马靖 作品数:12 被引量:127 H指数:5 供职机构: 中山大学 更多>> 发文基金: 博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 历史地理 政治法律 更多>>
药物诱导细胞凋亡时DNA检测技术的探讨 被引量:9 2000年 比较检测细胞凋亡时DNA变化的三种方法。方法 :联合采用Hoechst33342和PI荧光双染显微镜观察 ,DNA凝胶电泳和流式细胞仪测定三种方法检测甘草提取物诱导MGC 803细胞凋亡时DNA的变化。结果 :低浓度药物作用时 ,荧光显微镜下观察到DNA凝聚和PI排斥 ,但DNA电泳不出现Ladder断裂片段 ,4℃重悬后FCM才能检测到凋亡峰 ;高浓度药物作用时 ,DNA呈Ladder断裂 ,FCM检测到凋亡峰 ,但荧光显微镜下观察到PI着色和DNA凝聚共存。结论 :(1)应慎重使用依据PI着色区分凋亡和坏死细胞的方法;(2)有些情况下 ,凋亡细胞经乙醇固定后DNA断裂片段的逸出是一个缓慢的过程 。 马靖 庞大本 池旭生 彭文烈 徐安龙关键词:细胞凋亡 DNA断裂 药物诱导 钙池排空操纵的外钙内流决定甘草诱导MGC-803细胞凋亡 被引量:5 2001年 用 EGTA螯合胞外 Ca2 +和异搏定抑制钙通道 ,研究胞外 Ca2 +在甘草诱导 MGC- 80 3细胞中的作用 .流式细胞仪检测凋亡峰和 DNA ladder分析均表明 ,EGTA和异博定阻断细胞凋亡 .分别以 PI或 Rh1 2 3活染后的相应荧光强度表示细胞膜通透性和线粒性膜电位 (ΔΨm) .结果表明 ,细胞膜通透性增强和线粒体 ΔΨm 下降均为细胞凋亡的早期事件 ,EGTA和异博定均可抑制细胞膜通透性增强 ,但 EGTA促进线粒体 ΔΨm 下降 ,而异博定作用相反 .进一步经 PI和 Hoechst33342荧光双染后同时观察细胞膜通透性和细胞核形态 .结果表明 ,凋亡细胞均可 PI着色 ,EGTA和异博定完全阻断染色质凝聚 ,但不能完全抑制细胞膜通透性变化 .借助 Ca2 +探针 Fluo- 3/AM研究凋亡时胞内游离钙的时相变化 ,发现 Ca2 +升高也是细胞凋亡的早期事件 . EGTA和异博定轻微促进凋亡早期 Ca2 +升高 ,但抑制随后 Ca2 +的继续升高 .所有结果提示 ,钙池排空操纵的外 Ca2 +内流在甘草诱导 MGC- 80 3细胞凋亡中发挥决定性的作用 . 马靖 符乃阳 庞大本 彭文烈 徐安龙关键词:细胞凋亡 钙调控 甘草 胃癌细胞 胞外ATP:一种新的细胞凋亡诱导剂 被引量:8 2000年 符乃阳 马靖关键词:细胞凋亡 诱导剂 胞外ATP 甘草提取物体外选择性诱导几种人肿瘤细胞凋亡 被引量:58 2001年 目的:从体外诱导人肿瘤细胞凋亡的角度研究传统中药甘草的抗癌作用。方法:采用Hoechst33342染色观察染色体凝聚和流式细胞仪检测凋亡峰两种方法检测细胞凋亡。分别以Fluo3和Rh123为荧光探针,用流式细胞仪测定胞内游离钙和线粒体膜电位△Ψm变化。用免疫组化方法检测原癌基因cfos、cjun与cmyc表达量的变化。结果:甘草选择性诱导胃癌MGC803、肝癌HepG2、肺癌NSCLC与宫颈癌Hela等几种人肿瘤细胞凋亡。甘草处理的MGC803、HepG2和NSCLC细胞均观察到胞内游离钙升高和△Ψm的下降。有趣的是,甘草不能诱导胃癌BGC823细胞凋亡,但其胞内钙和△Ψm与凋亡细胞株具有同样变化规律。原癌基因cfos、cjun与cmyc的蛋白产物在甘草处理的MGC803细胞中明显上调。结论:甘草抗癌活性与诱导肿瘤细胞凋亡有关,胞内钙升高、△Ψm下降和cfos、cjun与cmyc蛋白表达上调参与甘草诱导肿瘤细胞凋亡的调控。 马靖 符乃阳 李玉梅 彭文烈 徐安龙关键词:甘草提取物 胞内钙 线粒体膜电位 原癌基因 基于体外诱导肿瘤细胞凋亡的抗癌中药快速筛选模型及细胞凋亡的钙信号调控 该论文将在以细胞凋亡作为靶点筛选抗癌中药和细胞凋亡中钙信号调控两个方面展开研究.该文一方面建立了一种高效合理的抗癌中药筛选模型,利用该模型首次筛选发现甘草具有诱导多种种瘤细胞凋亡的活性,并深入阐明了其调控机理;另一方面,... 马靖关键词:细胞凋亡 抗癌中药 甘草 钙信号 文献传递 基层警力优化配置研究——以X公安分局为案例 基层公安机关是维护社会稳定,保障人民生命财产安全的第一线队伍,但其内部管理及警力配置仍存在问题。因此,优化基层警力配置对提高警务效能,保证警力有效供给意义重大。本文首先依据来自X分局19个单位204个工作岗位的829位民... 马靖关键词:公安机关 警力配置 工作绩效 甘草提取物诱导胃癌MGC-803细胞凋亡的初步研究 被引量:39 2000年 目的 :研究甘草提取物诱导胃癌MGC 80 3细胞发生凋亡。