刘昊英
- 作品数：8 被引量：30H指数：3
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- 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 小麦TaMBD2原核表达载体的构建和诱导表达被引量：3
- 2008年
- 构建了小麦甲基结合域蛋白基因TaMBD2的原核表达载体pGEX-TaMBD2,并在大肠杆菌BL21(DE3)工程菌株中优化了融合蛋白GST-TaMBD2的诱导表达条件。结果表明,用0.3、0.5和1.0mmol·L-1的IPTG诱导后,融合蛋白GST-TaMBD2均能有效表达,以1.0mmol·L-1 IPTG诱导的效果最好;从诱导表达的时间来看,3种浓度IPTG诱导1h后融合蛋白均开始表达,且表达量随着诱导时间的延长而逐渐增加,但在诱导6h后的表达量增加幅度不大,因此确定诱导融合蛋白GST-TaMBD2表达的最佳IPTG浓度为1.0mmol·L-1,诱导时间为6h。
- 孟凡荣司志飞刘昊英张问李永春尹钧
- 关键词：小麦原核表达
- 干旱胁迫下植物的信号转导及基因表达研究进展被引量：19
- 2008年
- 干旱是影响植物生长的主要因素之一,研究植物在干旱胁迫下的反应机制具有重要的现实意义。ABA、H2O2和NO在植物响应干旱胁迫反应中可能作为信号分子的作用。在干旱胁迫下,植物由"渗透感受器"感受外界胁迫信号,通过第二信使及其下游蛋白激酶级联传导反应,调控了一系列基因的表达。根据干旱信号转导过程中胁迫相关基因的表达是否依赖ABA,存在依赖ABA和非依赖ABA两途径。综述了植物干旱胁迫信号的感知、传递及其诱导的基因表达调控等方面的研究进展,对植物抗旱性的分子机理进行了展望。
- 王静英李永春尹钧刘昊英司志飞
- 关键词：干旱胁迫植物信号转导
- 小麦TaMBD4基因的克隆、结构及表达的初步分析被引量：1
- 2008年
- 以拟南芥MBD基因的EST为基础,采用电子克隆并结合RT-PCR方法分离克隆了包含开放阅读框的小麦甲基结合域蛋白基因TaMBD4。序列分析显示,TaMBD4蛋白有典型的甲基结合域。组织表达特性分析表明,TaMBD4在干种子和胚乳中的表达量高于其它组织。TaMBD4的cDNA和基因组DNA比较分析显示,此基因包括1个内含子,进一步分析表明这个内含子为2个GGCAGT序列的串联重复,推测该内含子可能与TaMBD4基因的转录后调控相关。
- 孟凡荣刘昊英司志飞尹钧李永春
- 关键词：DNA甲基化小麦克隆
- 小麦甲基结合蛋白基因MBD3重组表达载体的构建和原核表达被引量：1
- 2008年
- DNA甲基化在基因表达调控过程中发挥重要作用,甲基结合蛋白(Methyl-Binding Domain Protein,MBD)是能特异识别甲基化位点的反式作用因子。开展植物MBD基因的功能研究对于探讨植物生长发育的表观遗传学调控机制具有重要意义。该研究构建了小麦甲基结合蛋白基因MBD3的原核表达载体pGEX-4T-MBD3,转化大肠杆菌BL21(DE3)工程菌株,在37℃,1mMIPTG浓度条件下,成功诱导表达了的GST-MBD3融合蛋白,大小为49.6kDа,这为进一步开展MBD3的蛋白纯化和功能分析奠定了基础。
- 孟凡荣司志飞刘昊英张问
- 关键词：原核表达
- 水稻甲基结合蛋白基因MBD701的克隆及原核表达被引量：2
- 2012年
- 甲基结合域蛋白MBD作为与甲基化位点特异结合的重要反式作用因子,在植物生长发育中发挥着重要的调控作用.为了探讨MBD基因的结构与功能,利用RT-PCR方法克隆了水稻中编码甲基结合蛋白基因MBD701,构建了MBD701的原核表达载体pGEX-MBD701,并在大肠杆菌BL21(DE3)工程菌株中实现了融合蛋白GST-MBD701的表达.结果表明,MBD701除了包含典型的甲基结合域(第138～212)外,还包含CW的锌指结构(第73～132);在37℃,1 mmol/L IPTG浓度条件下成功诱导表达了大小为65.87 kD的GST-MBD701融合蛋白,这为进一步开展MBD701的蛋白纯化和功能分析奠定了基础.
- 张艳霞贾海英司志飞刘昊英孟凡荣
- 关键词：水稻甲基结合蛋白基因克隆原核表达
- 两个小麦MBD基因的克隆、植物表达载体的构建及遗传转化
- DNA甲基化在基因表达、植物细胞分化以及系统发育中起着重要的调控作用,MBD是与DNA甲基化结合的重要反式作用因子,在植物的生长发育过程中发挥着重要的调控功能。本论文结合电子克隆和RT-PCR方法克隆了两个编码甲基结合蛋...
- 刘昊英
- 关键词：DNA甲基化MBD小麦基因克隆
- 文献传递
- 植物DNA的甲基化及其生物学功能被引量：4
- 2007年
- DNA甲基化是生物体内普遍存在的一种基因修饰现象,在生物体内发挥着重要的生物学功能。大量研究表明,DNA甲基化不仅可以遗传,而且存在特定的动态变化模式。综述了植物DNA甲基化的特点、模式以及它们与植物生长、发育和基因表达调控的关系。
- 孟凡荣司志飞刘昊英
- 关键词：植物DNA甲基化生长发育
- 不同小麦品种幼胚愈伤诱导及适宜草甘膦浓度的筛选被引量：2
- 2013年
- 以6个小麦品种(郑麦9023、郑麦366、周麦18、矮抗58、花培5号、花培8号)幼胚为外植体,研究了不同基因型间幼胚愈伤组织诱导、分化成苗以及对草甘膦敏感性的差异。结果表明,品种间出愈时间和初始分化时间有明显差异,花培5号和花培8号的出愈和初始分化时间最短,成苗率较高,可作为优良的受体材料。设置0,1,2,3,4 mmol/L5种草甘膦浓度研究不同小麦品种对草甘膦的敏感性,结果显示,小麦幼胚愈伤分化期与诱导筛选阶段相比,褐化死亡较明显,是理想的筛选时期。草甘膦浓度为3 mmol/L时,郑麦9023、周麦18、郑麦366的分化率与对照相比呈现显著差异,而与4 mmol/L时这3个品种的分化率无显著差异。矮抗58在4种草甘膦筛选浓度下与对照相比分化率逐渐降低,在4 mmol/L时分化率为2.08%,大部分的愈伤生长受到抑制。花培5号和花培8号与其他几个品种相比,对草甘膦更加敏感,筛选浓度为2 mmol/L时与对照相比分化率显著降低,分别为3.42%和4.17%。因此,在愈伤分化时期用草甘膦筛选时,郑麦9023、郑麦366、周麦18适宜的筛选浓度为3 mmol/L,矮抗58为4 mmol/L,花培5号和花培8号为2 mmol/L。
- 杨丽荣全鑫薛保国雷振生赵献林晁岳恩刘昊英鹿莉
- 关键词：小麦幼胚愈伤组织草甘膦
