周灵贵
- 作品数：17 被引量：31H指数：3
- 供职机构：贵阳医学院基础医学院多媒体形态学实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科技攻关计划贵州省优秀科技教育人才省长资金项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学自动化与计算机技术更多>>
- 亚洲牛带绦虫TaCRISP基因克隆、表达和序列分析被引量：11
- 2009年
- 目的通过筛选亚洲牛带绦虫(Taenia saginata asiatica)成虫cDNA质粒文库,识别半胱氨酸分泌蛋白(Ta CRISP),并进行克隆表达,为进一步研究其功能提供基础依据。方法用生物信息学方法从亚洲牛带绦虫成虫全长cDNA质粒文库中识别TaCRISP的全长编码基因并预测编码蛋白质的各种结构与功能;将其编码区序列克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,测序鉴定重组质粒,之后进行诱导表达,表达产物经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定。结果该基因全长1090bp,编码239个氨基酸,1aa-16aa位为分泌信号肽,理论分子量为26973.8,等电点为5.96。生物信息分析揭示,Ta CRISP与中殖孔绦虫CRISP一致性为38%,相似性为54%;所构建的重组体经PCR、双酶切及测序鉴定与目标基因相符。SDS-PAGE结果表明,目的基因在大肠埃希菌BL-21/DE3中表达成功。结论发现亚洲牛带绦虫Ta CRISP基因,成功构建重组原核表达质粒并表达出融合蛋白。
- 戴鹏戴佳琳黄江廖兴江郎书源周灵贵申萍香
- 关键词：亚洲牛带绦虫分子克隆原核表达
- 生物显微镜照明系统的改进和探索被引量：4
- 2012年
- 目的:通过对Nikon YS100生物显微镜的结构原理及发展现状分析,探索生物显微镜照明系统改进的方法,实现改善视觉效果、节约教学成本。方法:将普通卤素灯、红光LED、蓝光LED、白光LED替换现用飞利浦7388卤素灯,并按各类灯源参数对电源作相应调整,对比观察标本效果。结果白光LED观察效果较其他几种光源效果好。结论:在电光源生物显微镜上用高亮度发白光二极管取代现用的卤素灯具有亮度高、节能、经济、环保等优势,可以替代生物显微镜现用卤素灯。
- 申萍香刘玉江周灵贵廖兴江
- 关键词：生物显微镜LED
- 通过教学资源重组促进高校实验室的发展和完善
- 2005年
- 申萍香廖兴江黄江代佳琳周筑兰周灵贵
- 关键词：资源重组实验室显微镜实验教学
- 猪带绦虫腺苷酸激酶基因及蛋白结构特性分析被引量：3
- 2009年
- 目的分析和预测猪带绦虫腺苷酸激酶（ADK）基因及其编码的蛋白结构和特性。方法利用各种在线生物信息网站及其它分析软件包,分析从猪带绦虫成虫cDNA质粒文库中识别的腺苷酸激酶基因的结构和编码区序列,分析、预测编码的蛋白质的理化特性、抗原表位、翻译后的修饰、功能域、亚细胞定位、拓扑结构、二级结构、三维空间构象等。结果该基因全长864 bp,编码区为110－758,编码215个氨基酸,为全长基因。理论分子量、等电点分别为23771.4 Da和6.86;没有跨膜区;三维结构建模图显示其线性表位的部位。结论应用生物信息方法从猪带绦虫成虫cDNA文库中筛选出了腺苷酸激酶基因的cDNA全长序列并预测得到其结构与功能方面的信息。
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- 关键词：猪带绦虫腺苷酸激酶CDNA
- 亚洲牛带绦虫Spef1-Like基因克隆、表达及纯化被引量：3
- 2009年
- 目的扩增、克隆和表达亚洲牛带绦虫(Taenia saginata asiatica)Spef1-Like基因全长cDNA,并进行表达产物的纯化。方法以亚洲牛带绦虫成虫cDNA文库中含Spef1-Like基因的质粒作为模板,扩增该基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,测序鉴定重组质粒,在大肠埃希菌BL-21/DE3中用异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化。结果PCR,双酶切及DNA测序见过均表明重组质粒pET-28a(+)-Spef1-Like构建成功,该基因在大肠埃希菌中以上清表达,纯化后蛋白通过SDS-PAGE鉴定结果表明该基因在大肠埃希菌BL-21/DE3得到高效表达。结论成功克隆了亚洲牛带绦虫Spef1-Like基因,并表达和纯化了Spef1-Like蛋白,为研究Spef1-Like的功能及其疫苗等研究提供了基础依据。
