李淑云
- 作品数：9 被引量：17H指数：2
- 供职机构：江西农业大学蜜蜂研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省科技支撑计划项目国家现代蜂产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 西方蜜蜂RBP1基因的克隆及mRNA表达分析
- 2017年
- 【目的】RBP1是一种参与黑腹果蝇Drosophila melanogaster性别决定基因doublesex(dsx)premRNA选择性剪接的重要剪接因子。本研究旨在克隆RBP1基因在西方蜜蜂Apis mellifera中的同源基因AmRBP1,分析其结构域及其在西方蜜蜂性别决定初期胚胎和幼虫不同发育阶段中的表达模式,以期为研究该基因是否参与蜜蜂性别决定奠定基础。【方法】基于NCBI中提交的西方蜜蜂基因数据库和转录组数据库,利用黑腹果蝇rbp1对数据库进行同源检索获得RBP1的转录组序列,并设计引物进行PCR扩增克隆AmRBP1基因,利用生物信息学软件对其进行核酸及氨基酸序列分析。采用半定量RT-PCR技术分析该基因在西方蜜蜂胚胎及幼虫期的表达模式。【结果】由序列比对分析可知,西方蜜蜂AmRBP1基因的pre-mRNA含有3种不同的选择性剪切形式。通过设计不同的引物,克隆得到3种成熟的mRNA序列,分别命名为AmRBP1-R1(Gen Bank登录号:KY404154)、AmRBP1-R2(Gen Bank登录号:KY404155)和AmRBP1-R3(Gen Bank登录号:KY404156);mRNA长度分别为696,790和771 nt,编码的蛋白大小分别为130,166和162 aa;结构域分析发现AmRBP1的3种选择性剪切形式具有相同的结构域,氨基端含有一个RRM结构域,羧基端含有一个RS结构域。同源性分析表明,西方蜜蜂AmRBP1与丽蝇蛹集金小蜂Nasonia vitripennis、红火蚁Solenopsis invicta、埃及伊蚊Aedes aegypti、黑腹果蝇D.melanogaster、家蚕Bombyx mori、家蝇Musca domestica和中华按蚊Anopheles sinensis RBP1蛋白氨基酸序列一致性分别为96.97%,94.20%,84.85%,81.48%,80.28%,78.15%和69.23%。半定量RT-PCR结果表明,AmRBP1基因的3种剪切形式(AmRBP1-R1-3)在西方蜜蜂胚胎和幼虫各时期均有表达,无雌特异性或雄特异性表达的剪切形式。【结论】西方蜜蜂AmRBP1可能是一种SR家族剪切因子,其有可能参与调控基因表达的特定剪切,但其是否参与doublesex(dsx)基因pre-mRNA的性别特异性剪切需要
- 胡弯弯李淑云曾志将曾志将颜伟玉
- 关键词：西方蜜蜂基因克隆性别决定选择性剪切
- 中华蜜蜂二倍体雄蜂人工培育及形态测定
- 2014年
- 目的研究中华蜜蜂(Apis cerana cerana)二倍体雄蜂并进行人工培育,测定其形态指标,明确中华蜜蜂二倍体雄蜂的生物学特性。方法采用复式移虫方法培育中华蜜蜂蜂王,待蜂王性成熟时进行CO2麻醉处理后放回原群,用糖水进行奖励饲喂。蜂王产下大量未受精卵,待雄蜂出房后采用颜料进行标记。雄蜂性成熟后,利用蜂王人工授精技术使蜂王与本群子代雄蜂进行母子回交(多雄交配)。控制蜂王产卵,将工蜂巢房中刚孵化的幼虫移至恒温恒湿培养箱(相对湿度:95%;温度:35℃)中进行人工培育。幼虫前3日龄食物配制为:蜂王浆90%,无菌水10%;第4—6日龄食物成分比例为:蜂王浆50%,葡萄糖6%,果糖6%,酵母抽出物1%,无菌水37%;从第7日龄起食物比例为:蜂王浆43%,葡萄糖9%,果糖9%,酵母抽出物1%,无菌水38%,直到幼虫进入排便期为止。采用流式细胞仪对人工培育和蜂群工蜂巢房出房的雄蜂进行倍性鉴定,并对蜂群工蜂巢房出房的单倍雄蜂和二倍体雄蜂进行形态指标测定比较。结果室内人工培育的中华蜜蜂总羽化率偏低,平均为36%,其中26.9%为雄蜂;通过流式细胞仪分析雄蜂倍性发现人工培育的雄蜂92%为二倍体,蜂群工蜂巢房中出房的雄蜂82%为二倍体雄蜂;形态指标测定显示,二倍体雄蜂的初生重与生殖器官重分别为99.78和6.05 mg,均比单倍体雄蜂(分别为105.64和7.02 mg)显著偏小,而前翅长、前翅宽、翅钩数等指标差异不显著。结论中华蜜蜂近亲交配的蜂群会产生二倍体雄蜂,部分二倍体雄蜂可在蜂群中发育至成蜂出房,其形态指标与单倍体雄蜂存在一定差异。
