马钰
- 作品数：11 被引量：32H指数：2
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- 脂肪基质干细胞的分离培养及其作为软骨种子细胞的研究被引量：18
- 2007年
- 目的研究人体脂肪基质干细胞(ADSC)分离培养的方法,探讨其在体外向成软骨细胞诱导分化的能力。方法取临床吸脂所得脂肪组织,胶原酶消化分离后,接种于培养基中进行原代培养,传至一代时换软骨诱导培养液进行成软骨诱导分化,定期通过阿尔辛蓝染色、天狼猩红染色及免疫组化等方法进行证实。结果ADSC在体外成软骨诱导后,可向软骨细胞分化,经诱导的细胞可分泌软骨细胞特异性的Ⅱ型胶原以及硫酸蛋白多糖。结论在适当诱导条件下,ADSCs有向软骨细胞分化的潜能,为软骨组织工程种子细胞来源的研究提供了新方法。
- 马钰李青赵大庆王淑芳李望舟闵婕谷雨
- 关键词：脂肪基质干细胞软骨
- 冷冻保存人鼻中隔软骨被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨不同冷藏温度下保存成人鼻中隔软骨块活性的可行性。方法:实验于2005-03/09在解放军第四军医大学基础部病理与病理生理博士后流动站完成。取临床常规手术切除的成人鼻中隔软骨15块,切成大小约15mm×10mm,随机分成3组,每组5块。分别置入4℃,-20℃和-80℃冷冻保存,在保存24h,7d,14d,20d和30d时取材,进行软骨活性比较。①软骨样品于质量浓度为40g/L甲醛固定后制备石蜡切片,组织切片经苏木精-伊红染色和阿尔辛蓝染色后于光学显微镜下观察软骨细胞及软骨基质。②锥虫蓝排斥试验检测软骨细胞活性,根据下式求细胞活力:活细胞率(%)=活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%。结果:①软骨石蜡切片经苏木精-伊红染色和阿尔辛蓝染色后于光学显微镜下观察可见:冷冻保存24h时,各组软骨中大部分为活的软骨细胞充填软骨陷窝,软骨基质无明显变化,鼻中隔软骨活性程度较好。-80℃冷冻保存7d,-20℃保存14d及各组保存30d后,软骨细胞基本变性坏死,胞核消失,基质成份断裂、强度降低。4℃保存20d软骨中部有较多变性细胞,但软骨基质中酸性黏多糖及胶原成分无明显断裂现象。②-80℃冷冻保存软骨在保存24h时,软骨细胞活性为80%;保存7d时软骨基本失去活性,软骨细胞及基质变性坏死。-20℃保存软骨在保存24h时,软骨细胞活性为85%;14d后软骨基本失去活性。4℃保存软骨在保存24h至20d时仍保持较好活性,软骨细胞活性保持在60%以上,软骨细胞及基质成分无明显变化;保存30d时软骨活性降为20%左右。结论:4℃和-20℃在2周内保存是较好的鼻中隔软骨保存方法,而4℃保存法更具优越性,有望为临床提供一种较好的活性软骨保存方法。
- 赵大庆赵春晨江逊牛霞陈广生马钰李航李青
- 关键词：软骨鼻中隔冷冻保存
- 脂肪基质细胞体外分离培养及成软骨定向诱导被引量：1
- 2010年
- 背景:组织工程技术是解决软骨等组织缺损的理想途径,但其种子细胞的来源问题仍未很好地解决。目的:观察脂肪基质细胞体外分离培养及其在体外向成软骨细胞诱导分化的能力。方法:取新西兰白兔皮下脂肪组织,以胶原酶等消化分离获得脂肪基质细胞,以成软骨诱导培养液对其进行成软骨诱导分化,倒置显微镜下观察脂肪基质细胞体外培养传代情况;免疫组织化学、阿尔辛蓝染色、天狼猩红染色等方法观察脂肪基质细胞成软骨诱导可行性;MTT法观察脂肪基质细胞与诱导培养的脂肪基质细胞体外增殖情况。结果与结论:脂肪基质细胞可于体外分离培养,在成软骨诱导后,可定向分化为软骨样细胞,其可分泌软骨细胞特有的Ⅱ型胶原及酸性黏多糖。原代培养的脂肪基质细胞呈长梭形,胞核椭圆,第3天进入指数增长期,群体倍增时间为55h左右细胞在第4天进入平台期,体外传代培养9代后,细胞开始出现衰老征象;成软骨诱导细胞增殖速度显著增快,随诱导培养时间的延长,细胞体积明显增大,形态由长梭形变为宽大、多伪足的多角形,胞核亦变大,核仁明显,培养第2天进入指数增长期,群体倍增时间为30h左右,在第8天进入平台期,经体外传代培养15代后,细胞增殖速度减慢,开始出现衰老征象。提示脂肪基质细胞在一定条件下可定向分化为软骨细胞,可作为软骨组织工程种子细胞来源。
- 赵大庆李青马钰邓志宏乔莉卢连军邱建华
- 关键词：脂肪基质细胞软骨种子细胞软骨组织工程
- 病理学实习考核形式的改革与体会被引量：1
- 2007年
- 鉴于病理学实习考核的特点,对多媒体考核方式进行了有益的尝试。通过制作多媒体考试题库和课件,经过实践,具有省时、省力、保护标本、保证考试公平、准确等许多优点,多媒体考核的方式可以代替传统考核方式。
- 李擒龙李青闫庆国郭双平晏伟陈广生余璐马钰谷雨
- 关键词：病理学教学方法多媒体
- 人脂肪基质细胞形成淋巴结的体内实验
- 脂肪基质细胞(adipose derived stromalcells,ADSCs)是来源于脂肪基质,具有多分化潜能的多能干细胞,可以分化为软骨、骨、脂肪、纤维组织、神经、肝细胞等细胞。但其是否能分化为具有免疫功能的免疫...
