李伟华
- 作品数：15 被引量：28H指数：4
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- 油酸调节人血管平滑肌细胞TLR4的增殖活性及炎性因子的表达被引量：6
- 2013年
- 目的探讨油酸对人主动脉血管平滑肌细胞TLR4及炎性因子表达的调节作用。方法 MTT法检测细胞增殖活性;实时荧光定量PCR法检测TLR4及炎性因子mRNA的表达;Western blot法检测细胞TLR4蛋白表达,ELISA法检测炎性因子蛋白含量。结果油酸促进人主动脉血管平滑肌细胞增殖活性,增加油酸浓度,抑制细胞增殖。油酸上调TLR4、IL-6、IL-8和MCP-1 mRNA表达最大幅度为6.5、7.4、7.4和7.1倍。IL-6、IL-8和MCP-1蛋白表达最大上调幅度为2.16、1.93和2.06倍。200μmol/L组TLR4蛋白表达的吸光度值为(1.70±0.62),与对照组(0.29±0.22)比较P<0.05。LPS组TLR4、IL-6、IL-8和MCP-1的表达明显增加(P<0.05)。结论油酸促进人主动脉血管平滑肌细胞TLR4及炎性因子mRNA及蛋白表达。
- 杨海静陈卫权金星李伟华刘静邱明才
- 关键词：油酸细胞因子基因表达
- TLR4通路在软脂酸诱导人血管平滑肌细胞IL-6基因表达中的作用被引量：1
- 2013年
- 构建Toll样受体4（TLR4）shRNA腺病毒表达载体（pGSadeno—TLR4）并感染人主动脉血管平滑肌细胞（HA-VSMC），采用软脂酸和不同的信号通路阻断剂处理HA—VSMC，以实时定量PCR检测白细胞介素6（IL-6）mRNA的表达，酶联免疫吸附法（ELISA）检测NF—KBp65活性和IL-6的蛋白水平。结果显示，软脂酸增加HA—VSMCIL-6mRNA和蛋白水平，且具有明显的剂量依赖关系，软脂酸（400μmol／L）处理6h作用最明显。IL-6mRNA的表达水平为对照组的10．43倍（P〈0．01）。IL-6蛋白水平在软脂酸作用24h时达到峰值，约为对照组的2．18倍（P〈0．01）。NF．KB阻断剂parthenolide下调软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达分别为65％和59％（均P〈0．01），蛋白激酶C（PKC）阻断剂白屈菜红碱下调软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达分别为24％和28％（均P〈0．05）。而细胞外信号调节激酶抑制剂PD98059和磷酸肌醇3激酶抑制剂wortmannin对软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达均无明显作用（均P〉0．05）。pGSadeno．TLR4下调软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达分别为72％和75％（均P〈0．01），下调软脂酸刺激的NF—KBv65活性约62％（P〈0．01）。这些结果提示TLR-4／NF—KB和PKC信号通路介导了软脂酸诱导的人主动脉血管平滑肌细胞IL-6基因表达。
- 权金星高啸波杨海静陈卫李伟华李永红刘静
- 关键词：软脂酸TOLL样受体4白细胞介素6
- 透明质酸与血管病变的研究进展被引量：2
- 2016年
- 细胞外基质(ECM)在器官的形成、生长、功能和许多人类疾病中起重要作用。透明质酸(HA)是细胞外基质的主要成份之一,对肿瘤细胞的生长、分化、转移及血管新生有重要作用。在损伤部位HA碎片通过各种免疫细胞刺激炎症基因的表达。大血管和微血管病变是很多疾病,如糖尿病的主要并发症,由于代谢与HA合成之间紧密相关,有可能HA与糖尿病等疾病有紧密联系。血管平滑肌细胞源性的HA促进血管损伤后新内膜的形成,HA可能是潜在的治疗心血管疾病的靶标。文章主要综述HA与血管病变的关系。
- 杨兴文李伟华
- 关键词：透明质酸血管病变动脉粥样硬化糖尿病
- 肺癌患者血清MMP-9和TIMP-1检测的临床意义被引量：6
- 2013年
- 目的研究基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)在肺癌患者和健康人血清中的含量,及其与分期、肿瘤分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移状态、远处转移等病理特征的相关性。方法通过酶联免疫吸附测定(ELISA)分别检测肺癌患者和健康对照者的血清样本中的MMP-9、TIMP-1的浓度,进行统计学分析。结果 MMP-9和TIMP-1在肺癌患者血清中的含量明显高于健康人群,差异有统计学意义(P<0.01);并与分期、肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移呈正相关(P<0.05),与分化程度呈负相关(P<0.05);而与年龄、性别、吸烟史、肿瘤的病理类型无关(P>0.05)。结论 MMP-9和TIMP-1参与肺癌的发生、发展、侵袭转移过程,可作为临床监测病情发展的指标。
