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高雪: 作品数：12 被引量：23H指数：3; 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>; 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白2在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜中的表达: 2009年; 目的观察半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白2 (cysteine and giycine-rich protein 2,CRP2)在变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)小鼠鼻黏膜中的表达,探讨其在AR发病中的作用。方法20只BALB/C小鼠,随机分为AR模型组和正常对照组。用卵清蛋白作为变应原建立AR小鼠模型。采用免疫荧光组织化学染色方法观察CRP2在各组小鼠鼻黏膜的表达情况。结果CRP2主要表达于AR模型组小鼠鼻黏膜固有层细胞,表达明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CRP2可能在AR的发病中发挥一定的作用。; 淳于秀杰高雪邱建华乔莉李旭陈俊; 关键词：变应性常年性锌指半胱氨酸甘氨酸

胱硫醚-γ-裂解酶基因在大鼠耳蜗螺旋蜗轴动脉中的表达: 2007年; 突发性聋、噪声性聋以及老年性聋等都与耳蜗缺血有关。小脑前下动脉分出的螺旋蜗轴动脉是耳蜗供血的终末动脉，耳蜗的供血缺少侧支循环，当受到各种病理因素影响时，易发生微循环障碍而出现缺血性损伤。因此，研究耳蜗微循环调控特别是其自身调节能力是寻求解决缺血性耳蜗损伤的关键。; 高雪曹增玉查定军邱建华乔莉; 关键词：耳蜗缺血酶基因缺血性损伤小脑前下动脉

C57BL/6-gfp小鼠嗅球神经干细胞的培养鉴定及耳蜗核移植被引量：1: 2009年; 目的建立C57BL/6-gfp小鼠嗅球神经干细胞体外培养的方法,并初步应用于大鼠耳蜗核定位移植。方法培养C57BL/6-gfp小鼠胚胎嗅球神经干细胞,传代并进行分化实验及鉴定后将其立体定位注射于大鼠耳蜗核。结果所培养的神经干细胞生长良好,可稳定传代,能够分化为3种神经细胞。定位注射后可在局部见到绿色荧光阳性的细胞团。结论该方法培养的C57BL6-gfp小鼠胚胎嗅球神经干细胞可稳定传代并可以作为荧光标记细胞进行移植实验。; 陈阳王枫陈俊高雪米文娟邱建华; 关键词：荧光抗体技术转基因干细胞细胞移植耳蜗

大鼠csrp2基因真核表达质粒的构建及表达被引量：2: 2008年; 获得大鼠csrp2基因片段并构建真核表达载体。RT-PCR法从大鼠心脏组织中提取总DNA,并扩增出相应大小的csrp2 DNA片段,测序正确后克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),重组质粒酶切鉴定正确后以阳离子聚合物转染Cos-7细胞,分别以RT-PCR方法检测mRN-表达和间接免疫荧光技术检测目的蛋白的表达。结果构建了重组质粒pcDNA3.1(-)-csrp2,RTPCR结果证明csrp2可在Cos-7细胞中转录,用间接免疫荧光检测,表达有CRP2蛋白的细胞着染。成功构建了大鼠csrp2基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-csrp2,csrp2基因可以在Cos-7细胞中表达。; 高雪曹增玉查定军王枫邱建华; 关键词：转染真核表达

噪声暴露对豚鼠耳蜗c-fos基因表达的影响被引量：1: 2008年; 目的:观察噪声暴露后豚鼠耳蜗c-fos基因表达的变化.方法:选用健康雄性白色豚鼠32只,随机分为4组,1组为正常对照组,另3组为实验组.实验组在120 dB spL的4kHz窄带噪声中暴露4 h,分别测试噪声暴露后2,48,168 h及对照组豚鼠听性脑干反应(ABR).用免疫组织化学染色分析c-fos基因在耳蜗的表达情况,用计算机图像分析系统测量耳蜗c-fos蛋白的平均吸光度值.结果:噪声暴露后豚鼠ABR阈值及耳蜗中c-fos蛋白的平均吸光度值较正常组均增大;随着时间的延长ABR阈值及c-fos蛋白的平均吸光度值均逐渐恢复,168 h组的ABR阈值及c-fos蛋白的平均吸光度值均低于2 h组和48 h组.结论:噪声暴露后耳蜗c-fos基因表达增高,可能与噪声暴露后耳蜗毛细胞、螺旋神经节等结构的损伤修复有关.; 查定军薛涛乔莉刘大顺高雪陈俊邱建华; 关键词：C-FOS基因耳蜗噪声

