD4+ CD25+ T细胞数量、CD4+ CD25- T细胞的增殖能力、诱生的细胞因子IFN-γ、IL-6水平与正常同种鼠相比则无明显差异(P>0.05);无论在HBsAg刺激组还是非HBsAg刺激组,两组小鼠的CD4+ CD25- T细胞单独培养时CD4+ CD25- T细胞增殖能力、诱生的细胞因子IFN-γ、IL-6的水平均显著高于混合培养(P<0.01)。结论与正常同种鼠比较,HBV转基因小鼠CD4+ CD25+调节性T细胞数量和功能无明显差异,但在T细胞水平对HBV存在特异性免疫耐受。CD4+ CD25+调节性T细胞可非特异地抑制自身活化的CD4+ T细胞。
- 曾波孙航刘杞陶鹏
- 关键词：HBV转基因小鼠CD4^+CD25^+调节性T细胞慢性乙型肝炎免疫耐受
- 腹水CD64指数对失代偿期肝硬化并发自发性细菌性腹膜炎的诊断价值被引量：15
- 2013年
- 目的检测失代偿期肝硬化患者腹水CD64指数,探讨其在自发性细菌性腹膜炎(SBP)中的诊断价值。方法将失代偿期肝硬化伴腹水患者分为非SBP组、SBP疑诊组和SBP确诊组,并设阴性和阳性对照组(非SPB组、腹水细菌培养阳性组);依据腹痛及外周血中性粒细胞百分比,将SBP疑诊组进一步分组,流式细胞术检测各组的腹水CD64指数;并比较抗菌药物治疗后腹水CD64指数的差异。分析腹水CD64指数、腹水WBC计数及降钙素原诊断SBP的效能。结果腹水CD64指数在SBP确诊组(179.39±65.56)及SBP疑诊组(115.49±58.42)高于非SBP组(26.88±26.05),差异有统计学意义(P<0.01)。SBP疑诊伴腹痛组与无痛组腹水CD64指数差异无统计学意义(P>0.05)。SBP疑诊伴外周血中性粒细胞百分比升高组较无外周血中性粒细胞百分比升高组腹水CD64指数水平明显升高(P<0.05)。治疗无效组的CD64指数水平明显高于治疗有效组(P<0.01)。腹水CD64指数曲线下面积大于降钙素原及腹水WBC计数,并具有较高的灵敏度及特异度。结论腹水CD64指数检测快捷,影响因素少,可为临床上诊断SBP提供一种新选择。
- 刘光亮王娜陈春波陶鹏张大志周智胡鹏孙航刘杞
- 关键词：肝硬化腹水流式细胞术自发性细菌性腹膜炎
- SARS-CoVS基因的克隆及其shRNA表达载体的构建
- 2005年
- 目的构建绿色荧光蛋白与SARSCoVS基因的融合表达载体pEGFPC1S及针对SARSCoVS基因的shRNA表达载体pshRNAS,以观察shRNA对SARSCoVS蛋白表达的影响。方法人工合成SARSCoVS基因片段及其shRNA引物,两端设计酶切位点,分别与载体pEGFPC1和pTZU6+1连接,转化大肠杆菌DH5а和JM109,酶切及测序鉴定。结果酶切电泳显示pEGFPC1S插入片段大小为1416bp,测序结果显示pshRNAS中插入的shRNA引物序列正确。结论成功构建融合表达载体pEGFPC1S及针对SARSCoVS基因的shRNA表达载体pshRNAS。
- 陶鹏张君唐霓陈道荣卢年芳黄爱龙
- 关键词：SARS-COV克隆SHRNA
- SARS冠状病毒N蛋白的真核细胞定位研究
- 2005年
- 目的:为进一步探讨SARS-CoV核衣壳蛋白(N蛋白)在病毒复制及细胞通路中的作用,观察了核衣壳蛋白不同区段在细胞内的定位。方法:应用核定位序列分析软件分析N蛋白序列,找出其中的核定位信号序列;构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与SARS-CoV不同长度核衣壳蛋白区段融合表达的pEGFP-C1重组载体,对293细胞进行瞬时转染,在荧光显微镜下观察核衣壳蛋白不同区段在细胞内的定位。结果:不同的核定位信号分析软件分析的结果不同,Prosite找到的核定位信号位于N蛋白第373-389或374-390aa,而PredietNLS server找到的核定位信号位于N蛋白第36-44aa;全长核衣壳蛋白及第161-422aa区段均定位于细胞质,第1-187aa区段定位于细胞质和细胞核。结论:SARS-CoV核衣壳蛋白的核定位信号可能位于N蛋白第36-44aa。
- 陶鹏陈维贤郭进军黄爱龙
- 关键词：核衣壳蛋白细胞定位
- 乙型肝炎病毒感染模型研究新进展被引量：6
- 2003年
- 病毒性肝炎抗病毒药物的开发和评价中的重要环节之一就是建立一种方便有效的体内外模型.
- 陶鹏黄爱龙
- 关键词：乙型肝炎病毒感染体外模型动物模型抗病毒药物
- SARS抗病毒研究进展
- 2005年
- 严重急性呼吸综合征 (SARS)是近年来出现的严重危害人类健康的疾病 ,作为一种传染病 ,我们必须加强病因治疗。对付SARS的病原体———SARS_CoV ,传统的抗病毒药物有一定作用 ,新的基因治疗方法也很有潜力。本文就SARS的抗病毒研究现状作简要综述。
- 陶鹏黄爱龙
- 关键词：抗病毒药物SAILS病因治疗SARS-COV
- 特异性SARS-CoV N蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位初步分析被引量：2
- 2006年
- 目的:用分段表达纯化的SARS冠状病毒(SARS-CoV)的核衣壳蛋白(nucleocapsid N蛋白)制备针对该蛋白不同区域抗原表位的高特异性单克隆抗体(McAb),初步定位单克隆抗体识别表位所在区域。方法:用分段表达纯化的SARS-CoV的N蛋白(分别记为N1蛋白、N2蛋白)分别免疫Balb/c小鼠制备McAb,通过检测其亚类、效价及相对亲和力鉴定McAb的生物学特性,以Western blot鉴定单克隆抗体特异性,并对McAb结合表位进行初步分析。结果:筛选出7株抗SARS-CoVN1蛋白及2株抗SARS-CovN2蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,IgG亚类鉴定6株为IgG1,2株为IgG2b,1株为IgG3,腹水效价105以上;亲和常数达108以上。Western blot证实所获的单克隆抗体可与SARS-CoVN蛋白发生特异性反应。ELISA相加实验结果显示2株N1 McAb识别相同的抗原表位,其余均识别不同的抗原表位。结论:通过分段表达纯化的SARS-CoV N蛋白而制备的特异性针对SARS-CoV N蛋白不同区域抗原表位的单克隆抗体中,N1单抗识别N蛋白N端(1￣549bp),N2单抗识别N蛋白C端(496￣1269bp),可初步定位单克隆抗体识别表位所在区域。
- 张娟余晓林陈维贤陶鹏唐霓黄爱龙郑建
- 关键词：SARS-COV核衣壳蛋白单克隆抗体抗原表位
- 经NLRP3通路的细胞焦亡在神经退行性疾病中的研究进展被引量：2
- 2022年
- 越来越多的研究发现,参与细胞焦亡中的NLRP3炎症小体被抑制启动或激活后,可以起到一定的减少神经炎症反应、延缓神经退行性疾病进展的作用。因此,现就依赖NLRP3炎症小体的细胞焦亡在神经退行性疾病中的最新研究进展进行综述。
- 贾露露何茂锐陶鹏
- 关键词：神经退行性疾病
