廖立珊
- 作品数：50 被引量：135H指数：8
- 供职机构：深圳出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 实时荧光定量PCR检测畜禽肉制品中鸭源性成分被引量：13
- 2016年
- 根据鸭mtDNA COX基因上的保守序列设计特异性引物和TaqMan探针,建立实时荧光定量PCR用于检测畜禽肉制品中的鸭源性成分。结果表明,建立的方法特异性强,与鹅、鸡、羊、牛等15种动物DNA无非特异性扩增;灵敏度高,可检测1.0pg/μL鸭源DNA的存在;重复性好,同DNA浓度所测得Ct值的变异系数均小于3%;应用该法对模拟混合样品进行检测,结果与预期相符,且常见肉类DNA的存在并不影响该法对鸭源性成分检测的灵敏度。说明本试验建立的鸭源性成分实时荧光定量PCR法特异、敏感、稳定,可快速准确检测畜禽肉制品中含有的鸭源性成分。
- 林彦星张彩虹阮周曦刘建利宗卉廖立珊孙洁杨俊兴吕建强花群义曹琛福
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 非洲猪瘟病毒p72蛋白的真核表达及反应原性鉴定被引量：2
- 2015年
- 将p72基因克隆到载体pFast Bac/NT-TOPO上,转化大肠埃希菌DH5α。将获得的重组载体pFastBac/NT-TOPO-p72,转化大肠埃希菌DH10Bac,获得重组杆状病毒质粒bacmid-p72。通过脂质体介导,将bacmid-p72转染sf9细胞,获得重组杆状病毒。用重组杆状病毒感染正常生长的sf9细胞,72h后收集细胞,超声破碎后取上清进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示,重组蛋白大小约78ku,且重组蛋白可以与非洲猪瘟标准阳性血清反应。说明表达的重组蛋白为可溶性的,并具有良好的反应原性。
- 梁云浩曹琛福叶奕优花群义张彩虹曾少灵陶虹廖立珊刘建利唐勇吕建强
- 关键词：非洲猪瘟病毒脂质体介导重组杆状病毒
- 非洲猪瘟病毒p30蛋白真核表达载体的构建及表达被引量：2
- 2016年
- 本文设计特异性引物扩增全长p30基因,得到585bp的目的片段,克隆至杆状病毒Bac-To-Bac表达载体pFastBac/NT-TOPO中,转化大肠杆菌DH10Bac进行同源重组,成功构建了含有p30基因的真核表达载体。转染Sf9细胞,回收得到重组杆状病毒。SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,表达产物20kDa,与预期大小一致,能与AFSV阳性血清产生特异性反应。
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- 关键词：ASFV杆状病毒表达
- 基于VP73表达抗原和单抗的非洲猪瘟c-ELISA试剂盒研制
- 曾少灵卢体康花群义杨俊兴吕建强秦智锋廖立珊阮周曦张彩虹曹琛福唐金明孙洁林庆燕刘建利陶虹陈泽华陈书琨宗卉
- VP73蛋白是非洲猪瘟病毒的主要抗原性结构蛋白,基因结构稳定保守,即使是不同毒株其DNA序列或氨基酸序列的相似性都很高,可超过96%以上.VP73蛋白在自然感染中可诱导产生抗体,也是最早产生的抗体种类之一,且抗原性稳定,...
