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排序方式：

人类肥胖基因瘦素蛋白的原核表达被引量：2: 2003年; 目的 :原核表达人类肥胖基因瘦素蛋白。方法 :以携人类肥胖基因的 p UC119- ob为模板 ,PCR扩增瘦素蛋白基因片段 ,并克隆到 p ET- 32 a构建重组表达质粒 p ET- 32 a- ob,经酶切和测序鉴定后 ,转化至大肠埃希菌 DH5 α中表达 ,SDS- PAGE电泳鉴定表达产物。结果 :测序和限制性分析均证明了 p ET- 32 a- ob的序列正确 ,转化的 DH5 α可高效表达一个 30 k D融合蛋白 ,与预期结果一致。结论 :经 p ET- 32 a- ob转化的DH5 α可有效表达重组人类瘦素蛋白。; 刘雪梅刘建宇魏兰兰肖鹏张凤民谷鸿喜; 关键词：原核表达生物活性

HPV16地方分离株E6基因的克隆与原核表达研究: 2007年; 目的克隆人乳头瘤病毒（HPV16E6）基因并在大肠埃希菌中表达，对表达产物进行鉴定。方法用PCR方法从克隆质粒pUC19-HPV16E6E7中扩增HPV16E6基因，采用定向克隆构建pQE30-HPV16E6原核表达质粒．利用酶切和序列测定鉴定重组质粒。将pQE30-HPV16E6转化大肠埃希菌BL21（DE3），建立重组工程菌pQE30-HPV16E6／BL21（DE3）。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导，SDS—PAGE分析蛋白表达情况，利用Western blot鉴定抗原特异性。结果PCR产物470bp，重组质粒经酶切和序列测定证实构建正确。SDS—PAGE分析在18×10^3处有蛋白条带出现，与预期一致。Western blot分析证实目的条带与HPV16E6抗体有特异性反应。结论成功构建了HPV16E6基因的基因工程菌株，能高效表达E6蛋白，表达蛋白具有良好的免疫反应性。; 商庆龙刘雪梅王燕李承刚邵迪陈思佳韩聪谷鸿喜; 关键词：大肠杆菌

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刘雪梅