刁小龙
- 作品数：15 被引量：58H指数：4
- 供职机构：甘肃农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 鸡PrP结构特征及在鸡胚发育过程中的表达规律
- 【目的】本研究拟对鸡PRNP基因及其推导氨基酸序列进行结构分析,通过比较ChPrP同HuPrP结构的异同点,推测ChPrP不产生PrPSc构型的结构基础,为进一步分析PrP的构象转变机制提供参考;建立用于检测鸡PRNP基...
- 刁小龙
- 关键词：结构特征鸡胚实时荧光定量PCR
- 文献传递
- 朊蛋白生理功能研究进展被引量：3
- 2012年
- 朊蛋白作为一种高度保守的细胞膜糖蛋白,广泛分布于机体各组织器官,参与信号跨膜传导、细胞黏附、铜离子代谢、抗细胞凋亡、抗氧化应激等过程。近年来,随着对朊蛋白结构、生理功能、变构机制等的深入研究,对它的认识已不再局限于一种单纯的致病因子,朊蛋白在遗传进化、生理功能上所表现出的重要作用已成为新的研究热点。我们首先分析了朊蛋白的细胞定位、转运及组织分布,其次对朊蛋白在神经系统、肿瘤发生、胚胎发育过程中发挥的生理功能做简要介绍,最后对该蛋白的研究前景进行了展望。
- 刁小龙吴润
- 关键词：朊蛋白生理功能
- 鸡朊蛋白序列分析及结构特征探究被引量：2
- 2010年
- 目的分析罗曼鸡朊蛋白高级结构,探讨朊蛋白病种间屏障形成机制和朊蛋白构象转变机理。方法根据Gen-Bank提供的鸡朊蛋白基因序列设计特异性引物,扩增出8只罗曼鸡朊蛋白基因的完整开放阅读框(ORF)。结果序列分析表明8只罗曼鸡朊蛋白基因ORF有两处发生碱基置换(243C→T,296A→G),其中243位点为同义码替换。应用生物信息学工具分析罗曼鸡和已知的68个物种的朊蛋白基因,获得基于PrP氨基酸序列的遗传进化信息,进一步依据同源建模法构建人和鸡朊蛋白三维结构模型。结论不同物种朊蛋白构象同源性在很大程度上决定了朊蛋白病种间屏障的形成,多种因素共同作用导致正常朊蛋白转变为致病型构象。
- 刁小龙吴润刘磊王川赵春林王雄管宏伟
- 关键词：罗曼鸡朊蛋白
- 分子信标实时荧光定量PCR构绵羊PrP基因质粒和标准曲线被引量：6
- 2011年
- 目的为能够用实时荧光定量PCR研究消化系统PrP mRNA的表达水平,构建目的基因PrP的标准品质粒和标准曲线。方法根据GenBank中绵羊基因编码区保守序列,设计特异性引物和分子信标探针;提取总RNA,经反转录、RT-PCR后,提取质粒,PCR-SSCP及测序鉴定,获得ARQ质粒;将质粒梯度稀释,进行荧光定量PCR,获得标准曲线及回归方程。结果结果显示,本实验设计的分子信标具有特异性强、灵敏度高和结果准确的特性;标准曲线相关系数r2=0.999,表明线性关系好,成功构建了目的基因的标准品质粒和标准曲线。
- 王川吴润李发弟刁小龙赵春林王芳
- 关键词：PRPRT-PCR实时荧光定量PCR质粒绵羊
- 一种绵羊PRNP等位基因密码子的分型方法
- 本发明公开了一种绵羊PRNP等位基因密码子的分型方法，包括：以提取的绵羊血液基因组DNA为模板，使用寡核苷酸作为引物，通过巢式PCR方式扩增外侧引物；稀释扩增产物，并以得到的扩增产物稀释物为模板，以所述序列A作为上游引物...
- 吴润刘磊李发弟张小丽赵春林王芳贾晓蕊王川刁小龙
- 文献传递
- 韭菜抗常见病原菌活性成分初步筛选被引量：2
- 2011年
- 以韭菜为试材,采用水蒸汽蒸馏提取法与有机溶剂萃取法分别提取韭菜抑菌成分,并通过体外抑菌试验检测不同提取成分的抑菌活性,确定其体外最小抑菌浓度.结果表明:韭菜乙酸乙酯萃取物与韭菜挥发油都具有广谱的抑菌活性,且对不同细菌的最小抑菌浓度不同.
