吉荣
- 作品数：23 被引量：149H指数：7
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划江苏省科委自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 马立克氏病病毒CV1988株pp24基因的克隆与表达被引量：1
- 2003年
- 根据马立克氏病病毒 (MDV)国际参考强毒GA株 pp2 4基因序列 ,设计和合成了一对引物 ,其两端分别含SalI和EcoRI的酶切位点。以CV1988株基因组DNA为模板 ,通过PCR技术 ,扩增其pp2 4基因。PCR产物经纯化后 ,按正确的阅读框架定向克隆到表达性载体pGEX_6P_1中谷胱甘肽转移酶 (GST)基因的下游 ,并用序列测定验证。将重组质粒转化的大肠杆菌BL2 1,在 1.0mMIPTG和 37℃条件下诱导 ,GST_pp 2 4基因获得了表达。诱导菌体的裂解物经 12 %的SDS聚丙烯凝胶电泳 (SDS_PAGE)和Westernblot试验验证 ,得到大小为 4 3kD的融合蛋白 ,与预期大小一致。将该融合蛋白的凝胶带切下研碎后免疫小鼠三次后 ,其血清与MDV感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF)
- 李余慰崔治中吉荣秦爱建
- 关键词：克隆马立克氏病病毒
- REV分离株囊膜糖蛋白基因的克隆及序列分析被引量：9
- 2003年
- 根据网状内皮组织增生症病毒 ( REV) SNV株 env基因的序列 ,设计并合成了 2对引物 ,利用该引物 ,以中国地方分离株 SD990 1、HA990 1前病毒基因组 c DNA为模板 ,通过 PCR技术 ,成功地从国内分离的 2株 REV毒株中扩增出env基因 ,并将其克隆到 p UCm-T载体中测序。将所得序列与 SNV株进行比较 ,分析其同源性。结果表明 :在核苷酸水平上 ,参考株 SNV株的 env基因与 2株中国分离株的同源性分别为 97.7%和 95 .0 % ;在氨基酸水平上 ,其同源性分别为 96.9%和 92 .7%。分析进化关系 ,HA990
- 吉荣赵文明钱莉李余慰崔治中
- 关键词：禽网状内皮组织增生症病毒囊膜糖蛋白基因克隆REV
- 用鼠抗鸡贫血病毒VP1的多抗血清检测病毒感染的间接免疫荧光法的建立和应用
- 鸡贫血病毒(CAV)的感染已广泛存在,它主要引起感染雏鸡的直接死亡和感染成鸡强烈的免疫抑制。CAV及早诊断是控制该痛的首要工作。CAV编码三个蛋白,即VPl(衣壳蛋白)、VP2、和VP3(细胞凋亡素,apoptin),V...
- 刘岳龙金文杰吉荣叶建强秦爱建崔治中段玉友
- 关键词：VP1蛋白
- 文献传递
- 鸡贫血病毒细胞凋亡素基因的原核表达及其免疫学活性被引量：3
- 2002年
- 将鸡贫血病毒 (CAV)细胞凋亡素基因克隆入表达性载体 p GEX- 5 X- 3,在大肠杆菌中以融合蛋白的形式获得表达。再以表达产物免疫小鼠 ,制备抗 CAV凋亡素的多克隆抗体。以其对 CAV感染的 MSB1细胞作间接免疫荧光试验(IFA)检测呈阳性 ,表明表达产物保留了其相关的天然抗原特性。
- 刘岳龙秦爱建金文杰叶建强吉荣崔治中段玉友
- 关键词：原核表达免疫学活性鸡贫血病毒间接免疫荧光试验基因克隆
- 马立克氏病病毒疫苗CVI988株囊膜糖蛋白gI基因的序列分析被引量：3
- 2000年
- 根据马立克氏病病毒 ( MDV)国际标准株 GA株的基因序列设计合成了可扩增 g I基因 ( 1 0 60 bp)的引物 .用 PCR技术 ,以 CVI988基因组为模板 ,扩增得到了预期大小的 PCR产物 .将此 PCR产物和p U C1 8经同样的限制性内切酶 Kpn 和 Bam H 处理后 ,连接、转化、鉴定 ,得到了含有 g I基因的质粒 .将此质粒进行序列分析 ,比较了它与其他强毒和超强毒株的同源性 .用 DNAstar软件对其编码的氨基酸的疏水性和抗原性进行了预测 .
