马远方
- 作品数：253 被引量：553H指数：12
- 供职机构：河南大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学自动化与计算机技术更多>>
- 免疫调节因子TIPE2慢病毒载体的构建及病毒包装
- 2013年
- 目的:TIPE2[Tumor necrosis factor(TNF)-αinduced protein 8-like 2(TNFAIP8L2),TIPE2]慢病毒载体的构建及病毒包装。方法:首先构建带有3×FLAG标签的pCDNA3.1-3×FLAG-TIPE2质粒,确认表达后再将标签连同TIPE2序列一起克隆入pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro慢病毒表达载体,然后与pMD2.G、psPAX2共转染293T细胞并收获上清,进一步用含病毒颗粒的上清感染PLC/PRF/5及HEK293T细胞,Western blot检测感染后TIPE2蛋白表达情况。结果:pCDNA3.1-3×FLAGTIPE2及pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro-TIPE2质粒构建成功,并能最终产出具有感染性的病毒颗粒。结论:成功构建了TIPE2慢病毒载体并获得具有感染性的病毒颗粒,为进一步研究TIPE2功能提供了有力的支持。
- 王耀辉娄强陈九格张军马远方
- 关键词：免疫调节因子慢病毒
- 支持向量机预测食管鳞癌患者术后生存期被引量：1
- 2015年
- 目的应用支持向量机(support vector machine,SVM)建立食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)术后生存期预测模型并评估该模型判断ESCC生存期的效能。方法随访168例接受根治性手术治疗的ESCC患者,分析ESCC临床病理特征和14-3-3σ、热休克蛋白gp96、巨噬细胞移动抑制因子(migration inhibitory factor,MIF)等3个蛋白的表达规律与ESCC生存期的相关性;应用Matlab软件进行SVM运算,对训练组128例ESCC患者建立最优预后分类模型ESCC-SVM,并用测试组40例患者验证分类效率,ROC曲线分析ESCC-SVM及其他预后相关因子对高低死亡风险ESCC的识别能力。结果 ESCC-SVM由性别、T分期、组织学分级、淋巴结转移、TNM分期、14-3-3σ和gp96等7个最优属性组成,该模型区分训练组和测试组ESCC五年整体生存率的最大AUC分别为0.96、0.86、准确率分别为97.7%、90.0%,明显优于目前临床应用的TNM分期(准确率分别为62.5%、67.5%)及其他各临床病理属性。Cox多因素比例风险回归模型分析发现年龄、T分期、gp96和ESCC-SVM是影响ESCC术后生存期的独立因素。ESCC-SVM与性别、T分期、组织学分级、淋巴结转移、TNM分期和14-3-3σ均显著相关。结论本研究建立的ESCC-SVM为预后评估、临床治疗方案选择及个体化治疗提供了理论依据。
- 张天晁玮霞赵云岗王明王广超贺红梅刘瑞敏魏书堂韩大正朱晗马瑾谷娟马远方齐义军