- 王小军火云霞刘华李伟华潘辉蔡曦光
- 关键词：基质金属蛋白酶9酶联免疫吸附测定组织金属蛋白酶抑制剂-1
- 果蝇样受体4介导游离脂肪酸调节人血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1的表达被引量：4
- 2013年
- 目的探讨软脂酸对人主动脉血管平滑肌细胞（HA—VSMC）单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）基因表达的调节及果蝇样受体4（TLR4）信号通路的作用。方法采用不同剂量的软脂酸（100、200、400μmol/L）处理HA—VSMC6、12、24h，采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测细胞MCP．1mRNA表达，酶联免疫吸附实验（ELISA）检测MCP-1蛋白表达，观察软脂酸调节MCP-1表达的剂量依赖关系和时间效应；采用蛋白激酶C（PKC）抑制剂白屈菜红碱、磷脂酰肌醇3激酶（P13K）抑制剂wortmannin、神经酰胺抑制剂myriocin和核因子KB（NF—KB）抑制剂parthenolide分别处理细胞30min，再加入软脂酸（400μmol/L）处理细胞6h后，实时荧光定量PCR检测MCP-1mRNA的表达水平，ELISA检测MCP-1的蛋白表达水平，研究软脂酸调节MCP-1表达依赖的信号通路；构建TLR4短发夹RNA（shRNA）腺病毒pGSadeno-TLR4并感染HA—VSMC沉默TLR4基因表达，实验同时设空白对照组（PBS缓冲液）和对照病毒（pGSadeno-GFP）组。细胞感染96h后更换培养基，再加入软脂酸（400μmoL／L）处理细胞6h，采用实时荧光定量PCR检测MCP-1mRNA表达水平，ELISA检测MCP-1的蛋白表达水平。提取细胞核蛋白，采用ELISA检测NF—KBp65亚基活性，观察TLR4／NF-KB通路在软脂酸调节HA-VSMCMCP-1基因表达中的作用。组间均数比较采用单因素方差分析。结果采用软脂酸处理细胞6h后，对照组及100、200和400μmoVL软脂酸组MCP-1mRNA表达分别为1．00±0．02、3．30±2．84、8．21±4．31和11．25±2．73（F=7．57，P〈0．05）；MCP-1蛋白表达分别为（127±10）、（147±10）、（163±18）和（194±14）ng／L（F=7．81，P〈0．05）。软脂酸可促进HA-VSMCMCP-1mRNA和蛋白表达且具有明显的剂量依赖关系。细胞培养12h和24h后，随着软脂酸浓度的增加，MCP-1mRNA和蛋白表达水平呈逐渐增加趋势，但时间效应则不明显。采用不同�
- 高啸波权金星杨海静陈卫李伟华李永红刘静
- 关键词：软脂酸单核细胞趋化蛋白-1
- 2型糖尿病患者血清透明质酸与颈动脉内膜中层厚度的相关性研究
- 2016年
- 目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清透明质酸(HA)与颈动脉内膜中层厚度(CIMT)的相关性,以明确血清HA在T2DM大血管病变中的实验室诊断价值。方法选取我院T2DM患者144例,其中T2DM无并发症组33例,T2DM大血管并发症组47例,T2DM非大血管并发症组64例,另选健康体检者30例作为健康对照组(NC组)。测定血清HA、CIMT、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血脂、空腹血糖水平。结果 T2DM无并发症组、T2DM大血管并发症组、T2DM非大血管并发症组血清HA均高于NC组(P<0.05);T2DM大血管并发症组血清HA显著高于T2DM非大血管并发症组和T2DM无并发症组(P<0.01);血清HA与FPG、Hb A1c、HOMA-IR及CIMT呈正相关(r=0.853、0.711、0.779、0.328,P均<0.01),与HDL-C呈负相关(r=-0.749,P=0.000);CIMT与HA、FPG、Hb A1c、HOMA-IR及hs-CRP呈正相关(r=0.328、0.404、0.384、0.361、0.180,P<0.05),与HDL-C呈负相关(r=-0.303,P=0.000)。结论 T2DM及其血管并发症患者血清HA显著升高,且血清HA升高水平和CIMT显著相关,可能与糖代谢紊乱导致血管损伤影响细胞外基质HA产生有关,血清HA可以作为T2DM及其大血管并发症的辅助诊断指标。