方法 :用荧光双染、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪等方法 ,观察甘草提取物处理MGC 80 3细胞后细胞形态和染色质DNA等的变化 ,以双重免疫标记法和免疫组化法检测处理前后 p53基因表达的变化。结果 :激光扫描共聚焦显微镜观察到处于不同凋亡进程中的细胞 ;流式细胞仪检测到显著的凋亡峰 ,且凋亡百分率呈浓度、时间依赖性 ;高浓度甘草提取物处理的MGC 80 3细胞的DNA琼脂糖凝胶电泳呈现典型的“ladder” ;甘草提取物对p53基因表达没有影响。结论 :甘草通过p53非依赖途径诱导MGC 80 3细胞凋亡 ,可望作为一种新的细胞凋亡诱导剂用于胃癌的治疗。 马靖 彭文烈 梁东 庞大本 徐安龙关键词:胃癌 甘草提取物 MGC-803细胞 凋亡 甘草水溶物诱导MGC-803细胞凋亡中胞内Ca^(2+)、pH与线粒体△ψ_m的变化 被引量:5 2000年 Changes of intracellular Ca 2+ ,pH value and mitochondria membrane potential(△Ψ m) in the apoptosis of MGC 803 cells induced by water soluble constituents of Glycyrrhiza uralensis Fisch(WSCG) were investigated.MGC 803 cells were incubated with 0.5,0.75,1.0 and 1.5 g/L WSCG for 1,4,7,11,15,19 and 23 hours respectively.The percentage of apoptosis and intracellular Ca 2+ content increased in a dose and time dependent manner,except that the intracellular Ca 2+ content of 1.5 g/L WSCG treated cells started to decrease after 11 hours.The cells were alkalized after various treatments,except that 1.5 g/L WSCG treated cells turned to acidify after 11 hours.It was found that the mitochondria △Ψ m of all treated cells decreased drastically at the first hour,then kept decreasing slowly until the 23rd hour.The results indicated that intracellular Ca 2+ ,pH and mitochondria △Ψ m all played pivotal roles in the apoptosis of MGC 803 cells induced by WSCG. 马靖 李玉梅 庞大本 徐安龙关键词:甘草 细胞凋亡 胞内CA^2+ 线粒体PT孔参与甘草诱导MGC-803细胞凋亡的调控 被引量:3 2001年 不久前我们从中药中首次筛选发现了甘草能显著诱导胃癌MGC-803细胞凋亡,本文进一步研究甘草诱导MGC-803细胞凋亡过程中凋亡百分率、线粒体膜电位、胞内游离钙、DNA电泳和细胞膜通透性以及染色质DNA凝聚的时相变化,并研究了线粒体PT孔专一抑制剂环孢菌素A(CsA)对凋亡过程的影响。我们观察到,细胞膜通透性增强、胞内游离钙升高和线粒体膜电位下降为细胞凋亡的早期事件,先于凋亡峰出现、染色质凝聚和DNA电泳梯状条带出现,CsA明显抑制线粒体膜电位下降,细胞膜通透性增强和胞内游离钙变化,并极大程度地延迟细胞凋亡过程。结果提示,钙和CsA敏感性的线粒体PT孔开放参与甘草提取物诱导MGC-803细胞凋亡的调控。 马靖 庞大本 彭文烈 李玉梅 徐安龙关键词:甘草提取物 细胞凋亡 细胞凋亡中的钙调节 被引量:10 2001年 胞质Ca2 + 升高是细胞凋亡中Ca2 + 调节的经典模式 ,但近年来有证据表明胞质Ca2 + 下降同样能诱导细胞凋亡。目前研究发现 ,胞内Ca2 + 在细胞质、细胞核以及细胞钙库线粒体和内质网的动态平衡破坏和重新分布直接参与细胞凋亡信号的调控 ,而Bcl 2家族蛋白在细胞凋亡过程的胞内Ca2 + 调节及继后的一系列生理效应中发挥特殊作用。细胞凋亡中Ca2 + 调节的深入研究不但有助于阐明细胞凋亡的调控机理 。 马靖 符乃阳 徐安龙关键词:细胞凋亡 BCL-2 信号调控