- 甘海燕李淑云曾志将颜伟玉
- 关键词：中华蜜蜂
- 蜜蜂性别决定基因csd互作因子的鉴定
- [目的]csd基因为蜜蜂性别决定关键基因,但其决定蜜蜂性别的具体分子机理还不清楚.本研究对与蜜蜂csd基因互相作用的因子进行了筛选鉴定及功能分析.[方法]以36小时的蜜蜂受精卵为材料构建酵母双杂交cDNA文库,通过对文库...
- 王子龙胡弯弯李淑云曾志将
- 关键词：蜜蜂性别决定酵母双杂交选择性剪切
- 意大利蜜蜂刚出房与性成熟雄蜂的蛋白质组差异分析被引量：2
- 2015年
- 【目的】对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica刚出房雄蜂与性成熟雄蜂的蛋白质组进行比较,探讨雄蜂在性成熟过程中蛋白质表达变化,为进一步研究雄蜂发育生物学获得差异表达蛋白质方面的依据。【方法】采用双向电泳法建立意大利蜜蜂雄蜂发育过程中刚出房时与性成熟期的蛋白质表达谱,通过质谱分析与数据库检索,鉴定部分差异蛋白。【结果】在意大利蜜蜂刚出房雄蜂和性成熟雄蜂中分别检测到2 490和2 317个蛋白点,其中差异表达蛋白点有157个。在刚出房雄蜂中高度表达的蛋白点有102个;在性成熟雄蜂中高度表达的蛋白点有55个。对部分差异蛋白进行质谱分析,共鉴定了18个蛋白点,其中在刚出房雄蜂中上调表达的蛋白有肌钙蛋白、SEC13蛋白、DJ蛋白等,在性成熟雄蜂中上调表达的蛋白有副肌球蛋白、精氨酸激酶、肌动蛋白解聚因子等。【结论】意大利蜜蜂雄蜂在性成熟发育过程中,其体内大量蛋白表达发生了变化,其差异表达的蛋白质可能与骨骼、飞行肌以及精子发育等机能有关。
- 吴小波李淑云颜伟玉曾志将
- 关键词：意大利蜜蜂雄蜂发育蛋白质组差异表达蛋白
- 羽化和性成熟时中华蜜蜂蜂王和雄蜂转录组分析被引量：6
- 2014年
- 【目的】为了系统了解中华蜜蜂Apis cerana cerana蜂王和雄蜂转录组特征,丰富蜜蜂转录组数据信息。【方法】本研究利用高通量测序的方法分别检测中华蜜蜂蜂王和雄蜂刚出房、性成熟时期以及性成熟期蜂王生殖系统和雄蜂生殖系统之间转录组表达差异。【结果】经过测序获得质量值不低于20的碱基比例(Q20)均高于90%;所有reads组装成90 839个unigenes,平均长度1 549 bp;基于5个数据库(NR,Swiss-Prot,GO,COG和KEGG)进行比对,共有45 112个unigenes被注释。差异基因表达分析发现,与刚出房时相比,性成熟的蜂王和雄蜂均在表皮蛋白、细胞色素P450、气味结合蛋白等家族基因上存在显著差异表达,而且这些差异表达基因与蜜蜂生长发育和性成熟过程中蜜蜂骨骼发育、生殖系统发育、嗅觉发育等方面有关;性成熟蜂王与性成熟雄蜂之间以及它们生殖系统之间在气味结合蛋白基因方面存在显著差异。【结论】结果表明,中华蜜蜂在性成熟过程中,体内大量基因的表达发生了变化。这些结果揭示了中华蜜蜂性成熟发育的整体基因表达特征,在得到大量转录组unigene序列的同时,获得了一批与蜜蜂性成熟有关的基因序列,为深入开展中华蜜蜂生长发育与繁殖研究提供了丰富的数据资源。
- 吴小波王子龙李淑云甘海燕刘浩颜伟玉曾志将
- 关键词：中华蜜蜂蜂王雄蜂生殖系统
- 中华蜜蜂二倍体雄蜂的人工培育及倍性鉴定
- [目的]为了建立人工培育中华蜜蜂(Apis cerana cerana,简称中蜂)二倍体雄蜂的方法。[方法]人工培育蜂王,用CO2麻醉处女王,促使处女蜂王产未受精卵,待雄蜂性成熟,通过人工授精使蜂王与它们的儿子回交；蜂王...
