李海生
- 作品数：4 被引量：39H指数：3
- 供职机构：石河子大学农学院园艺系更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划引导项目国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 库尔勒香梨总RNA的快速提取方法被引量：11
- 2004年
- 以库尔勒香梨花、芽、茎尖、叶片和皮层为材料,对总RNA提取方法进行了改进,从而筛选出适合库尔勒香梨总RNA的提取方法。采用该方法可以在3～4h内得到纯度高、含量高、完整性好的梨总RNA,并获得了逆转录活性较强的病毒RNA,同时使提取成本降低。此方法对苹果、葡萄、桃等果树总RNA的提取均适用。
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- 关键词：库尔勒香梨总RNA茎尖快速提取方法皮层逆转录
- 库尔勒香梨病毒病多重RT-PCR检测技术研究被引量：5
- 2004年
- 在建立PVYV和ACLSVRT PCR优化体系的基础上,主要研究了多重PCR中2套引物的浓度和退火温度的影响,研究表明:多重PCR体系中引物Tm值越高、长度越长浓度就需越高;如果Tm值相差不大,退火温度的确定要以Tm值高的引物为准。应用该体系可以节约成本、缩短时间。
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- 关键词：多重RT-PCR
- 库尔勒香梨主要病毒多重RT-PCR检测技术研究被引量：25
- 2006年
- 利用nad5基因作为内标系统,研究建立了库尔勒香梨上苹果茎痘病毒(ASPV)、苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎沟病毒(ASGV)等的RT-PCR检测技术,在此基础上研究建立了库尔勒香梨多重RT-PCR内标检测系统。并对回收的特异片段进行了克隆、鉴定和测序。测序结果表明:库尔勒香梨上的ACLSV与GenBank中D14996序列(日本苹果上的 ACLSV分离物)中的6860-7536 bp片段有116个碱基的差异,序列相似性为83．75％;库尔勒香梨上的ASPV与GenBank 中D21828序列(德国梨脉黄病毒相关分离物)中的8869-9238 bp片段有72个碱基的差异,序列相似性为79．5％;库尔勒香梨上的ASGV与GenBank中AB004063序列(日本ASGV分离物)中的6039-6311 bp片段有21个碱基的差异,序列相似性为92．3％。
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- 关键词：病毒内标多重RT-PCR
- 梨树病毒cDNA探针检测技术研究
- 合成了生物素标记的cDNA探针,优化了检测体系,并对香梨样品进行检测,斑点清晰,是首次应用生物素标记的cDNA探针对ACLSV进行检测。
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- 关键词：库尔勒香梨苹果褪绿叶斑病毒CDNA探针
- 文献传递