- 关键词：
- 关键词：猪瘟病毒免疫学检测试剂盒
- 基于锁核酸探针的双重荧光实时RT-PCR检测方法鉴别新城疫中强毒株与弱毒株被引量：8
- 2012年
- 为鉴别新城疫病毒(NDV)强毒株和弱毒株,本研究建立了基于新型锁核酸(LNA)探针的实时荧光RT-PCR检测方法(Duplex LNA rRT-PCR)。该方法针对NDVF基因裂解位点设计了两条新型LNA探针,通过对11株NDV株进行大将军脂duplex LNA rRT-PCR检测方法检测,验证该方法的特异性;通过对副粘病毒I型(APMV-1)和NDV中强毒株(vNDV)不同浓度病毒液进行检测,确定该方法的灵敏度,并与TaqMan实时荧光RT-PCR检测方法进行比较。结果显示本研究所建立的方法对11株NDV检测的特异性为100%(11/11),优于TaqMan实时荧光RT-PCR检测方法(10/11);所建立的duplex LNA rRT-PCR方法检测中强毒株F48E9和弱毒株LaSota的灵敏度分别为10个EID50和0.1个EID50,比美国农业部推荐的TaqMan实时荧光RT-PCR检测方法低10倍。本研究利用新型LNA探针技术,建立了鉴别NDV中强毒株与弱毒株的duplex LNA rRT-PCR检测方法,可以特异性检测NDV并有效区分中强毒株与弱毒株,适合用于鸡场和进出境动物产品中NDV的快速检测。
- 秦智锋刘建利卢体康林庆燕吕建强曹琛福阮周曦曾少灵陈书琨廖立珊孙洁张彩虹花群义
- 关键词：新城疫病毒弱毒株LNART-PCR
- 非洲猪瘟病毒VP73蛋白特异性多克隆抗体的制备方法及应用
- 本发明公开一种非洲猪瘟病毒VP73蛋白小鼠腹水多克隆抗体的制备方法，旨在提供一种腹水效价高，亲和力高，抗原用量少、操作简便的新型多克隆抗体的制备方法。所述的非洲猪瘟病毒多克隆抗体的制备包括：对ASFV VP73基因序列P...
- 陶虹花群义吕建强曹琛福刘建利靳雯雯杨俊兴张彩虹孙洁唐金明廖立珊
- 文献传递
- 猪蓝耳病病毒感染与免疫鉴别技术
- 刘胜利花群义卢体康曾少灵杨俊兴林庆燕阮周曦廖立珊吴斌唐泰山薄清如李健张彩虹吕建强曹琛福孙洁叶奕优秦智峰陈兵韩雪清
- 猪蓝耳病，又称猪繁殖与呼吸综合症(Porcine respiratory and reproductive syndrome，PRRS)，是由猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine respiratory and rep...
- 关键词：
- 关键词：猪蓝耳病病毒感染
- EHDV超顺磁性纳米晶免疫检测试纸条研制
- 陈兵杨俊兴胡运发李健波曹琛福张彩虹秦智锋林庆燕刘建利廖立珊卢体康花群义
- 该项目以鹿流行性出血热病(EHD)为研究对象，利用基因工程、分子免疫学、分子流行病学、分子病毒学、高分子化学以及蛋白质组学技术等现代生命科学中的先进检测技术，以特异性靶标分子识别为基础，研制适用于进出口检疫和野外诊断的新...
- 关键词：
- 关键词：检测试剂
- 新型甲型H1N1(2009)流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与评价
- 为了自新型甲型H1N1(2009)于2009年在世界多个国家暴发流行后，许多国家的猪群中也检测到该病毒的存在。猪作为流感病毒的”基因混合器”能够产生具有潜在危害的毒株。WHO、OIE和FAO联合要求加大对猪群中新型甲型H...
- 秦智锋曾少灵陈书琨廖立珊花群义张彩虹孙洁刘建利卢体康阮周曦林庆燕吕建强曹琛福
- 关键词：实时荧光RT-PCR病毒检测性能评价
- 文献传递
- 非洲猪瘟病毒毒株通用单克隆抗体及制备方法和应用
- 本申请公开了一种非洲猪瘟病毒毒株通用单克隆抗体及其制备方法和应用。本申请的制备方法，包括用纯化p54免疫蛋白对小鼠免疫，取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤细胞，用三种筛选抗原进行筛选，获得可稳定分泌单克隆抗体的杂...
- 曹琛福花群义刘建利唐金明吕建强宗卉张彩虹杨俊兴孙洁廖立珊
- 文献传递