- 呼志斌王雄吴润张莉赵春林刁小龙管宏伟
- 关键词：韭菜提取液常见病原菌体外抑菌
- 青海省藏犬和野生狐狸棘球绦虫感染调查及虫种分子鉴定被引量：1
- 2012年
- 为了解青海省藏犬和野生狐狸的棘球绦虫Echinococcus感染状况及感染种类，本研究在青海省7个地区调查了175条藏犬和28只野生狐狸，对感染藏犬和野生狐狸的21株棘球绦虫分离株，线粒体DNA（mtDNA）的COI、NDI基因种属特异性序列进行了研究。结果表明，16条藏犬感染棘球绦虫，感染率为9．14％。5只野生狐狸感染棘球绦虫，感染率17．86％。测定的棘球绦虫mtDNA的COI、NDI基因片段长度分别为285、507、510bp，通过基因序列分析，发现青海省存在3种棘球绦虫混合感染，藏犬存在Echinococcusgranulosusgenotype1（E．g1）和Echinococcusmultilocularis（E．m）感染，部分藏犬存在E．g1和E．m混合感染，野生狐狸存在E．m和Echinococcusshiquicus（E．5）感染。检测的21株棘球绦虫分离株中，E．gl11株，占52．4％，E．m6株，占28．6％，E．s4株，占19．O％。COI基因存在15个不同的基因序列，种内变异率小于2．5％，种间变异率大于8．2％。NDI基因存在17个不同的基因序列，种内变异率小于1．6％，种间变异率大于17．3％。
- 朵红黄福强冯凯刁小龙付永沈秀英彭毛赵海龙野中成晃郭志宏更求久乃尼玛河生德常明华李伟吴润
- 关键词：藏犬棘球绦虫线粒体DNA
- 禽白血病病毒的多重PCR检测引物及其应用
- 本发明公开了一种禽白血病病毒的多重PCR检测引物，包括检测禽白血病病毒A亚群、B亚群和J亚群的检测引物，同时，公开了多重PCR的反应体系和反应条件。本发明所提出的检测方法具有快速、准确、廉价的优点。
- 吴润管宏伟万学瑞张小丽刘磊贾晓蕊刁小龙罗鹏何轶群
- 文献传递
- 禽白血病病毒多重PCR检测法的建立及初步应用被引量：3
- 2012年
- 根据GenBank中登录的禽白血病病毒A、B、J亚群的核苷酸序列设计合成了3对引物,各对引物可分别扩增出大小约为195、260、924bp的核苷酸片段;经优化建立禽白血病病毒多重PCR检测法,并进行其敏感性试验及对马立克病病毒(MDV)、火鸡疱疹病毒(HVT)、新城疫病毒(NDV)、传染性囊病病毒(IBDV)、传染性喉气管炎病毒(ILTV)、传染性支气管炎病毒(IBV)和DF-1细胞基因组的特异性试验;应用该方法对1 294份临床样品进行禽白血病病毒检测,对阳性检出样品抽样进行测序鉴定.结果表明:该方法的最小检出拷贝数为103,特异性试验均为阴性,检出临床样品中的核苷酸片段与参考毒株核苷酸序列的同源性达98%以上,符合率100%,具有良好的特异性、敏感性和符合率,可为禽白血病病毒感染的临床诊断及流行病学调查研究提供有效借鉴.
- 管宏伟吴润赵春林刁小龙罗鹏何轶群
- 关键词：禽白血病病毒多重PCR检测核苷酸
- PRNP基因SYBR GreenⅠ双标准曲线法荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用被引量：5
- 2013年
- 为建立双标准曲线法荧光定量PCR检测方法,以PRNP为目标基因、β-actin为内参基因进行扩增,将扩增产物连入pMD18-T载体,获得阳性标准品进行定量扩增。并将MDV标准毒株MD5、疫苗株CV1988和1株野毒株接种CEF,收集不同日龄病变细胞以提取RNA,用以上方法进行扩增。把结果代入标准曲线公式进行计算,分析PRNP基因表达与MDV致瘤的相关性。结果显示,该方法能检测出的PRNP基因和β-actin基因的最低拷贝数为1×103,特异性和重复性较好。相对于对照组,接种3株毒株的PRNP的表达量都有明显的差异。表明MDV的感染对PRNP的表达量确实存在影响。据此推测PrPC对MDV的感染可能发挥着重要的生理功能。
- 艾文娜吴润刁小龙
- 关键词：实时荧光定量PCR