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- 关键词：亚洲牛带绦虫基因克隆原核表达
- 牛带绦虫亚洲亚种核糖体蛋白L10a基因分析被引量：1
- 2007年
- 目的：分析和预测牛带绦虫亚洲亚种成虫核糖体蛋白LlOa基因及其编码蛋白的结构和功能。方法：构建牛带绦虫亚洲亚种成虫eDNA文库，进行EST测序，将EST序列与GenBank中登陆的序列进行同源性比对及基因完整性判断；应用NCBI上的BLAST对所筛选基因的保守域进行搜索比对，利用PredictProtein分析、预测其功能域及二级结构。结果：BLASTX分析该基因为全长基因，全长698bp，编码区为24-681，编码218个氨基酸，无跨膜区，具有较稳定的理化性质。结论：从牛带绦虫亚洲亚种成虫cDNA文库中筛选出核糖体蛋白L10a基因。
- 申萍香黄江周灵贵廖兴江郎书源
- 基础医学形态学实验中心运行机制的探讨
- 2008年
- 我院首个省级实验教学示范中心经过1年多的建设,在运行机制方面积累计了一定的经验。通过总结和探讨中心的运行机制,为进一步加强对医学生创新能力和动手能力的培养,建设和发展基础医学形态学实验中心提供借鉴。
- 廖兴江黄江戴佳琳周灵贵申萍香李建华
- 关键词：教学质量
- 亚洲牛带绦虫NOMO1基因在原核细胞中表达被引量：2
- 2009年
- 目的构建亚洲牛带绦虫NOMO1基因原核重组质粒,进行原核表达、纯化及免疫学研究。方法以亚洲牛带绦虫成虫cDNA文库中含NOMO1基因的质粒作为模板,扩增该基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,测序鉴定重组质粒后再行诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,并用蛋白免疫印迹(Western-blotting)分析其免疫反应性。结果成功建构了原核重组质粒pET28a(+)-NOMI1。该基因在大肠埃希菌中以包涵体形式存在,破包涵体后纯化蛋白通过SDS-PAGE鉴定结果表明该基因在大肠埃希菌BL-21/DE3得到高效表达。Western blotting结果显示,该重组蛋白可被亚洲牛带绦虫、牛带绦虫病人血清识别,具有免疫反应性。结论成功克隆亚洲牛带绦虫NOMO1基因、表达和纯化得到了该基因的重组蛋白并且证明该基因具有免疫反应性,为进一步研究该基因的功能提供条件。
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- 关键词：亚洲牛带绦虫基因克隆免疫反应性
- 猪带绦虫腺苷酸激酶的克隆及其重组蛋白免疫反应性的评价被引量：2
- 2010年
- 为原核表达猪带绦虫腺苷酸激酶(ADK),对其免疫性进行初步研究,本研究以猪带绦虫成虫cDNA质粒文库中ADK同源基因重组质粒为模板,通过PCR扩增并将其亚克隆于原核表达载体pET28a(+),构建了pET-Ts-ADK重组质粒,经IPTG诱导表达,并通过SDS-PAGE鉴定,表明重组蛋白约30ku。经His-镍蛋白纯化柱纯化后western blot试验表明该重组蛋白可被猪带绦虫、亚洲带绦虫及牛带绦虫患者血清识别,表明猪带绦虫ADK基因在原核表达系统中表达获得的蛋白具有免疫反应性。
- 戴佳琳黄江廖兴江申萍香周灵贵刘玉江
- 关键词：猪带绦虫腺苷酸激酶基因克隆免疫反应性
- 亚洲牛带绦虫泛素缀合酶基因及其蛋白质结构与功能的生物信息学分析被引量：3
- 2009年
- 目的分析和预测亚洲牛带绦虫泛素缀合酶基因及其编码蛋白的结构与功能特性,用于指导其生物学功能的实验研究。方法利用美国国家生物技术信息中心和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统中有关基因和蛋白的序列和结构信息分析的各种工具,结合其它生物信息学分析软件包,如VectorNTIsuite,从亚洲牛带绦虫成虫cDNA质粒文库中识别出泛素缀合酶基因及其编码区,分析、预测该基因编码的蛋白质的理化特性、翻译后的修饰位点、功能域、亚细胞定位、拓扑结构、二级结构等。结果该序列为全长基因,编码区为76bp-537bp,编码154个氨基酸。该序列为泛素缀合酶基因同源序列。其编码蛋白的理论分子量为17397.1,亚细胞定位在细胞核。预测该蛋白无跨膜区。与吸虫属的泛素缀合酶进化关系最近。结论应用生物信息方法从亚洲牛带绦虫成虫cDNA文库中筛选出了亚洲牛带绦虫泛素缀合酶cDNA全长序列并预测得到其结构与功能方面的信息。
- 廖兴江戴佳琳周灵贵申萍香黄江黄艳胡旭初
- 关键词：亚洲牛带绦虫CDNA生物信息学
