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李朝辉
作品数:
2
被引量:3
H指数:1
供职机构:
昆明医学院生物医学工程研究中心
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发文基金:
云南省教育厅科学研究基金
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
田长富
昆明医学院生物医学工程研究中心
张晓芳
昆明医学院生物医学工程研究中心
林琳
昆明医学院生物医学工程研究中心
彭江丽
昆明医学院生物医学工程研究中心
赵瑜
昆明医学院生物医学工程研究中心
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年份
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2009
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重组L-蛋氨酸γ-裂解酶基因原核表达载体构建及初步鉴定(摘要)
2009年
目的构建原核表达载体,筛选高表达克隆,提取蛋氨酸酶蛋白,为深入研究蛋氨酸酶体内外抗肿瘤作用做前期准备.方法化学法合成METase基因,将所得基因插入原核表达载体PGEX-4T-1,得到重组质粒并转化人大肠杆菌.通过蛋氨酸诱导筛选高表达克隆.用SDS—PAGE初步检测蛋白.结果重组质粒经PCR检测、酶切、测序证实与预期一致.重组的质粒在蛋氨酸的诱导下表达大量的蛋氨酸酶,并经SDS—PAGE检测,表达产物的分子量同预期结果相符.
李朝辉
田长富
关键词:
原核表达
重组质粒
METase在不同原核表达系统中的表达和活性比较
被引量:3
2009年
目的:构建L-蛋氨酸γ-裂解酶(Metase)基因的两种高效原核表达载体,建立最佳高效原核表达体系。方法:在Metase基因已经克隆的基础上,通过分子克隆技术构建两种重组表达质粒pBV220-Metase和pGEX-4T-1-Metase,重组质粒转化感受态大肠杆菌Dh5α,诱导表达,测定Metase活性,统计分析比较。结果:成功构建出两种高效重组表达质粒pBV220-Metase和pGEX-4T-1-Metase,经诱导后都能测出Metase活性。结论:重组表达质粒pBV220-Metase具有比pGEX-4T-1-Metase更强的活性,可作为Metase的高效表达体系。
彭江丽
赵瑜
张晓芳
李朝辉
林琳
付崴
田长富
关键词:
原核表达
活性测定
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