李一男
- 作品数:9 被引量:12H指数:2
- 供职机构:中国农业大学更多>>
- 发文基金:教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学更多>>
- 凝结芽孢杆菌产β-半乳糖苷酶条件的优化被引量:2
- 2010年
- 从土壤中筛选得到1株高产β-半乳糖苷酶的凝结芽孢杆菌,研究该菌产β-半乳糖苷酶的发酵条件。结果表明:产酶适宜的培养基配方为蔗糖10 g/L,麦芽糖5 g/L,可溶性淀粉5 g/L,酵母提取物6.7 g/L,胰蛋白胨13.3 g/L,KCl 1.5 g/L;产酶的最适发酵温度为45℃。培养48 h总酶活力达到7.1 U/mL,60 h胞外酶活力最高为3.0 U/mL。胞外酶的最适pH为6.0,最适温度65℃。该酶能够完全水解乳糖,可适用于无乳糖乳制品的生产。
- 宋春雷闫巧娟江正强李一男唐荦
- 关键词:凝结芽孢杆菌Β-半乳糖苷酶胞外酶发酵
- 获得定向突变基因的方法和基于其发现的酸性β-1,3-1,4-葡聚糖酶
- 本发明公开了一种获得定向突变基因的方法和基于其发现的β-1,3-1,4-葡聚糖酶。本发明提供的蛋白质,是如下(a)或(b):(a)将序列1自N末端第19至314位氨基酸残基组成的蛋白质进行定点突变得到的蛋白质;(b)将序...
- 江正强贾会勇闫巧娟李一男陈洲
- 文献传递
- 一种耐热β-1,3-1,4-葡聚糖酶及其编码基因
- 本发明公开了一种β-1,3-1,4-葡聚糖酶及其编码基因。本发明提供的β-1,3-1,4-葡聚糖酶是如下1)或2)或3)的蛋白质:1)由序列表中序列2的第19-314位所示的氨基酸序列组成的蛋白质;2)由序列表中序列2所...
- 闫巧娟华承伟江正强唐艳斌李一男
- 文献传递
- 一种β-葡萄糖苷酶及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种β-葡萄糖苷酶及其编码基因与应用。本发明提供的β-葡萄糖苷酶是如下1)或2)的蛋白质:1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;2)将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和...
- 江正强华承伟杨绍青闫巧娟李一男
- 获得定向突变基因的方法和基于其发现的酸性β-1,3-1,4-葡聚糖酶
- 本发明公开了一种获得定向突变基因的方法和基于其发现的β-1,3-1,4-葡聚糖酶。本发明提供的蛋白质,是如下(a)或(b):(a)将序列1自N末端第19至314位氨基酸残基组成的蛋白质进行定点突变得到的蛋白质;(b)将序...
- 江正强贾会勇闫巧娟李一男陈洲
- 文献传递
- 嗜热拟青霉β-1,3-1,4-葡聚糖酶的定向进化研究
- 李一男
- 关键词:定向进化酸性条件底物特异性
- 一种β-葡萄糖苷酶及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种β-葡萄糖苷酶及其编码基因与应用。本发明提供的β-葡萄糖苷酶是如下1)或2)的蛋白质:1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;2)将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和...
- 江正强华承伟杨绍青闫巧娟李一男
- 文献传递
- 定向进化提高嗜热拟青霉J18耐热β-1,3-1,4-葡聚糖酶在酸性条件下的催化能力被引量:10
- 2011年
- 应用定向进化技术提高了嗜热拟青霉Paecilomyces thermophila J18耐热β-1,3-1,4-葡聚糖酶(PtLic16A)在酸性条件下的催化能力。结合易错PCR和DNA改组的方法,构建了β-葡聚糖酶的突变体文库;利用刚果红染色法建立了阳性克隆的高通量筛选体系。筛选得到的突变酶PtLic16AM1的反应最适pH由7.0变化至5.5,且保持了原有的耐热性和比酶活。突变酶的DNA序列中有4个点位发生突变,引发了4处氨基酸替换,分别是T58S、Y110N、G195E和D221G。结构模拟结果显示,发生突变的4个氨基酸位点中,Y110N位置靠近酶活性中心,而T58S、G195E和D221G则离酶活性中心较远,其中T58S、G195E可能对酶最适pH的变化起到了关键作用。
- 李一男贾会勇闫巧娟江正强杨绍青
- 关键词:易错PCRDNA改组
- 一种耐热β-1,3-1,4-葡聚糖酶及其编码基因
- 本发明公开了一种β-1,3-1,4-葡聚糖酶及其编码基因。本发明提供的β-1,3-1,4-葡聚糖酶是如下1)或2)或3)的蛋白质:1)由序列表中序列2的第19-314位所示的氨基酸序列组成的蛋白质;2)由序列表中序列2所...
- 闫巧娟华承伟江正强唐艳斌李一男