- 关键词：食管鳞状细胞癌支持向量机热休克蛋白GP96巨噬细胞移动抑制因子
- 抗人DR5单克隆抗体——mDRA-6与顺铂协同杀伤白血病细胞HL-60作用研究被引量：5
- 2007年
- 目的:观察抗死亡受体5(Death receptor5,DR5)单克隆抗体———mDRA-6与顺铂(DDP)对HL-60细胞的协同杀伤作用。方法:DR5蛋白免疫BALB/c小鼠,融合筛选抗DR5杂交瘤细胞,制备抗DR5单抗———mDRA-6;流式细胞术测定顺铂对HL-60细胞表面DR5表达及细胞凋亡率;荧光显微镜下观察mDRA-6与顺铂协同作用下HL-60细胞形态变化;MTT法测定不同浓度的顺铂与mDRA-6对HL-60细胞存活的影响;琼脂糖凝胶电泳检测mDRA-6与顺铂联合对HL-60细胞DNA片段化的影响。结果:顺铂可诱导HL-60细胞表面DR5表达增加,mDRA-6与顺铂联用致HL-60细胞出现染色质浓缩、断裂,细胞出芽,凋亡小体形成等细胞凋亡形态学变化;250ng/ml的mDRA-6作用于HL-60细胞10小时,细胞凋亡率为16.61%;0.16μg/ml的DDP作用于HL-60细胞10小时,细胞凋亡率为2.35%;二者联合作用后,HL-60细胞凋亡率增至57.10%;mDRA-6与DDP联合作用HL-60细胞,DNA琼脂糖凝胶电泳显示明显“梯形”条带。结论:抗DR5单抗———mDRA-6与DDP对HL-60细胞具有强大的协同杀伤作用。
- 李淑莲马远方刘广超张军白慧玲刘英杰
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体死亡受体单克隆抗体顺铂
- 抗人DR5抗体抗肿瘤作用及作用机制
- 研究表明DR5是TRAIL的主要死亡受体,是一个理想的抗肿瘤作用靶点之一。本实验室研制出一个抗DR5的激动性抗体mDRA-6。本研究旨在阐明抗DR5的激动性抗体mDRA-6的抗肿瘤相关作用机制。MTT法检测死亡率;流式细...
- 马远方刘广超李淑莲杜耀武张军白慧玲都景芳
- 文献传递
- 顺铂通过活性氧协同抗hDR5抗体诱导食管癌细胞凋亡
- 2009年
- 目的:探讨顺铂与抗死亡受体5(DR5)激动性抗体mDRA-6联合应用对食管癌细胞系EC9706细胞凋亡的影响及作用机制.方法:顺铂、抗体mDRA-6单独或联合作用于食管癌细胞,用流式细胞术检测药物的细胞毒作用、食管癌细胞表面DR5表达、细胞凋亡、细胞内活性氧水平、以及线粒体膜电位的变化;在荧光显微镜下观察细胞凋亡的形态学变化及DR5表达.结果:顺铂和抗体mDRA-6对食管癌细胞均具有细胞毒作用,并具有剂量依赖性,而且顺铂明显提高食管癌细胞对抗体mDRA-6细胞毒的敏感性.顺铂、抗体mDRA-6单独或联合应用均导致食管癌细胞呈现典型细胞凋亡特征.流式细胞术分析结果显示,mDRA-6和顺铂均诱导食管癌细胞凋亡,而且顺铂明显提高细胞对mDRA-6诱导细胞凋亡的敏感性;顺铂增强食管癌细胞表面及胞内的DR5表达,提高细胞内活性氧水平,降低线粒体膜电位.结论:顺铂主要通过活性氧激活细胞内线粒体细胞凋亡信号传导途径以及增强DR5表达,与抗体mDRA-6联合协同诱导食管癌细胞凋亡.研究结果对进一步探讨抗DR5激动性抗体及TRAIL的抗肿瘤临床应用有一定的指导意义.
