李萍 作品数:7 被引量:7 H指数:1 供职机构: 解放军农牧大学 更多>> 发文基金: 国家杰出青年科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
HIV-1 Gag蛋白的高效表达调控研究 1997年 LTR位于HIV前病毒同DNA基因组的两末端,Gag基因位于5′端LTR的下游。LTR对转录的调控作用主要是由5′端LTR进行的。LTR具有启动子的作用,在结构上具有真核启动子的典型特征。另外,HIV-1 Gag蛋白还有能够自我装配成病毒样粒子(virus like particle,VLP)并从细胞中释放出来的重要特性。 我们利用痘苗病毒表达系统。 毛春生 金宁一 郭志儒 郭志儒 马奉龙 王宏伟 李萍 殷震关键词:GAG蛋白 重组痘苗病毒 HIV-1 启动子 GAG基因 重组病毒 在重组痘苗病毒中共表达HIV-1env与hIL-6基因 2000年 本实验以 HIV- 1env与 h IL - 6基因在重组痘苗病毒中的共表达研究为目的 ,将痘苗病毒复制非必需区血凝素(HA )基因作为侧翼 ,把编码人白细胞介素 6 (h IL - 6 )的基因片段克隆到真核表达质粒 p J38env的下游 ,构建成含有 HIV- 1env与 h IL - 6两种外源基因的重组表达质粒 PJ38E- IL 6 ,经同源重组和血凝素阴性空斑筛选 ,获得了重组痘苗病毒 v J38E- IL 6。经间接免疫荧光试验、Dot- EL ISA和 Western bolt等检测证明 ,重组病毒能同时表达 env蛋白和 IL - 6蛋白 ,表达产物的分子量分别为 98k Da、2 6 k 王玉红 金宁一 李体远 王宏伟 刘素寰 王弘郡 李萍 安汝国 殷震关键词:重组痘苗病毒 艾滋病 HIV-1基质蛋白P17的原核表达与纯化 被引量:1 2001年 目的 :HIV- 1p17基因在大肠杆菌中高效表达并纯化目的蛋白。方法 :1PCR法扩增的 HIV-1p17基因片段克隆至 p ET2 8c质粒 ;2重组质粒分别在大肠杆菌 BL 2 1、BL 2 1(DE3)、BL 2 1(DE3) plys S及 HMS174 (DE3)中表达 ;3用 Ni- NTA金属树脂层析法纯化目的蛋白 ;4用酶联免疫法和免疫印迹法检测纯化蛋白的特异性。结果 :重组质粒在 BL (DE3)中表达量最高 ,目的蛋白表达量占全菌体裂解物的32 % ,纯化后其纯度达 95% ,纯化蛋白可与 p17Mc Ab和 HIV- 1阳性血清发生特异反应。结论 :带有HIV- 1p17片段的重组质粒 p ET2 8c在大肠杆菌 BL2 1(DE3)中获得高效表达 ,蛋白表达量可满足其免疫、生物活性的进一步研究 ;用 Ni- NTA金属树脂层析法纯化蛋白 ,方法简便 ,蛋白丢失少 ,纯度高 ;纯化的重组蛋白 HIV- 1p17可用来临床早期诊断 HIV- 1感染者 ,同时可预测患者的临床进程。 李钟洙 金宁一 王宏伟 郭志儒 李萍 杨翰仪 殷震关键词:纯化 HIV-1 酶联免疫法 免疫印迹法 HIV-1结构基因与白细胞介素基因在重组痘苗病毒中的共表达研究 被引量:1 1999年 王玉红 金宁一 李体远 王宏伟 王弘郡 刘素寰 李萍 安汝国 殷震关键词:HIV 结构基因 白细胞介素 重组痘苗病毒 HIV-1 env与hIL-2基因在重组痘苗病毒中的共表达研究 1999年 以痘苗病毒复制非必需区血凝素(HA)基因为侧翼,将编码人白细胞介素2(hIL-2)的基因片段克隆到真核表达质粒pJ38env 的下游,构建成含有HIV-1 env 和hIL-2两种外源基因的重组表达质粒pJ38E-IL-2,经同源重组和血凝素阴性空斑筛选,获得了重组痘苗病毒vJ38E-IL2。经间接免疫荧光试验、Dot-ELISA和Western bolt等检测证明:重组病毒能同时表达Env 蛋白和IL-2蛋白,表达产物分子量分别为98×103 、16×103。 王玉红 金宁一 李体远 王洪军 王弘郡 刘素寰 李萍 安汝国 殷震关键词:HIV-1 ENV HIL-2 痘苗病毒 HIV-1 p24 gag 与hIL-2基因在重组痘苗病毒中的共表达研究 被引量:1 1999年 目的:研究 H I V1p24 gag 与 h I L2基因在重组痘苗病毒中的共表达。方法:以痘苗病毒复制非必需区血凝素( H A)基因为侧翼,将编码人白细胞介素2(h I L2)的基因片段克隆到真核表达质粒p16 Q F24 I L2,经同源重组和血凝素阴性空斑筛选,获得了重组痘苗病毒v16 Q F24 I L2。结果:经间接免疫荧光试验、 Dot E L I S A 和 W estern bolt 等检测证明,重组病毒能同时表达p24 gag 蛋白和 I L2蛋白,表达产物分子量分别为24 000、16 000。结论:这种重组痘苗病毒人表达外源蛋白的成功,为获得更强的免疫效果,研制 H I V 重组病毒活疫苗提供一种安全的新途径。 王玉红 金宁一 李体远 王洪军 王弘郡 刘素寰 李萍 安汝国 殷震关键词:HIL-2 痘苗病毒 抗HIV核心蛋白p24单克隆抗体的研制及鉴定 被引量:4 1998年 抗HIV核心蛋白p24单克隆抗体的研制及鉴定王宏伟金宁一刘仔郭军庆郭志儒毛春生李萍殷震(解放军农牧大学研究所病毒室,长春130062)人I型免疫缺陷病毒(HIV1)是导致人获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的主要病原[1]。对HIV1感染的诊断,常... 王宏伟 金宁一 刘仔 郭军庆 郭志儒 毛春生 李萍 殷震关键词:抗HIV 单克隆抗体