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人脐静脉血内皮祖细胞的分离、培养及鉴定被引量：1: 2008年; 目的体外分离、培养及鉴定人脐静脉血内皮祖细胞。方法密度梯度离心法分离培养人脐静脉血EPCs。、通过免疫荧光法观察内皮细胞吸收DiL-acLDL和FITC-UEA-I情况,流式细胞仪定量检测EPCs表面CD133、CD34和KDR抗原表达阳性率来鉴定EPCs。倒置显微镜下观察EPCs形态学变化,计数细胞并绘制生长曲线。结果培养细胞呈长梭形,接种2-4 d梭形形态细胞较少,为细胞生长的潜伏期;6-10 d贴壁梭形细胞逐渐增多,为对数增殖期;10-14 d细胞融合成集落样生长,梭形细胞明显增多,进入生长平台期。激光共聚焦显微镜鉴定DiL-acLDL、FITC-UEA-I双染阳性的细胞为正在分化的EPCs;流式细胞仪检测结果:细胞表达CD133、CD34和KDR抗原的阳性率分别为:7.3+2.71%、42.0+6.42%、89.3+10.45%。结论从人脐静脉血可分离、纯化、扩增培养出内皮祖细胞。; 宋显晶杨萍刘斌姜峰; 关键词：脐静脉血内皮祖细胞

辛伐他汀对体外培养人脐静脉血内皮祖细胞扩增及黏附能力的影响被引量：3: 2008年; 背景：他汀类药物可促进急性缺血后的血管新生、加速球囊损伤血管的再内皮化并减少新内膜下组织的增生，且这两个作用均与血管内皮祖细胞密切相关。目的：通过体外培养人脐静脉血血管内皮祖细胞，观察辛伐他汀对血管内皮祖细胞扩增及黏附能力的影响。设计、时间及地点：以细胞为观察对象，分组对比实验，于2006—02／10在吉林大学基础医学院病理生理教研室完成。材料：人脐静脉血采集来源于吉林大学第二临床医学院妇产科6名正常足月顺产健康产妇。方法：密度梯度离心法分离培养人脐静脉血血管内皮祖细胞。通过免疫荧光法观察内皮细胞吸收乙酰化低密度脂蛋白和荆豆凝血素I情况，流式细胞仪定量榆测血管内皮祖细胞表面CD133、CD34和KDR抗原表达阳性率来鉴定血管内皮祖细胞。倒置显微镜下观察血管内皮祖细胞形态学变化，计数细胞并绘制生长曲线。实验按M199培养基含辛伐他汀纯品浓度不同分5组，分别为0，0．01，01，1，10umol／L辛伐他汀组，其中0umol／L作对照。四甲基偶氮唑盐比色法观察血管内皮祖细胞增殖情况，计数贴壁细胞数法评价血管内皮祖细胞的黏附程度。主要观察指标：原代培养血管内皮祖细胞形态变化；各组细胞增殖及黏附能力。结果：①培养细胞呈长梭形，接种2-4d梭形形态细胞较少，为细胞生长的潜伏期：6～10d贴壁梭形细胞逐渐增多，为对数增殖期：10～14d细胞融合呈集落样生长，梭形细胞明显增多，进入生长平台期。②激光共聚焦显微镜鉴定乙酰化低密度脂蛋白、荆豆凝血素I双染阳性的细胞为正在分化的血管内皮祖细胞。③流式细胞仪检测细胞表达CD133、CD34和KDR抗原的阳性率分别为（730±271）％、（42．00±642）％，（89．30±10．45）％。④四甲基偶氮唑盐比色结果表明各浓度组血管内皮祖细胞�; 宋显晶刘斌杨萍姜峰; 关键词：脐静脉血内皮祖细胞 HMG-COA还原酶抑制剂辛伐他汀

生物可降解材料聚乙二醇-聚乳酸-聚谷氨酸三嵌段共聚物与人脐静脉内皮细胞的细胞相容性被引量：4: 2007年; 目的：探讨聚乙二醇-聚乳酸-聚谷氨酸三嵌段共聚物（PEG-PLA-PGL/RGD）与人脐静脉内皮细胞的细胞相容性，为构建支架表面理想可降解载体材料奠定基础。方法：将分离培养的稳态生长的人脐静脉内皮细胞接种于PEG-PLA-PGL/RGD膜片上培养作为实验组，对照组为未放PEG-PLA-PGL/RGD膜片培养的人脐静脉内皮细胞，相差显微镜下观察细胞生长情况及细胞计数，采用MTT法检测细胞增殖指数及免疫组织化学S-P法检测人脐静脉内皮细胞FⅧ。结果：人脐静脉内皮细胞在PEG-PLA-PGL/RGD膜片上生长良好，相差显微镜下观察种植在PEG-PLA-PGL/RGD膜片上的第3代人脐静脉内皮细胞4-6 h后即开始贴壁、伸展；3 d后细胞开始呈集落样生长，生长较快；5 d后细胞集落开始融合，呈现特征性的鹅卵石样形态；经多次传代（超过7代）后，细胞呈长梭形或多角形，形态改变，与对照组比较差异无显著性。1周内台盼蓝法对细胞计数显示，实验组细胞较对照组无明显降低，细胞增长速度无明显降低（P〉0.05）；MTT法对种植后1、3、5及7 d的细胞增殖指数检测，两组比较差异均无显著性（P〉0.05）。结论：人脐静脉内皮细胞在PEG-PLA-PGL/RGD上生长良好，PEG-PLA-PGL/RGD与人脐静脉内皮细胞具有良好的细胞相容性，是支架表面理想的可降解载体材料。; 宋显晶刘斌李淑梅姜峰张基昌史永峰双东思李智博; 关键词：组织相容性内皮细胞生物相容性材料

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姜峰

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