- 刘广超都景芳刘世贵龙章富陶科高荣马远方
- 关键词：DR5TRAIL细胞凋亡顺铂
- 影响大肠埃希菌 FtsZ 功能和自身组装的重要氨基酸分析被引量：1
- 2015年
- 目的：探索大肠埃希菌（ Escherichia coli， E．coli） FtsZ 突变体 FtsZP74R、FtsZG77D和FtsZA81R对FtsZ功能和胞内自身组装的影响。方法利用分子克隆和定点突变技术，常规构建带His或YFP标签的FtsZ及其突变体融合表达质粒，亲和纯化得到相应的蛋白；采用同源重组技术构建FL37（△ftsZ-Cat）菌株；活细胞成像观察FtsZ及其突变体在胞内定位模式；免疫共沉淀试验检测FtsZ与其突变体间的相互作用；光扫描检测定点突变对FtsZ组装特性的影响；高压液相色谱法检测FtsZ突变体GTPase酶活性的变化。结果 FtsZP74R、FtsZG77D和FtsZA81R突变体在E．coli内不能正确定位和形成功能性Z环、FtsZ-FtsZ倡单体间的相互作用减弱或消失、突变体体外聚合效率减少及FtsZA81R的GTPase酶活性显著降低。结论 P74、G77和A81是影响FtsZ功能和胞内正确组装的重要氨基酸；A81可同时影响FtsZ的侧面相互作用和GTPase活性。
- 郑晓伟卢乔楠霍雨佳马远方卢锋
- 关键词：细胞内定位
- JNK信号传导通路在抗人DR5单克隆抗体mDRA-6诱导白血病细胞凋亡中的作用
- 2009年
- 目的:探讨JNK信号传导通路在抗人DR5单克隆抗体mDRA-6诱导白血病细胞Jurkat和U937凋亡过程中的作用。方法:MTT法检测mDRA-6对Jurkat和U937细胞的生长抑制作用;以Caspase抑制剂Z-VAD-FMK和JNK抑制剂SP600125进行干预,采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术定量分析Jurkat和U937细胞凋亡;利用免疫印迹技术检测mDRA-6作用下凋亡细胞的JNK蛋白的表达情况。结果:mDRA-6对Jurkat和U937细胞具有明显的生长抑制作用;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测显示,10μg/ml的mDRA-6作用Jurkat和U937细胞3小时,其凋亡率分别为62.62%和35.65%,JNK抑制剂干预后细胞凋亡明显增加;免疫印迹技术检测显示,mDRA-6作用细胞5分钟后JNK即呈现活性片段表达,并随作用时间的延长其活性增强,而Caspase全抑制剂干预后,5、15分钟JNK磷酸化增强,但随后随时间递减。结论:mDRA-6抑制Jurkat和U937细胞生长并诱导其凋亡,其凋亡过程中有JNK的激活并发挥抗凋亡作用。
- 蔡静李淑莲王靖王赟袁艳军蒋祺秦方园马远方
- 关键词：JNK白血病细胞凋亡
- OCILRP2-Fc对小鼠内毒素血症的保护作用
- 研究背景:固有免疫系统识别病原菌的成分尤其是革兰阴性菌的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)可以启动机体的炎症反应,严重时可发生败血症,导致感染性休克、多器官功能衰竭、弥漫性血管内凝血等。通过干扰LPS...
- 杨菲柴立辉吴素霞李伟华马远方
- 关键词：脂多糖败血症核因子-ΚB
- 文献传递
- 大鼠多次采血常用的三种方法探讨被引量：15
- 2013年
- 目的探讨大鼠在1天内或者短时间内需要多次采血常用的三种方法,提高大鼠实验的成功率。方法采用90只雄性Wistar大鼠,分别用眼眶后静脉采血法、颈静脉采血法及心脏穿刺采血法进行采血实验。结果眼眶后静脉采血法:采血0.2—0.3 mL/次,每只大鼠3—4次/d。颈静脉采血法:采血0.2—0.4 mL/次,每只大鼠6—8次/d。心脏穿刺采血法:采血0.3—0.4 mL,每只大鼠3—5次/d。结论三种采血方法取血量相对比较大,血液标本质量高,更利于大鼠的动物实验,但各有应注意的事项。
- 王明丽张晶王耀辉李淑莲马远方
- 关键词：采血方法
- 一种多轴式压伤模拟机
- 本发明公开了一种多轴式压伤模拟机，其包括压力系统、支撑组件、控制结构、电源结构与压紧结构；压力系统设置在支撑组件的内部，压力系统与支撑组件相连接；压紧结构设置在压力系统的内部，压紧结构与压力系统相连接；压紧结构与支撑组件...
- 王耀辉魏寅祥马远方顿国庆曹润张海龙张利杰赵丹王志增