建立大鼠前庭器官体外培养模型及观察佛波酯作用下的超微结构变化: 2007年; 目的：建立大鼠前庭器官的原代体外培养模型，并通过透射电镜观察前庭上皮细胞在佛波酯（PMA）作用前后的超微结构变化．方法：无菌条件下取出生2d大鼠的椭圆囊上皮，体外培养1～7d；从第2日开始用倒置显微镜观察、照相，试验组加入PMA30min，2h和6h，固定，透射电镜观察．结果：体外培养椭圆囊1wk，12h时可见成纤维细胞沿移植物边缘游出，2d后内皮细胞聚集，呈铺路石样，透射电镜观察细胞无肿胀，胞膜、胞核完整，线粒体嵴无肿胀，纤毛无脱落；PMA各试验组细胞形态正常，核糖体密集，高尔基体较前发达，内质网轻度扩张．结论：大鼠前庭器官体外培养方法可行，为今后进一步研究提供了实验模型．; 孙景豫盛宏申高雪刘顺利邱建华; 关键词：前庭器官培养技术佛波醇酯类

小鼠CSRP2基因的克隆、融合表达及蛋白的分离纯化被引量：1: 2007年; 目的:获得小鼠CSRP2(cysteine rich protein 2)基因片段,高效表达、纯化CSRP2。方法:用RT-PCR技术从小鼠心脏组织中提取总DNA并扩增出相应大小的CSRP2 DNA片段,将其与pGEM-T-easy载体连接后测序,将测序正确的CSRP2从BamHⅠ和HindⅢ酶切位点克隆入原核表达载体pRSET-A,将连接产物转化大肠杆菌BL21,挑出阳性克隆,IPTG诱导表达重组的6×His融合蛋白,对重组融合蛋白通过镍柱进行纯化。结果与结论:PCR获得的CSRP2序列与GenBank报道的一致(为675 bp);重组载体在大肠杆菌BL21中以包涵体形式高效表达;融合蛋白经SDS-PAGE和Western blot分析,在相对分子质量约24×103处有特异的蛋白条带,目的蛋白表达量占菌体总蛋白量的25%;重组蛋白经镍柱纯化后,得到了高纯度的CSRP2融合蛋白。; 高雪薛赢孙景豫邱建华; 关键词：CYSTEINE RICH PROTEIN RT-PCR 纯化

语前聋耳蜗植入术后言语理解力的单因素分析被引量：5: 2009年; 目的调查语前聋儿童耳蜗植入后言语理解力及其相关因素。方法问卷调查接受人工耳蜗植入的47例语前聋患儿及其家庭,对相关因素进行Fisher检验。结果影响聋儿交流能力和言语理解力的因素有植入时年龄、助听开始年龄、耳蜗植入后语训时间和开机时间长短。结论在言语习得最佳时期以前佩带助听器、选择合适植入年龄、合理进行术后语训对言语康复有重要影响。; 王方园陈阳邱建华温立婷高雪李旭高磊; 关键词：人工耳蜗植入术影响因素

C57BL/6-gfp小鼠嗅球NSC培养及定位注射方法的建立: 2009年; 目的建立一套稳定的绿色荧光蛋白转基因小鼠(C57BL/6-gfp)嗅球神经干细胞(NSC)体外培养的方法,并初步应用于定位注射试验,为干细胞移植治疗神经性耳聋的实验研究奠定基础。方法培养C57BL/6-gfp小鼠胚胎嗅球NSC,传代并进行分化实验,鉴定后将其立体定位注射于大鼠耳蜗核。结果所培养的NSC生长良好,可稳定传代,能够分化为三种神经细胞。定位注射后可在局部见到绿色荧光阳性的细胞团。结论该方法培养的C57BL/6-gfp小鼠胚胎嗅球NSC可稳定传代并可作为荧光标记细胞进行移植试验。; 王枫陈阳陈俊高雪米文娟邱建华; 关键词：绿色荧光蛋白转基因小鼠

内耳畸形人工耳蜗植入术后听力言语康复效果分析被引量：10: 2009年; 目的:使用听觉和言语问卷分级及术后产生听觉的最小电流值(T值)的方法,评估并比较内耳畸形与正常解剖结构语前聋患儿人工耳蜗植入术后的听觉言语康复效果。方法:按术前影像学检查将语前聋人工耳蜗植入患儿分为正常结构组和内耳畸形组,并配对组合,对患儿家长进行问卷形式调查随访,对术后听力及言语康复效果进行评估分析,记录术后1年调机T值。用秩和检验比较2组听觉行为分级标准(CAP)、言语可懂度分级标准(SIR)结果及T值。结果:人工耳蜗植入患儿家长术前主要担心术后效果不理想及手术并发症的发生,多数认为听力言语康复训练应由医疗机构进行;秩和检验显示:2组CAP及SIR均无显著差异,术后1年调机时产生听觉的T值无显著差异。结论:①内耳畸形患儿人工耳蜗植入术后,经正规康复训练,听力言语康复效果与内耳解剖结构正常植入者相同,人工耳蜗植入术可帮助伴耳蜗畸形的极重度感音神经性聋患者重建听力,重返主流社会;②听力言语康复训练尚有很多方面需要改进。; 李旭陈阳王方圆温立婷高雪邱建华; 关键词：人工耳蜗植入术语前聋畸形康复

高雪

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