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RNA干扰抑制脑胶质瘤细胞HMGA1基因表达对放射敏感性的影响: 2010年; 目的探讨慢病毒介导的RNA干扰沉默HMGA1对脑胶质瘤细胞株SHG-44放射敏感性的影响。方法把HMGA1 siRNA慢病毒载体转染脑胶质瘤细胞株SHG-44后，用半定量RT—PCR和Western blot检测其对细胞HMGA1基因表达的影响。采用克隆形成法检测细胞对6MVX射线的敏感性，流式细胞仪检测各组细胞凋亡率及细胞周期。结果RT—PCR和Western blot证实，HMGA1转染组细胞存在HMGA1基因表达下调：HMGAlmRNA的表达量转染组（0．11％±0．02％）明显低于未转染组（0．89％±0．02％，t=46．6，P〈0．01）；HMGA1蛋白的表达量转染组（0．18％±0．02％）明显低于未转染组（0．86％±0．03％，t=22．6，P〈0．01）。HMGA1转染组细胞较未转染组细胞对6MVX射线的敏感性增加，增敏比为1．73。流式细胞仪检测，转染组凋亡率（37．4％±3．1％）显著高于未转染组（6．1％±0．5％，t=12．9，P〈0．05）；转染组细胞周期存在G0／G1期延迟（72．6％±2．4％）显著高于未转染组（45．2％±1．6％，t=16．2，P〈0．05））。结论HMGA1 siRNA能特异性下调细胞SHG-44中HMGA1的表达，增强了该脑胶质瘤细胞对X射线的辐射敏感性。; 肖韡孙新臣秦叔逵成红艳张伟曹远东李帆; 关键词：RNA干扰 HMGA1 脑胶质瘤细胞

慢病毒介导RNA干扰抑制脑胶质瘤细胞HMGA1表达对洛铂化疗敏感性的影响被引量：3: 2009年; 目的:建立逆转录病毒介导入高迁移率族蛋白组A1(HMGA1)基因RNA干扰体外表达体系,并观察洛铂对脑胶质瘤细胞株SHG-44化疗敏感性的影响。方法:制备HMGA1 siRNA慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定;转染脑胶质瘤细胞株SHG-44后,RT-PCR检测其对细胞HMGA1基因表达的影响;MTT和克隆集落实验检测洛铂对阳性组和阴性组细胞生长、增殖的影响。结果:PCR和测序证实,成功构建HMGA1 siRNA的慢病毒载体;RT-PCR证实阳性组细胞存在HMGA1基因表达下调;分别用不同浓度的洛铂处理两组细胞24h后,MTT法和克隆集落实验显示阳性组细胞生长抑制率较阴性组细胞明显降低。结论:HMGA1 siRNA能特异性下调脑胶质瘤细胞SHG-44中HMGA1的表达并抑制了其对洛铂的敏感性。; 李帆孙新臣秦叔逵成红艳肖伟张伟孟庆红; 关键词：RNA干扰洛铂脑胶质瘤

RNAi抑制肺癌细胞HMGA1基因表达对放射敏感性的影响被引量：1: 2010年; 目的探讨慢病毒介导核糖核酸干扰(RNAi)抑制高迁移率族蛋白A1(HMGA1)表达对肺癌细胞株SPCA-1放射敏感性的影响。方法将前期制备的HMGA1siRNA慢病毒载体转染肺癌细胞SPCA-1;半定量RT-PCR和Western blot分别检测HMGA1mRNA及蛋白表达情况;细胞克隆形成实验、多靶单击模型拟合绘制细胞存活曲线观察细胞放射敏感性的变化;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果RT-PCR和Western blot证实阳性组细胞HMGA1基因表达下调;细胞存活曲线显示阳性组细胞平均致死剂量(D0)、准阈剂量(Dq)及2Gy照射后的细胞存活分数(SF2)均为高于对照组及阴性组(P<0.05);流式细胞术检测阳性组细胞凋亡率则均低于对照组及阴性组(P<0.05)。结论HMGA1siRNA特异性地下调SPCA-1细胞中HMGA1基因表达,可抑制细胞凋亡,并降低细胞的放射敏感性。; 张伟孙新臣陈宝安成红艳李宜坤李帆肖韡; 关键词：核糖核酸干扰高迁移率族蛋白A1 肺腺癌

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李帆