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吴介恒: 作品数：19 被引量：64H指数：3; 供职机构：第四军医大学更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金陕西省科技统筹创新工程计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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CAR-T细胞治疗用于实体瘤的研究进展被引量：5: 2017年; 嵌合抗原受体(CAR)修饰的T细胞,即CAR-T细胞治疗策略是一种非常热门的免疫治疗策略,它可特异性识别肿瘤抗原,进而发挥特异性的杀伤作用.因此靶向性好,杀伤力强,并且T细胞的有效活化和增殖不依赖于MHC分子,是一种高效的免疫杀伤策略.目前,CAR-T细胞治疗正在从实验室逐渐走向临床.其在淋巴瘤治疗中效果良好,为血液肿瘤提供了治愈的希望.在实体瘤中,由于肿瘤微环境的复杂性,CAR-T细胞的治疗效果尚不理想,但是近年来在实体瘤方面也取得了不错的进展.本文就CAR-T治疗策略在实体瘤方面的研究进展进行综述.; 葛玉凤韩东晖吴介恒杨发谢品秦卫军杨安钢温伟红; 关键词：免疫治疗实体瘤

人源性抗前列腺特异性膜抗原单链抗体的表达、纯化及体内外活性鉴定: 目的 :将通过抗体噬菌体展示技术筛选获得的一株人源性抗前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen,PSMA)的单链抗体,构建入原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化后,在体...; 韩东晖吴介恒闫飞袁建林秦卫军杨安钢温伟红; 关键词：前列腺特异性膜抗原 PSMA 人源性单链抗体; 文献传递

抗人前列腺特异性膜抗原(PSMA)的抗体偶联药物研究: 研究背景:前列腺癌是严重威胁男性健康的常见泌尿系肿瘤。前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen,PSMA)特异性高表达于前列腺癌细胞表面,是理想的治疗靶分子。抗体偶联药物(...; 吴介恒韩东晖魏铭郑国旭席文锦杨安钢秦卫军温伟红; 关键词：前列腺癌 PSMA 人源性抗体 ADC; 文献传递

转录因子SOX9基因对脑胶质瘤干细胞干性维持的相关性研究被引量：3: 2015年; 目的:应用慢病毒干扰SOX9的表达,观察其对脑胶质瘤干细胞干性维持的影响。方法:设计2条针对SOX9转录短发夹RNA(sh RNA)的DNA序列,构建慢病毒并感染胶质瘤细胞系U87、U251细胞,利用嘌呤霉素筛选稳转细胞。在转录水平及蛋白水平检测SOX9的沉默效果,利用荧光实时定量PCR(q RT-PCR)及免疫荧光染色检测相应干细胞相关标志分子SOX2、Nestin的表达差异。比较诱导形成的胶质瘤干细胞成球能力(肿瘤干细胞成球的直径),同时利用荧光实时定量PCR(q RT-PCR)及免疫荧光染色对干细胞相关标志物SOX2、Nestin的表达水平进行比较。结果:SOX9成功包装慢病毒并有效感染U87、U251细胞,实时荧光定量PCR检测其抑制率分别可降低83.74%和80.12%。并且在稳转细胞系水平相关干细胞标志分子表达含量有明显下降。在干细胞层面沉默SOX9可以明显抑制胶质瘤细胞诱导成球的直径(P<0.01),同时免疫荧光显示肿瘤干细胞相关干性分子SOX2、Nestin的表达水平较对照组明显降低。结论:慢病毒感染沉默SOX9基因可以抑制胶质瘤干细胞干性的维持,为胶质瘤的生物治疗提供了重要的靶点。; 张磊涂艳阳张鹏幸杨安钢吴介恒缪吉玉温伟红张永生; 关键词：SOX9 慢病毒胶质瘤干细胞

人源性抗前列腺特异性膜抗原单链抗体的表达及活性鉴定: 2016年; 目的构建人源性抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)单链抗体(sc Fv)的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化后,对其生物学活性进行鉴定。方法将人源性抗PSMA sc Fv的基因克隆入原核表达载体p ET302,将其转化入大肠杆菌BL21后用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,摸索不同诱导条件使sc Fv呈可溶性表达,经SDS-PAGE和Western blot法确认表达后,利用Ni2+-NTA亲和层析柱纯化目的蛋白。利用流式细胞术检测sc Fv与PSMA阳性和阴性细胞的结合情况。结果成功构建人源性抗PSMA sc Fv的原核表达载体;在30℃、IPTG终浓度为0.05 mmol/L时,可实现目的蛋白的可溶性表达;经Ni2+-NTA亲和层析柱纯化后获得纯度较高的抗PSMA sc Fv蛋白;流式细胞术结果显示该sc Fv可与PSMA阳性的LNCa P前列腺癌细胞特异性结合,而不与PSMA阴性的PC-3细胞结合。结论在大肠杆菌成功表达了可溶性人源性抗PSMA sc Fv,获得的抗PSMA sc Fv能够特异性地与PSMA阳性前列腺癌细胞结合。; 韩东晖吴介恒欧阳清魏铭席文锦杨安钢温伟红秦卫军; 关键词：单链抗体原核表达

