沈宁
- 作品数：8 被引量：1H指数：1
- 供职机构：南京大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 早期应激蛋白EgR-1及其相关信号通路调控机体血糖稳态的研究
- 血糖稳态的维持是人体各器官发挥正常生理功能的前提，血糖水平过高或过低都会对各组织器官产生损伤。血糖稳态的维持主要受胰岛素和胰高血糖素调控。如果各器官对胰岛素和胰高血糖素的应答反应发生异常，那么机体血糖稳态就无法维持。机体...
- 沈宁
- 关键词：糖尿病发病机制应激蛋白
- GGPPS拮抗剂在制备治疗II型糖尿病药物中的用途
- 本发明公开了GGPPS在II型糖尿病药物治疗中的应用，尤其提供了GGPPS拮抗剂在制备治疗II型糖尿病药物中的用途。本发明首次公开了GGPPS基因和蛋白的拮抗剂可以用于制备治疗Ⅱ型糖尿病的增敏药物，有助于提高胰岛素把组织...
- 薛斌李朝军沈宁郁晓陆克
- 文献传递
- GGPPS基因在制备治疗非酒精性脂肪肝药物的用途
- 本发明提供了GGPPS作为靶点治疗非酒精性脂肪肝的应用。本发明的GGPPS拮抗剂能降低与肝脏脂质积累有关的基因表达。本发明的肝脏特异性敲除GGPPS可以减缓肝脏脂质积累和变性，降低血液中天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转...
- 李朝军薛斌姜珊石梦月沈宁
- 文献传递
- cnksr2基因干扰腺病毒的构建及鉴定
- 2013年
- 构建小鼠cnksr2基因干扰腺病毒质粒载体并加以鉴定.根据小鼠cnksr2基因序列设计cnksr2干扰序列引物,定向克隆至穿梭载体pshuttle-H1的BglⅡ和HindⅢ位点,PmeⅠ酶切线性化的pShuttle-H1-Sicnksr2干扰质粒,并与腺病毒载体(pAdEasy-1质粒)共同转化E.coli BJ5183感受态细菌,产生重组腺病毒载体.用PacⅠ酶切线性化的回收质粒,转染293A细胞,包装腺病毒颗粒,在倒置显微镜下观察细胞病理性变化(Cell pathological effect,CPE),用TCID50法测定病毒颗粒的浓度,并初步观察病毒感染PC12细胞对目的基因的干扰效率.经酶切鉴定、测序证实成功构建小鼠cnksr2基因干扰腺病毒载体.包装的腺病毒浓缩悬液滴度为3.98×107PFU/mL.cnksr2在大鼠及小鼠中具有保守性,该病毒能在大鼠来源的PC12细胞中成功表达,并且对cnksr2基因干扰效率达50%以上.结论:成功构建了小鼠cnksr2基因的干扰腺病毒载体.
- 梁金沈宁徐康李朝军薛斌
- 关键词：腺病毒
- Egr-1拮抗剂在制备治疗Ⅱ型糖尿病的药物中的用途
- 本发明提供了Egr-1作为治疗Ⅱ型糖尿病靶标的应用，尤其是提供了Egr-1拮抗剂在制备治疗Ⅱ型糖尿病的药物中的用途。本发明的Egr-1拮抗剂能增加胰岛素敏感性，防止胰岛素抵抗。本发明的Egr-1拮抗剂是能够抑制Egr-1...
- 李朝军薛斌沈宁郁晓罗欧阳
- 文献传递
- Egr-1通过激活GGPPS转录影响Ras的异戊二烯化调控胰岛素抵抗
- Ⅱ型糖尿病是一种多病因的代谢疾病，发病率很高。胰岛素抵抗是Ⅱ型糖尿病以及肥胖症的一个重要临床特征，也是导致这些疾病发生的重要因素。
Egr-1(the early growth responsive gene-1,...
- 沈宁
- 关键词：胰岛素抵抗信号通路
- 文献传递
- 重组GGPPS腺病毒载体的构建及其调节肝星状细胞活化的研究
- 2011年
- 目的:构建携带人源ggpps基因的重组腺病毒并用其研究GGPPS对人肝星状细胞的活化作用.方法:利用PCR方法扩增ggpps基因片段,并亚克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,形成穿梭质粒pAdTrack-CMV-GGPPS.测序正确后,经PmeI单酶切线性化的pAdTrack-CMV-GGPPS与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1用电穿孔法共转化大肠杆菌BJ5183,进行同源重组.经PacI酶切鉴定正确后,用磷酸钙法转染QBI-293A细胞,包装成重组体腺病毒Ad-GGPPS颗粒.利用穿梭质粒pAdTrack-CMV中GFP报告基因的表达,观察重组腺病毒的产生.用TCID50法测定病毒颗粒的浓度,并用免疫蛋白印迹和实时荧光定量PCR方法鉴定目的基因的表达.然后利用该病毒感染人肝星状细胞LX-2,观察对肝星状细胞的活化以及细胞外基质合成的影响.结果:成功地构建了携带ggpps基因的重组腺病毒,得到的病毒滴度经TCID50法检测为2.5×109PFU/mL.该病毒能够在人源的肝脏细胞中成功表达GGPPS蛋白.在LX-2细胞中过量表达GGPPS可以促进肝星状细胞(Hepatic stellate cells,HSCs)转分化成表达平滑肌肌动蛋白α(Alpha-Smooth muscle actin,α-SMA)的肌成纤维细胞(Myofibroblast,MF),同时检测到胞外基质成分纤连蛋白(Fibronectin,FN)的表达量显著增加.结论:成功构建的重组GGPPS腺病毒能促进肝星状细胞的活化.
- 来珊珊陈卫波徐康丁尧沈宁潘飞燕李朝军薛斌
- 关键词：重组腺病毒肝星状细胞
- 早期反应基因Egr-1参与高糖诱导β细胞凋亡的初步研究
- 2013年
- 糖尿病是一种慢性代谢性疾病,胰岛β细胞功能损伤或数量减少都会导致其发生。该研究主要探讨早期反应基因-1(early growth responsive gene-1,Egr-1)参与高糖诱导β细胞凋亡的过程。利用永生化NIT-1胰岛β细胞株为实验模型,分成正常对照组和高糖组;通过MTT、DAPI染色和DNA Ladder以及流式细胞术等手段检测持续性高糖刺激对细胞活力和凋亡的影响;采用Real-time PCR和Western blot法检测Egr-1转录和蛋白表达水平;竞争性抑制Egr-1活性后检测细胞活力和凋亡的变化。研究发现,与对照组相比持续性高糖刺激后细胞活力下降,凋亡明显增加(48 h,P<0.05;72 h,P<0.01);Egr-1转录和蛋白表达水平均显著上调(P<0.01),抑制其表达活性可以明显改善细胞活力和降低凋亡水平(48 h,P<0.05)。提示Egr-1的确参与到高糖诱导β细胞凋亡的过程中。
- 李聪姜珊沈宁高基民李朝军
- 关键词：糖毒性胰岛Β细胞细胞凋亡EGR-1