- 杨兴文李伟华吕亚亚史少林董莉李元权金星
- 关键词：透明质酸糖尿病血管并发症动脉粥样硬化颈动脉内膜中层厚度
- 非小细胞肺癌患者血清bFGF和MMP-9检测的临床意义被引量：3
- 2013年
- 目的研究基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在非小细胞肺癌患者和健康者的血清样本中的含量及其与肿瘤分化程度、临床分期、远处转移等病理特征的相关性。方法通过酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测非小细胞肺癌患者和正常对照者的血清样本中的MMP-9、bFGF的浓度,并进行统计学分析。结果 MMP-9和bFGF在非小细胞肺癌患者血清中的含量明显高于健康人群(P<0.01),并与肿瘤分期、肿瘤大小、远处转移呈正相关(P<0.05),与分化程度呈负相关(P<0.05);而与年龄、性别、肿瘤的病理类型无关(P>0.05),经Pearson相关性检验发现两者之间显著相关(r=0.807,P<0.01)。结论 MMP-9和bFGF共同参与非小细胞肺癌的发生发展、侵袭转移过程,联合检测可作为临床监测病情发展的指标。
- 王小军火云霞杨文平潘辉刘华李伟华蔡曦光
- 透明质酸对游离脂肪酸引起的人主动脉血管平滑肌细胞表达IL-6、IL-8和TNF-α的影响
- 2017年
- 目的探讨透明质酸(HA)对游离脂肪酸(FFA)引起的人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)表达白细胞介素6(IL-6)、IL-8和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法培养HA-VSMC,用不同浓度(0、100、200、400μmol/L)FFA和不同浓度FFA+高分子量HA(HMW-HA)或低分子量HA(LMW-HA)处理细胞24、48 h。噻唑蓝法检测FFA和FFA+HA对HA-VSMC存活率的影响;Ed U染色检测细胞增殖活性;酶联免疫吸附法检测培养上清IL-6、IL-8和TNF-α含量;实时荧光定量PCR和Western blot检测IL-6、IL-8和TNF-αmRNA及蛋白表达水平。结果(1)FFA在400μmol/L内呈浓度依赖性诱导HA-VSMC增殖;(2)HMW-HA、LMW-HA均对FFA诱导的HA-VSMC增殖有抑制作用,且HMW-HA抑制作用强于LMW-HA;(3)FFA显著促进HA-VSMC IL-6、IL-8和TNF-α的分泌,且有明显的时间和浓度依耐性;HA可以抑制上述作用;(4)实时荧光定量PCR和Western blot结果显示,FFA+HMWHA组、FFA+LMW-HA组IL-6、IL-8、TNF-αmRNA及蛋白表达水平均低于FFA组(均P<0.01),其中FFA+HMW-HA组又低于FFA+LMW-HA组(P<0.01)。结论 (1)FFA诱导HA-VSMC IL-6、IL-8、TNF-αmRNA和蛋白表达升高;(2)HA对FFA引起的HA-VSMC IL-6、IL-8和TNF-α的表达有抑制作用,且HMW-HA抑制效果强于LMW-HA。
- 杨兴文李伟华李元董莉权金星韩平治
- 关键词：透明质酸游离脂肪酸白细胞介素6白细胞介素8因子Α
- TLR4通路介导游离脂肪酸诱导人血管平滑肌细胞IL-8基因表达的实验研究
- 目的 探讨软脂酸对人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)白细胞介素8(IL-8)基因表达的调节及果蝇样受体4(TLR4)信号通路的作用.方法 构建TLR4 shRNA腺病毒表达载体并感染HA-VSMC,采用软脂酸和不同...
- 权金星刘静高啸波刘菊香李伟华李永红杨卫国
- MnSOD模拟化合物抗胃癌作用的分子机制研究
- 李红玲郝相勇徐香玖黄海云王艳红郭长安张玲芳张旭霞王霞杨孝来李伟华
- 该项研究的目的是探讨锰超氧化物歧化酶模拟化合物（MnSODm）在胃癌细胞中的抗癌作用及机制。通过流式细胞仪分析胃癌BGC-823细胞的凋亡，用Western bolt检测细胞凋亡蛋白、caspase和Bcl-2蛋白表达，...
- 关键词：
- 关键词：胃癌细胞凋亡蛋白表达