- 丁家波赵文明崔治中韦平吉荣卢银华
- 关键词：囊膜糖蛋白抗原性疫苗GI基因
- 表达马立克氏病病毒gI基因重组鸡痘病毒的免疫原性被引量：8
- 2002年
- 以鸡痘病毒为载体,构建含马立克氏病病毒(MDV)gI基因的重组鸡痘病毒(rFPV),并在鸡胚成纤维细胞(CEF)中表达gI基因,用重组FPV(命名为rFPV MDV648gI)感染CEF,结果显示:rFPV MDV648gI能在CEF中稳定复制。进一步用rFPV MDV648gI接种无特定病原(SPF)鸡皮下组织,结果表明:鸡对rFPV MDV648gI具有抗体反应性。
- 陈志琳崔治中秦爱建张志吉荣刘岳龙金文杰
- 关键词：马立克氏病病毒重组鸡痘病毒免疫原性
- 禽网状内皮组织增生症病毒囊膜糖蛋白gp90的原核表达被引量：18
- 2003年
- 根据禽网状内皮组织增生症病毒 (REV) SNV株的前病毒基因组 c DNA序列 ,设计并合成 1对引物 ,以 SNV株前病毒 c DNA全基因组克隆为模板 ,通过 PCR技术 ,扩增出该病毒囊膜糖蛋白 (env) gp90基因部分片段。将 PCR产物按正确的阅读框架定向克隆进 p GEX- 5 X- 3载体中谷胱甘肽 - S-转移酶 (GST)的下游 ,将重组质粒转化进宿主菌BL2 1 中 ,在 1.0 mm ol/ L IPTG(37℃ )诱导下 ,gp90基因部分片段以融合蛋白的形式获得了良好的表达。表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定 ,确定其表达的融合蛋白相对分子质量为 6 40 0 0。将表达产物从凝胶中回收后免疫小鼠 ,所得的抗血清可与 REV野毒株感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF)在免疫荧光试验中起反应。由此表明 ,体外表达的 SNV株gp90 - GST融合蛋白保留了天然蛋白所具有的抗原性。
- 吉荣崔治中丁家波秦爱建刘岳龙金文杰
- 关键词：禽网状内皮组织增生症病毒原核表达
- 鸡贫血病病毒VP_2基因在大肠杆菌中的表达及其特性被引量：1
- 2003年
- 将鸡贫血病病毒 (chicken anaem ia virus,CAV) VP2 基因克隆入表达性载体 p GEX- 5 X- 3,在大肠杆菌以谷胱甘肽转移酶 (GST)融合蛋白的形式获得了表达。以此表达产物免疫小鼠 ,制备抗 CAV VP2 的多克隆抗体。通过对 CAV感染的 MSB1细胞作间接免疫荧光试验 (IFA)检测 ,结果为阳性 ,这表明表达产物保留了 CAV相关的抗原特性。本研究为进一步探索 CAV VP2 的生物学特性奠定了基础。
- 刘岳龙秦爱建金文杰叶建强吉荣崔治中段玉友
- 关键词：鸡贫血病病毒VP2基因大肠杆菌
- 马立克氏病病毒广西株G2囊膜糖蛋白gI基因的克隆和表达被引量：8
- 2001年
- 根据马立克氏病病毒 ( MDV)强毒株 GA的基因序列 ,设计并合成了 1对引物 ,以强毒株 G2基因组DNA为模板 ,通过 PCR技术 ,扩增其囊膜糖蛋白 g I基因阅读框 ( ORF)中 ,除去其 N-端编码疏水区 1 6 5个碱基对 ( bps)以外的部分 ;将 PCR产物按正确的阅读框架定向克隆到表性载体 p GEX-6 P-1中谷胱甘肽转移酶( GST)基因的下游 ;将重组质粒转化入大肠杆菌 BL2 1 株 ,在 1 .0 mmol/L IPTG浓度和 30℃的条件下诱导 ,g I-GST基因融合蛋白获了理想的表达 ;经聚丙烯酰胺凝胶电泳和 Western-blotting试验 ,验证其表达的融合蛋白产物大小为预期的 6 30 0 0。将表达产物回收后免疫小鼠 ,所得抗血清可与 MDV感染的鸡胚成纤维细胞 ( CEF)在免疫荧光试验 ( FA)中 ,呈细胞膜阳性染色。试验结果表明 ,在大肠杆菌中表达的 G2株 MDV g
- 丁家波崔治中韦平卢银华赵文明韩凌霞吉荣
- 关键词：马立克氏病病毒GI基因抗原性囊膜糖蛋白
- 分子克隆化禽网状内皮组织增生症病毒传染性及其前病毒全基因组序列研究被引量：21
- 2005年
- 利用脂质体转染技术,将含有SNV株禽网状内皮组织增生症病毒(REV)前病毒全基因组cDNA克隆质粒转染鸡胚成纤维细胞(CEF)。用对REV的单克隆抗体和抗REV env-gp90的鼠血清作间接免疫荧光反应,在原始的转染细胞及随后传代的细胞中均显示病毒特异性抗原。而且,在连续传代细胞中的阳性率明显升高。用REV特异性引物对进一步传代后的细胞基因组作PCR,也检测出REV基因组。这些结果均表明所得到的分子克隆化病毒具有传染性,因而也进一步证明所用的质粒克隆包含有具感染性的全病毒基因组。对该全基因组cDNA克隆进行酶切所获得的数个亚克隆进行测序,并将序列进行拼接,完成了REV全基因组序列。REV的这个传染性克隆将有助于进一步研究REV的分子生物学特性。
- 吉荣崔治中王锡乐孙淑红
- 关键词：禽网状内皮组织增生症病毒测序