- 甘海燕李淑云颜伟玉
- 关键词：倍性流式细胞仪
- 文献传递
- 中华蜜蜂与意大利蜜蜂性成熟处女蜂王蛋白质组比较分析被引量：1
- 2015年
- 为了比较分析中华蜜蜂和意大利蜜蜂两蜂种处女蜂王性成熟期蛋白表达差异。试验采用双向电泳法建立中华蜜蜂和意大利蜜蜂处女蜂王性成熟期蛋白质表达谱,通过质谱分析与数据库检索,鉴定部分差异蛋白。研究发现:在中华蜜蜂蜂王和意大利蜜蜂蜂王中分别检测到2 205、2 417个蛋白点,两者之间的差异表达蛋白点有168个。其中,在中华蜜蜂蜂王高度表达的蛋白点有90个;在意大利蜜蜂蜂王中高度表达的蛋白点有78个。对部分差异蛋白进行质谱分析,共鉴定了19个蛋白点,其中在中华蜜蜂性成熟处女蜂王中上调表达的蛋白有副肌球蛋白、肌钙蛋白T、ATP合成酶以及丙酮酸脱氢酶等;在意大利蜜蜂性成熟处女蜂王中上调表达的蛋白有NADH辅酶Q氧化还原酶、保幼激素酸甲基转移酶、肌钙蛋白以及气味结合蛋白19前体等。中华蜜蜂与意大利蜜蜂性成熟处女蜂王体内存在大量蛋白表达差异,这些差异表达的蛋白质可能与两蜂种蜜蜂行为生物学有关。
- 吴小波王子龙李淑云颜伟玉曾志将
- 关键词：中华蜜蜂意大利蜜蜂蜂王蛋白质组
- 蜜蜂仿生免移虫育王技术的初步研究被引量：8
- 2013年
- 为了探索蜜蜂免移虫育王的方法,试验以意大利蜜蜂为材料,利用蜜蜂仿生免移虫生产器进行蜜蜂仿生免移虫育王,检测这种育王方法的幼虫接受率及育王质量,包括蜂王初生重、卵巢重及卵巢管数,并以人工移虫育王作为对照。结果表明:在幼虫接受率方面,蜜蜂仿生免移虫育王法与人工移虫育王法相比差异不显著(P>0.05);但在蜂王初生重、卵巢重及卵巢管数方面,蜜蜂仿生免移虫育王法显著优于人工移虫育王法(P<0.05)。说明利用蜜蜂仿生免移虫生产器可以建立蜜蜂仿生免移虫育王方法,而且这种方法培育的蜂王在幼虫接受率、初生重及卵巢质量等方面均优于传统的育王方法。
- 张飞甘海燕李淑云曾志将吴小波
- 关键词：意大利蜜蜂蜂王质量
- 蜜蜂性别决定相关基因的研究进展被引量：1
- 2015年
- 蜜蜂是继果蝇后的一种重要经济模式昆虫,其典型的单双倍体性别决定机制一直受众多国内外研究学者关注。就近年来对蜜蜂性别决定分子机制相关基因csd、fem、tra2、dsx等的研究进展进行综述。
- 李淑云王子龙颜伟玉
- 关键词：蜜蜂性别决定基因
