张弘韬
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
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- 山羊TLR2绿色荧光蛋白融合载体的构建
- 2012年
- 为了构建在哺乳动物细胞中表达的山羊TLR2绿色荧光蛋白融合载体,试验根据克隆到T载体上的山羊TLR2测序结果,设计1对不含终止子的引物,将山羊TLR2 PCR产物连接到pEGFP-N1载体上,用磷酸钙法转染293T细胞,并在荧光显微镜下观察。结果表明:重组质粒经酶切和测序鉴定正确,且在293T细胞中表达;融合蛋白发出绿色荧光,表明TLR2-EGFP主要分布在细胞膜上。说明试验成功地构建了pEGFP-TLR2-N1绿色荧光蛋白融合载体。
- 潘求真冯国兴李姗姗张弘韬崔玉东连正兴
- 关键词:山羊绿色荧光蛋白基因表达
- 外源Toll样受体2转基因绵羊的构建与鉴定被引量:3
- 2013年
- Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)是识别革兰氏阳性细菌如引起羊乳腺炎、炭疽病、破伤风等病原体的一种重要受体,而TLR2过表达转基因羊为研究TLR2在防卫细菌侵染中的作用提供了一个理想的模型。因此,研究首先通过显微注射TLR-2过表达载体3S-Loxp-TLR2的方法对绵羊进行外源基因TLR2整合,然后采用PCR和Southern blot方法对其进行鉴定、拷贝数验证和表达量分析。结果表明,注射148个受精卵,共产下15只小羊,其中8只小羊检测为阳性,转基因率为53.3%;Southern杂交结果发现转TLR2小羊的基因组中外源TLR2基因均为单拷贝;且转基因羊TLR2 mRNA表达高于对照。说明成功构建了转TLR2基因羊。
- 张弘韬潘求真冯国兴邓守龙连正兴
- 关键词:绵羊TLR-2转基因
- 转TLR2基因绵羊鉴定及其炎症反应研究
- 对于绵羊,很多革兰氏阳性细菌的感染可能会导致严重的乳腺炎、炭疽等疾病,而Toll样受体2(TLR2)在这些病原菌入侵寄主的识别中起着重要作用。转TLR2基因羊为研究TLR2过表达情况下对病原菌的清除作用提供了重要途径。 ...
- 张弘韬
- 关键词:绵羊TOLL样受体2过表达炎症因子
- 文献传递