- 李青赵大庆马钰王映梅张丽英李烦繁李航
- 关键词：人脂肪基质细胞淋巴结
- 文献传递
- 脂肪组织功能新发现被引量：8
- 2006年
- 李青马钰
- 关键词：脂肪组织脂肪细胞分泌内分泌器官脂肪因子生物活性物质组织器官
- 人脂肪基质干细胞复合藻酸钙体外构建工程软骨的实验研究
- 2011年
- 目的观察人脂肪基质干细胞(hADSC)复合藻酸钙凝胶体外构建工程软骨的可行性。方法取临床整形外科超声乳化的成人脂肪组织溶液,经消化、分离、培养得到hADSC,经成软骨诱导培养后与藻酸钠凝胶复合,使细胞终浓度为5×106/mL,然后滴入浓度200 mmol/L CaCl2溶液中,固化15 min形成藻酸钙凝珠,将其在离心管中悬浮培养8周,行大体、苏木精-伊红(HE)染色、Masson’s三色染色等组织学检测,观察组织工程软骨形成情况。结果 hADSC经成软骨诱导培养后复合藻酸钙凝胶可于体外较好地构建出组织工程软骨,形成软骨中有胶原及黏多糖等软骨特有基质成分。结论 hADSC可以作为软骨组织工程较理想的种子细胞,为软骨缺损的临床修复治疗提供了新的治疗方法。
- 赵大庆马钰李青韩宇邱建华
- 关键词：软骨藻酸盐
- EGFP-CIDE-3及D sRed1-CIDE-3融合基因真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达和定位被引量：2
- 2008年
- 目的:分别构建EGFP、DsRed1与CIDE-3的融合基因真核表达载体,观察其在人胚肾上皮细胞293T中的表达,确定CIDE-3的亚细胞定位。方法:分别以质粒pEGFP-C3、pDsRed1-N1及本实验室克隆得到的质粒pET28a(+)-CIDE-3为模板,PCR扩增EGFP、DsRed1 DNA片段及人CIDE-3基因的CDS序列,再分别将EGFP、CIDE-3及DsRed1、CIDE-3克隆入真核表达载体pShuttle-CMV中。酶切、测序鉴定后,经磷酸钙转染入293T细胞,通过荧光显微镜观察其在293T细胞中的表达,并利用荧光染料Bodipy 493/503定位脂滴,探讨CIDE-3与脂滴之间的关系。结果:酶切及DNA测序证实,重组质粒pShuttle-CMV-EGFP-CIDE-3和pShuttle-CMV-DsRed1-CIDE-3构建成功。荧光显微镜观察显示,pShuttle-CMV-EGFP-CIDE-3融合蛋白定位于细胞质,pShuttle-CMV-DsRed1-CIDE-3融合蛋白也定位于细胞质,并与脂滴存在共定位关系。结论:成功构建了重组质粒pShuttle-CMV-EGFP-CIDE-3和pShuttle-CMV-DsRed1-CIDE-3;两者均可在239T细胞中表达,融合蛋白分布于细胞质,并与脂滴存在共定位关系。
- 谷雨李青叶菁李烦繁闵婕张丽英马钰李航刘芳
- 关键词：融合蛋白EGFP293T细胞
- 体外保存人鼻中隔软骨活性的实验研究
- 目的观察用组织培养法保存人鼻中隔软骨块活性的可行性。方法取临床常规手术中切除的成人正常的鼻中隔软骨27块,软骨大小约20 mm×20 mm×2mm,以RPMI-1640液于 37℃培养保存,于保存7天、14天、21天、3...
- 赵大庆李青陈广生马钰李航
- 关键词：鼻中隔软骨
- 文献传递
- 脂肪组织与免疫关系研究的新进展
- 2009年
- 脂肪组织的功能不单纯是能量存储与能量释放。随着一些脂肪分泌因子的发现，脂肪的内分泌功能已成为研究的热点。人们发现脂肪细胞分泌的瘦素不仅调节机体的能量代谢和控制脂肪的积累，还参与调节单核细胞、巨噬细胞和淋巴细胞的免疫功能，是免疫反应中重要的细胞因子，脂肪细胞分泌的其他因子脂联素、抵抗素等的免疫调节作用也逐渐被发现。脂肪组织与Toll样受体、淋巴组织都存在着相互关系，这些都揭示了脂肪组织对机体的重要影响，随着对这一领域的研究不断深入，可能为某些疾病的治疗提供新的途径。
- 马钰李青赵大庆
- 关键词：脂肪组织免疫调节瘦素TOLL样受体