抗人前列腺特异性膜抗原(PSMA)的抗体偶联药物研究: 研究背景：前列腺癌是严重威胁男性健康的泌尿系肿瘤。前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen,PSMA)特异性高表达于前列腺癌细胞,是理想的治疗靶点。抗体偶联药物(antib...; 吴介恒韩东晖杨发郑国旭张玲玲杨安钢秦卫军温伟红; 关键词：前列腺癌 PSMA 人源性抗体 ADC

悬浮驯化CHO细胞并用于抗前列腺特异性膜抗原的抗体表达被引量：3: 2016年; 目的将贴壁状态的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞驯化成用无血清培养基培养的悬浮CHO细胞(CHO-S),并验证用该悬浮细胞进行抗体表达的可行性。方法将贴壁状态的CHO-S细胞调整为悬浮培养后,再用逐步降低血清含量的方法将其驯化成用无血清培养基悬浮培养的CHO-S细胞。根据从噬菌体抗体库筛选获得的抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)单链抗体的基因序列,人工设计并合成其重链和轻链基因,分别克隆入真核表达载体pc DNA3.1中,所得载体命名为pc DNA3.1-HC和pc DNA3.1-LC。将构建好的2个载体按照轻、重链比例为3∶1的量用Free Style MAX转染试剂瞬时转染CHO-S细胞,转染7 d后收集培养上清,用SDS-PAGE和Western blot法检测抗体表达情况,用流式细胞术检测其与PSMA阳性细胞的结合活性。结果成功将贴壁CHO细胞驯化成悬浮CHO-S细胞,成功构建了表达抗PSMA人源性抗体重链和轻链基因的真核表达载体,并在CHO-S细胞中实现了抗体的分泌表达,流式细胞术检测证实其可特异性结合PSMA阳性前列腺癌细胞。结论成功驯化获得悬浮CHO-S细胞,驯化后的CHO-S细胞可用于抗体的真核表达,为后续抗体的大量表达纯化及功能研究提供了工具。; 吴介恒韩东晖魏铭郑国旭焦点席文锦杨安钢秦卫军温伟红; 关键词：CHO细胞抗体表达真核表达转染

以GPC3为靶点的抗体治疗策略在肝癌治疗中的研究进展: 2017年; 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)是硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)家族的成员,其羧基端通过糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定在细胞膜上。GPC3可与多种细胞表面受体相互作用,参与调节细胞的形态和黏附、增殖分化、侵袭迁移等生物学行为。GPC3在肝癌中的表达明显高于正常肝组织,且与肝癌的恶性程度、临床分期及预后密切相关。因此,GPC3被认为是肝癌靶向治疗的理想靶分子。近年来,基于抗体的肿瘤免疫治疗策略发展迅速,以GPC3为靶点的抗体治疗策略,如全抗体、单域抗体及嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞治疗等取得了突破性的进展。我们总结了GPC3的功能及以GPC3为靶点的抗体治疗策略在肝癌中的研究进展。; 吴斯然李秧杨发谢品吴介恒秦卫军杨安钢温伟红; 关键词：抗体免疫治疗

带血管髂骨移植建立嵌合现象的动物实验研究: 2017年; 目的构建一种能够建立免疫嵌合现象的带血管髂骨移植动物模型。方法2015年12月至2016年3月采用SD大鼠进行实验。实验分为3组：实验组、阳性对照组和阴性对照组。实验组受者为10只雌性SD大鼠，对其实施改良的带血管髂骨移植手术，供者为10只雄性SD大鼠；阳性对照组为4只无处理雄性SD大鼠，阴性对照组为4只无处理雌性SD大鼠。术后第28天PCR检测Y染色体性别决定区（sex determining region of the Y, SRY）基因，流式细胞术动态监测CD4^＋／CD8^＋T细胞比值，酶联免疫吸咐试验动态监测IL-2水平，影像学和病理学检测移植髂骨。结果实验组10只大鼠行移植手术，其中7只皮瓣成活，皮瓣成活率70％。实验组10只受者大鼠中4只术后检测出SRY基因，微计算机断层扫描技术（micro computed tomography, Micro-CT）扫描显示移植髂骨骨密度降低，CD4／CDs＋T细胞比值和IL-2水平与正常大鼠相比差异无统计学意义（P〉0．05）；病理结果显示移植髂骨生长正常。结论通过改良的的带血管髂骨移植手术，成功在雌性大鼠体内检测出SRY基因，证明了其具备建立嵌合现象的能力，且在免疫抑制剂的干预下，大鼠免疫状态良好，为进一步探索嵌合现象与免疫耐受提供了基础。; 魏迪张更闫飞吴介恒张克克张磊袁建林; 关键词：动物模型嵌合现象

治疗性抗体用于肿瘤治疗的研究进展: 2014年; 由于抗体所具有的高特异性和亲和力，抗体与肿瘤细胞表面的特异性抗原结合后，可通过不同的生物学作用抑制肿瘤细胞的生长．目前，治疗性抗体已成为肿瘤治疗中的一线治疗策略．截至2013年，美国FDA已批准了14种抗体药物用于临床肿瘤的治疗．随着肿瘤研究的不断深入，越来越多的参与肿瘤发生发展以及导致肿瘤免疫逃逸的分子陆续被发现，以这些分子为靶点，利用针对这些分子的特异性抗体进行肿瘤治疗，已成为目前肿瘤治疗研究的热点，同时也是转化医学最成功的范例之一．; 吴介恒杨安钢温伟红; 关键词：肿瘤免疫治疗治疗性抗体

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